식품의약품안전청공고 제2008-177호

식품의 기준 및 규격 일부개정고시안

2008. 9. 22

식품의약품안전청

식품의약품안전청공고 제2008-177호

「식품의 기준 및 규격」을 개정함에 있어 국민에게 미리 알려 의견을 수렴하고자 그 취지, 개정 이유 및 주요 내용을 「행정절차법 제41조 및 제46조」의 규정에 따라 다음과 같이 공고합니다.

2008년 9월 22일

식품의약품안전청장

식품의 기준 및 규격 일부개정고시안 입안예고

1. 개정이유

원료농산물인 숙지황 및 건지황을 제조하는 과정에서 생성될 수 있는 벤조피렌 기준신설을 신설 및 식품위생과 현실성을 고려한 과자류 중 유밀과에 대한 산가 규격과 즉석조리식품 중 발효식품에 대한 세균수 기준을 제․개정하여 국민에게 안전한 식품을 공급하고자 함

2. 주요내용

가.  과자류 산가 규격 개정 〔제 5. 1. 5), (2)〕

(1) 한과류 제조시 유탕처리에 사용되는 식용유지는 제조과정 중에 식품원료에 의해 산가가 상승되는 요인이 있어 합리적인 기준필요

(2) 과자류 중 유밀과에 대한 산가 기준을 3.0 이하로 개정

(3) 식품의 특성에 맞는 합리적인 규격 마련

나. 즉석조리식품의 세균수 규격 단서조항 신설(제5. 19-18.)

(1) 즉석조리식품에 대해 세균수 규격을 두고 있으나, 발효에 의해 생성된 유산균, 젖산균 등이 함유된 식품에 대한 현실성 있는 기준 필요

(2) 즉석조리식품의 세균수 규격에 대해 발효제품은 제외하도록 개정

(3) 제조공정을 감안한 합리적인 규격 마련

다. 숙지황 및 건지황에 대한 벤조피렌 기준 신설(제2. 5. 12), (3))

(1) 숙지황 및 건지황의 제조공정에서 발생될 수 있는 벤조피렌에 대한 관리기준 필요

(2) 식품 중 기타유해물질 중 숙지황 및 건지황에 대한 벤조피렌 기준 신설

(3) 식품원료의 안전성확보

라. 농약잔류시험법 신설 (제10. 9)

(1) 효율적인 분석업무수행을 위해 과학적인 시험법 신설

(2) 농약잔류허용기준 신설에 따른 시험법신설

(3) 과학적인 분석업무 수행가능

3. 시행일

제1조(시행일) 이 고시는 고시한 날부터 시행한다.

제2조(경과조치) 이 고시 시행 당시 접수되어 검사가 진행 중인 사항에 대하여는 종전의 규정을 적용한다.

4. 의견제출

「식품의 기준 및 규격」 일부개정고시(안)에 대하여 의견이 있는  단체 또는 개인은 2008년 10월 21일까지 다음 사항을 기재한 의견서를 식품의약품안전청장(주소 : 서울특별시 은평구 통일로 194, 참조 : 위해기준과, 전화 02-380-1690, 1699, 팩스 02-383-2870)에게 제출하여 주시기 바랍니다.

가. 예고사항에 대한 항목별 의견(찬․반 여부와 그 이유)

나. 성명(단체의 경우 단체명과 그 대표자의 성명), 전화번호 및 주소

다. 기타사항

식품의약품안전청공고 제2008-177호

「식품위생법」 제7조제1항에 따른 「식품의 기준 및 규격」(식품의약품안전청 고시 제2008-51호, 2008. 8. 13)을 다음과 같이 개정합니다.

2008년  9월 22일

식품의약품안전청장

식품의 기준 및 규격 일부개정고시(안)

식품의 기준 및 규격 일부를 다음과 같이 개정한다.

제 1, 2, 29)를 다음과 같이 한다.

“가공식품”이라 함은 식품원료(농, 임, 축, 수산물 등)에 식품 또는 식품첨가물을 가하거나, 그 원형을 알아볼 수 없을 정도로 변형(분쇄, 절단 등) 시키거나 이와 같이 변형시킨 것을 서로 혼합 또는 이 혼합물에 식품 또는 식품첨가물을 사용하여 제조․가공․포장한 식품과 농․임산물을 세척, 박피, 절단 또는 세절 등의 가공공정을 거치거나 이에 단순히 식품 또는 식품첨가물을 가한 것으로 소비자가 그대로 섭취할 수 있도록 제조․가공․포장한 신선편의식품을 말한다. 다만, 신선편의식품을 제외한 식품첨가물이나 다른 원료를 사용하지 아니하고 원형을 알아볼 수 있는 정도로 농․임․축․수산물을 단순히 자르거나 껍질을 벗기거나 소금에 절이거나 숙성하거나 가열(살균의 목적 또는 성분의 현격한 변화를 유발하는 경우를 제외한다) 등의 처리과정 중 위생상 위해 발생의 우려가 없고 식품의 상태를 관능으로 확인할 수 있도록 단순처리한 것은 제외한다.

제 2, 5, 12), (3) 중 ②를 다음과 같이 신설한다.

② 숙지황 및 건지황 : 5.0 ㎍/kg 이하

제 5, 1, 5), (2) 중 “유탕처리식품에 한한다”를 “유탕처리식품에 한하며, 유밀과는  3.0이하”로 한다.

제 5, 29-18, 5), (2) 중 “즉석조리식품에 한한다”를 “즉석조리식품에 한하며, 발효제품 또는 유산균첨가제품은 제외한다)

제 10. 9. 중 160)부터 162)까지를 각각 다음과 같이 신설한다.

160) 오리사스트로빈(Orysastrobin) 시험법

1) 시험법 적용범위

곡류

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 디클로로메탄/헥산 혼합액 (20/80, v/v)으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축하고 후로리실 칼럼크로마토그래피(용출용매 : 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (10/90, v/v))로 정제하여 액체크로마토그래프로 측정한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/자외부흡광검출기(UV Detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 후로리실 (Florisil) : 잔류농약분석용 (60～100 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

라) 표준원액 : 오리사스트로빈을 아세토니트릴에 녹여 500 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 아세토니트릴에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(곡류 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 ㎛를 통과하도록 분쇄한 후 그 25 g을 단다)를 호모게나이저 용기에 달아 물 20 mL를 넣고 습윤화 한다. 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한 다음 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL과 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 디클로로메탄/헥산 혼합액 (20/80, v/v) 100 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 정치한다. 수용액층은 버리고 유기용매층을 무수황산나트륨 15 g에 통과시켜 탈수한다. 탈수한 용액을 40℃이하의 수용 중에서 감압농축하여 날려버린다. 건고물에 아세토니트릴 포화 헥산 30 mL를 가하여 녹인 후 250 mL 용량의 분액깔대기에 옮긴다. 헥산 포화 아세토니트릴을 30 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 섞은 후 정치한다. 아세토니트릴층을 125 mL 용량의 농축플라스크에 옮기고 다시 헥산 포화 아세토니트릴 30 mL를 가하여 위의 과정을 되풀이한다. 합친 여액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 날려버리고 디클로로메탄 10 mL로 녹인다.

나) 정제

안지름 1.5 cm, 길이 40 cm의 칼럼관에 후로리실 10 g, 다음에 무수황산나트륨 약 2 g을 충전한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 상단에 소량의 디클로로메탄이 남을 정도로 유출시킨다. 여기에 위의 디클로로메탄에 녹인 용액 10 mL를 가한 후 약 3 mL/min의 유속으로 흘려보낸다. 충진제 표면이 노출되기 직전 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (3/97, v/v) 100 mL를 가하여 유출시켜 버리고, 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (10/90, v/v) 100 mL로 용출시켜 받는다. 이 용출액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하여 건고물을 아세토니트릴 5 mL을 가하여 잘 녹이고 증류수를 5 mL을 가하여 혼합한 후 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (50/50, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 20 μL

(6) 검출기파장 : 247 nm

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 고속액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피이크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

오리사스트로빈 (10.7분) 20 ng.

라) 정량한계

0.02 mg/kg

마) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (100 mm × 2.0 mm, 3 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (50/50, v/v)

(4) 이동상 유량 : 0.2 mL/min

(5) 시료주입량 : 5 μL

(6) 이온화 : ESI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 100 ～ 500

(8) Capillary temperature : 330℃

(9) Cone voltage : 80 V

표 1. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
6.0	391	392

7) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피이크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피이크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

8) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피이크높이법 또는 피이크면적법에 따라 정량한다.

161) 사이플루메토펜(Cyflumetofen) 시험법

1) 시험법 적용범위

과실류, 채소류

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 헥산으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용출용매 : 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (50/50, v/v))로 정제하여 액체크로마토그래프로 측정한다

3) 장치

가) 액체크로마토그래프/자외부흡광검출기(UV Detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 실리카겔 (Silica gel) : 칼럼크로마토그래피용 (70～230 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

라) 표준원액 : 사이플루메토펜을 아세토니트릴에 녹여 500 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 아세토니트릴에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(과실류 또는 채소류 약 1 kg을 잘 썰거나 갈은 후 그 25 g을 단다)를 호모게나이저 용기에 달아넣고 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한 한다. 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL과 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 헥산 100 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 정치한다. 수용액층은 버리고 유기용매층을 무수황산나트륨 15 g에 통과시켜 탈수한다. 탈수한 용액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 날려버리고 헥산 10 mL로 녹인다.

나) 정제

안지름 1.5 cm, 길이 40 cm의 칼럼관에 실리카겔 10 g, 다음에 무수황산나트륨 약 2 g을 충전한 후 헥산 50 mL를 가하여 상단에 소량의 헥산이 남을 정도로 유출시킨다. 여기에 위의 헥산에 녹인 용액 10 mL를 가한 후 약 3 mL/min의 유속으로 흘려보낸다. 충진제 표면이 노출되기 직전 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (20/80, v/v) 100 mL를 가하여 유출시켜 버리고, 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (50/50, v/v) 100 mL로 용출시켜 받는다. 이 용출액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하여 건고물을 아세토니트릴 7 mL을 가하여 잘 녹이고 증류수를 3 mL을 가하여 혼합한 후 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (70/30, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 40 μL

(6) 검출기파장 : 230 nm

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 고속액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피이크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

사이플루메토펜 (10.9분) 40 ng.

라) 정량한계

0.02 mg/kg

마) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (70/30, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 5 μL

(6) 이온화 : APCI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 200 ～ 600

(8) Capillary temperature : 275℃

(9) Cone voltage : 98 V

표 1. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
10.9	447	448

7) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피이크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피이크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

8) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피이크높이법 또는 피이크면적법에 따라 정량한다.

162) 벤치아발리카브아이소프로필(Benthiavalicarb-isopropyl) 시험법

1) 시험법 적용범위

과실류, 채소류

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 디클로로메탄으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축하고 실리카겔 카트리지(용출용매 : 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (70/30, v/v))로 정제하여 액체크로마토그래프로 측정한다.

3) 장치

가) 액체크로마토그래프/자외부흡광검출기(UV Detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 실리카겔 (Silica gel) : 실리카겔(1 g) 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지(용량 6 mL) 또는 이와 동등한 것

라) 표준원액 : 벤치아발리카브아이소프로필(R형, S형)을 아세토니트릴에 녹여 500 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 아세토니트릴에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(과실류 또는 채소류 약 1 kg을 잘 썰거나 갈은 후 그 25 g을 단다)를 호모게나이저 용기에 달아넣고 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한 한다. 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL과 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 정치한다. 디클로로메탄 층을 무수황산나트륨 20 g에 통과시켜 탈수한 후 다시 수용액층에 디클로로메탄 50 mL를 가하고 분배과정을 되풀이 하여 추출된 용액을 합친다. 합친 용액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 날려버리고 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (10/90, v/v) 10 mL로 녹인다.

나) 정제

미리 실리카겔 카트리지에 헥산 5 mL를 초당 2～3방울 정도의 속도로 유출하여 활성화시킨 다음 여기에 위의 에틸아세테이트/헥산 혼합액을 카트리지 상단에 넣고 초당 1～2방울 정도의 속도로 용출시켜 버린다. 여기에 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (10/90) 30 mL로 씻어 버리고 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (30/70) 20 mL로 용출시켜 받는다. 용출액은 40℃이하의 수욕조 중에서 질소를 낮은 유속으로 통과시키면서 용매를 날려 보낸 후 건고물을 아세토니트릴 5 mL을 가하여 잘 녹이고 증류수를 5 mL을 가하여 혼합한 후 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (45/55, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 20 μL

(6) 검출기파장 : 220 nm

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 고속액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피이크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

1 : 벤치아발리카브아이소프로필 R형 (11.9분) 40 ng,

2 : 벤치아발리카브아이소프로필 S형 (12.6분) 40 ng

라) 정량한계

과실류 및 채소류 0.04 mg/kg

마) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (100 mm × 2.0 mm, 3 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (50/50, v/v)

(4) 이동상 유량 : 0.2 mL/min

(5) 시료주입량 : 5 μL

(6) 이온화 : ESI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 100 ～ 500

(8) Capillary temperature : 330℃

(9) Cone voltage : 85 V

표 1. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
4.6	381	382

7) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피이크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피이크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

8) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피이크높이법 또는 피이크면적법에 따라 정량한다.

부 칙

제1조(시행일) 이 고시는 고시한 날부터 시행한다.

제2조(경과조치) 이 고시 시행 당시 접수되어 검사가 진행 중인 사항에 대하여는 종전의 규정을 적용한다.

현   행

개   정 (안)

제 1. 총 칙

1. (생 략)

2. 용어의 풀이

1) ～ 28) (생 략)

29) ------------------------

------------제조․가공․포장한 식품을 말한다. 다만, 식품첨가물이나 다른 원료를 사용하지 아니하고 원형을 알아볼 수 있는 -----------------------

-----------------------

제 2. 식품일반에 대한 공통기준 및 규격

1. ～ 4. (생 략)

5. 식품일반의 기준 및 규격

1) ～  11) (생 략)

12) 기타 유해물질 기준

(1) ～  (2) (생 략)

(3) 벤조피렌〔Benzo(a)pyrene〕

① (생 략)

<신  설>

13) ～  15) (생 략)

6. (생 략)

제 3. ～ 제 4. (생 략)

제 5. 식품별 기준 및 규격

1. 과자류

1) ～ 4) (생 략)

5) 규격

(1) (생 략)

(2) 산가 : 2.0이하(유탕처리식품에 한한다)

(3) ～ (10) (생 략)

6) (생 략)

2. ～ 19-17. (생 략)

19-18 즉석섭취․편의식품류

1) ～ 4) (생 략)

5) 규격

(1) (생 략)

(2) 세균수 : 1 g 당 100,000 이하 (즉석조리식품에 한한다)

(3) ～ (6) (생 략)

6) (생 략)

제 6. ～ 제 9.  (생 략)

제 10. 일반시험법

1.～ 8. (생 략)

9. 식품 중 농약잔류시험법

1) ～ 159) (생 략)

<신 설>

<신 설>

<신 설>

10. ～ 30.  (생 략)

제 1. 총 칙

1. (현행과 같음)

2. 용어의 풀이

1) ～ 28) (현행과 같음)

29) -----------------------

----------- 제조․가공․포장한 식품과 농․임산물을 세척, 박피, 절단 또는 세절 등의 가공공정을 거치거나 이에 단순히 식품 또는 식품첨가물을 가한 것으로 소비자가 그대로 섭취할 수 있도록 제조․가공․포장한 신선편의식품을 말한다. 다만, 신선편의식품을 제외한 식품첨가물이나 다른 원료를 사용하지 아니하고 원형을 알아볼 수 있는 -----------------------

-------------------------

제 2. 식품일반에 대한 공통기준 및 규격

1. ～ 4. (현행과 같음)

5. 식품일반의 기준 및 규격

1) ～  11) (현행과 같음)

12) 기타 유해물질 기준

(1) ～  (2) (현행과 같음)

(3) 벤조피렌〔Benzo(a)pyrene〕

① (현행과 같음)

② 숙지황 및 건지황 : 5.0 ㎍/kg 이하

13) ～  15) (현행과 같음)

6. (현행과 같음)

제 3. ～ 제 4. (현행과 같음)

제 5. 식품별 기준 및 규격

1. 과자류

1) ～ 4) (현행과 같음)

5) 규격

(1) (현행과 같음)

(2) 산가 : 2.0이하(유탕처리식품에 한하며, 유밀과는 3.0 이하)

(3) ～ (10) (현행과 같음)

6) (현행과 같음)

2. ～ 19-17. (현행과 같음)

19-18 즉석섭취․편의식품류

1) ～ 4) (현행과 같음)

5) 규격

(1) (현행과 같음)

(2) 세균수 : 1 g 당 100,000 이하 (즉석조리식품에 한하며, 발효제품 또는 유산균첨가제품은 제외한다)

(3) ～ (6) (현행과 같음)

6) (현행과 같음)

제 6. ～ 제 9.  (현행과 같음)

제 10. 일반시험법

1.～ 8. (현행과 같음)

9. 식품 중 농약잔류시험법

1) ～ 159) (현행과 같음)

160) 오리사스트로빈(Orysastrobin) 시험법

－ 10-9-49- －

1) 시험법 적용범위

곡류

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 디클로로메탄/헥산 혼합액 (20/80, v/v)으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축하고 후로리실 칼럼크로마토그래피(용출용매 : 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (10/90, v/v))로 정제하여 액체크로마토그래프로 측정한다

3) 장치

가) 액체크로마토그래프/자외부흡광검출기(UV Detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 후로리실 (Florisil) : 잔류농약분석용 (60～100 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

라) 표준원액 : 오리사스트로빈을 아세토니트릴에 녹여 500 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 아세토니트릴에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(곡류 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 ㎛를 통과하도록 분쇄한 후 그 25 g을 단다)를 호모게나이저 용기에 달아 물 20 mL를 넣고 습윤화 한다. 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한 다음 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL과 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 디클로로메탄/헥산 혼합액 (20/80, v/v) 100 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 정치한다. 수용액층은 버리고 유기용매층을 무수황산나트륨 15 g에 통과시켜 탈수한다. 탈수한 용액을 40℃이하의 수용 중에서 감압농축하여 날려버린다. 건고물에 아세토니트릴 포화 헥산 30 mL를 가하여 녹인 후 250 mL 용량의 분액깔대기에 옮긴다. 헥산 포화 아세토니트릴을 30 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 섞은 후 정치한다. 아세토니트릴층을 125 mL 용량의 농축플라스크에 옮기고 다시 헥산 포화 아세토니트릴 30 mL를 가하여 위의 과정을 되풀이한다. 합친 여액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 날려버리고 디클로로메탄 10 mL로 녹인다.

나) 정제

안지름 1.5 cm, 길이 40 cm의 칼럼관에 후로리실 10 g, 다음에 무수황산나트륨 약 2 g을 충전한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 상단에 소량의 디클로로메탄이 남을 정도로 유출시킨다. 여기에 위의 디클로로메탄에 녹인 용액 10 mL를 가한 후 약 3 mL/min의 유속으로 흘려보낸다. 충진제 표면이 노출되기 직전 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (3/97, v/v) 100 mL를 가하여 유출시켜 버리고, 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (10/90, v/v) 100 mL로 용출시켜 받는다. 이 용출액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하여 건고물을 아세토니트릴 5 mL을 가하여 잘 녹이고 증류수를 5 mL을 가하여 혼합한 후 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (50/50, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 20 μL

(6) 검출기파장 : 247 nm

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 고속액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피이크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

오리사스트로빈 (10.7분) 20 ng.

라) 정량한계

0.02 mg/kg

마) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (100 mm × 2.0 mm, 3 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (50/50, v/v)

(4) 이동상 유량 : 0.2 mL/min

(5) 시료주입량 : 5 μL

(6) 이온화 : ESI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 100 ～ 500

(8) Capillary temperature : 330℃

(9) Cone voltage : 80 V

표 1. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
6.0	391	392

7) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피이크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피이크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

8) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피이크높이법 또는 피이크면적법에 따라 정량한다.

161) 사이플루메토펜(Cyflumetofen) 시험법

1) 시험법 적용범위

과실류, 채소류

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 헥산으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축하고 실리카겔 칼럼크로마토그래피(용출용매 : 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (50/50, v/v))로 정제하여 액체크로마토그래피로 측정한다.

3) 장치

가) 액체크로마토그래프/자외부흡광검출기(UV Detector).

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 실리카겔 (Silica gel) : 칼럼크로마토그래피용 (70～230 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

라) 표준원액 : 사이플루메토펜을 아세토니트릴에 녹여 500 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 아세토니트릴에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(과실류 또는 채소류 약 1 kg을 잘 썰거나 갈은 후 그 25 g을 단다)를 호모게나이저 용기에 달아넣고 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한 한다. 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL과 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 헥산 100 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 정치한다. 수용액층은 버리고 유기용매층을 무수황산나트륨 15 g에 통과시켜 탈수한다. 탈수한 용액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 날려버리고 헥산 10 mL로 녹인다.

나) 정제

안지름 1.5 cm, 길이 40 cm의 칼럼관에 실리카겔 10 g, 다음에 무수황산나트륨 약 2 g을 충전한 후 헥산 50 mL를 가하여 상단에 소량의 헥산이 남을 정도로 유출시킨다. 여기에 위의 헥산에 녹인 용액 10 mL를 가한 후 약 3 mL/min의 유속으로 흘려보낸다. 충진제 표면이 노출되기 직전 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (20/80, v/v) 100 mL를 가하여 유출시켜 버리고, 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (50/50, v/v) 100 mL로 용출시켜 받는다. 이 용출액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하여 건고물을 아세토니트릴 7 mL을 가하여 잘 녹이고 증류수를 3 mL을 가하여 혼합한 후 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (70/30, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 40 μL

(6) 검출기파장 : 230 nm

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 고속액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피이크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

사이플루메토펜 (10.9분) 40 ng.

라) 정량한계

0.02 mg/kg

마) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (70/30, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 5 μL

(6) 이온화 : APCI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 200 ～ 600

(8) Capillary temperature : 275℃

(9) Cone voltage : 98 V

표 1. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
10.9	447	448

7) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피이크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피이크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

8) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피이크높이법 또는 피이크면적법에 따라 정량한다.

162) 벤치아발리카브아이소프로필 (Benthiavalicarb-isopropyl) 시험법

1) 시험법 적용범위

과실류, 채소류

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 디클로로메탄으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축하고 실리카겔 카트리지(용출용매 : 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (70/30, v/v))로 정제하여 액체크로마토그래프로 측정한다.

3) 장치

가) 액체크로마토그래프/자외부흡광검출기(UV Detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 실리카겔 (Silica gel) : 실리카겔(1 g) 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지(용량 6 mL) 또는 이와 동등한 것

라) 표준원액 : 벤치아발리카브아이소프로필(R형, S형)을 아세토니트릴에 녹여 500 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 아세토니트릴에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(과실류 또는 채소류 약 1 kg을 잘 썰거나 갈은 후 그 25 g을 단다)를 호모게나이저 용기에 달아넣고 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한 한다. 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL과 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 정치한다. 디클로로메탄 층을 무수황산나트륨 20 g에 통과시켜 탈수한 후 다시 수용액층에 디클로로메탄 50 mL를 가하고 분배과정을 되풀이 하여 추출된 용액을 합친다. 합친 용액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 날려버리고 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (10/90, v/v) 10 mL로 녹인다.

나) 정제

미리 실리카겔 카트리지에 헥산 5 mL를 초당 2～3방울 정도의 속도로 유출하여 활성화시킨 다음 여기에 위의 에틸아세테이트/헥산 혼합액을 카트리지 상단에 넣고 초당 1～2방울 정도의 속도로 용출시켜 버린다. 여기에 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (10/90) 30 mL로 씻어 버리고 에틸아세테이트/헥산 혼합액 (30/70) 20 mL로 용출시켜 받는다. 용출액은 40℃이하의 수욕조 중에서 질소를 낮은 유속으로 통과시키면서 용매를 날려 보낸 후 건고물을 아세토니트릴 5 mL을 가하여 잘 녹이고 증류수를 5 mL을 가하여 혼합한 후 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (45/55, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 20 μL

(6) 검출기파장 : 220 nm

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 고속액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피이크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

1 : 벤치아발리카브아이소프로필 R형 (11.9분) 40 ng,

2 : 벤치아발리카브아이소프로필 S형 (12.6분) 40 ng

라) 정량한계

과실류 및 채소류 0.04 mg/kg

마) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (100 mm × 2.0 mm, 3 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (50/50, v/v)

(4) 이동상 유량 : 0.2 mL/min

(5) 시료주입량 : 5 μL

(6) 이온화 : ESI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 100 ～ 500

(8) Capillary temperature : 330℃

(9) Cone voltage : 85 V

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
4.6	381	382

표 1. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

7) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피이크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피이크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

8) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피이크높이법 또는 피이크면적법에 따라 정량한다.

10. ～ 30.  (현행과 같음)

신․ 구조문 대비표