식품의약품안전청공고 제2007-124호

식품의 기준 및 규격중 개정(안) 입안예고

2007. 5. 31

식품의약품안전청

식품의약품안전청공고 제2007-124호

식품의기준및규격을 제․개정함에 있어 이를 국민에게 미리 알려 의견을 듣고자 그 개정취지와 주요내용을 행정절차법 제46조의 규정에 의하여 다음과 같이 공고합니다.

2007년 5월 31일

식품의약품안전청장

식품의기준및규격중개정(안)

1. 개정이유

식품의 안전성 및 건전성을 확보하고자 식품중 금속성 이물, 축산물중 다이옥신 기준을 신설하고자 함

2. 주요내용

가. 6개월 미만의 영․유아가 섭취할 수 있도록 제조․판매하는 식품에서는 엔테로박터 사카자키, 대장균군 및 세균수 기준 신설

나. 향신료가공품중 향신료조제품에 홍국 및 홍국함유제품 사용금지 기준 신설

다. 고춧가루의 제조가공기준에 금속성 이물제거장치 설치 의무화

라. 식품중 금속성 이물의 기준 신설

마. 식육(소고기, 돼지고기, 닭고기)의 다이옥신 기준 신설

바. 기름치(oil fish)의 식품원료 사용금지

사. 통․병조림식품의 납 기준 삭제

아. 수족관물의 대장균군 기준 신설

3. 의견제출

이 개정(안)에 대하여 의견이 있는 기관, 단체 또는 개인은 2007년 6월 19일까지 다음 사항을 기재한 의견서를 식품의약품안전청장(참조 : ① 위해기준팀  주소 : 서울특별시 은평구 통일로 194, 전화 02-352-4767, 4798, 팩스 02-352-4606)에게 제출하여 주시기 바라며, 더 자세한 내용을 알고 싶으신 분은 식품의약품안전청 홈페이지(http://www.kfda.go.kr)를 참고하시기 바랍니다.

가. 예고사항에 대한 항목별 의견(찬․반 여부와 그 이유)

나. 성명(단체의 경우 단체명과 그 대표자의 성명), 전화번호 및 주소

다. 기타사항

식품의 기준 및 규격중 개정(안)

식품의 기준 및 규격중 다음과 같이 개정한다.

제3. 1. 30) (2)의 ④심해성어류중 “기름치”를 삭제 한다.

제3. 2. 1) (7) ③에 다음과 같이 신설한다

③ 식품의 원료로 사용할 수 없는 원료

품목명 (이명 또는 영명)	학 명	사 용 부 위
기름치 (Oilfish또는 Escolar)	Ruvettus pretiosus Lepidocybium flavobrunneum	전체

제3. 3. 2), (25)의 ⑦을 다음과 같이 신설한다.

⑦ 고추장 제조시 홍국 또는 홍국함유제품을 사용하여서는 아니된다.

제3. 3. 2), (28)의 ④를 다음과 같이 한다.

④ 고춧가루 제조공정에는 금속성 이물제거장치를 설치하여야 한다.

제3. 3. 2), (29)의 ②를 다음과 같이 신설한다.

② 향신료조제품 제조시 홍국 또는 홍국함유제품을 사용하여서는 아니된다.

제3. 6. 1) (7)을 다음과 같이 한다.

(7) 이물

① 식품은 원료의 처리과정에서 그 이상 제거되지 아니하는 정도 이상의 이물과 오염된 비위생적인 이물을 함유하여서는 아니 된다. 다만, 다른 식물이나 원료식물의 표피 또는 토사 등과 같이 실제에 있어 정상적인 제조․가공상 완전히 제거되지 아니하고 잔존하는 경우의 이물로서 그 양이 적고 일반적으로 인체의 건강을 해할 우려가 없는 정도는 제외한다.

② 금속성 이물로서 쇳가루는 제7. 7. 1). (5)금속성이물시험법에 따라 시험하였을 때 식품중 10.0 mg/kg 이상 검출되어서는 아니 되며 크기가 2.0 mm 이상인 금속성 이물은 검출되어서는 아니 된다.

제3. 6. 1) (10)을 다음과 같이 신설한다.

(10)  6개월 미만의 영․유아가 섭취할 수 있도록 제조․판매하는 식품에서는 엔테로박터 사카자키(Enterobacter sakazaki)와 대장균군, 타르색소가 검출되어서는 아니되며 세균수는 g당 20,000이하(액상제품은 100이하)이어야 한다.

제3. 6. 1) (11)를 다음과 같이 신설한다.

(11)식육 중 다이옥신 허용기준

①소고기 : 4.0 pg TEQ/g fat 이하

②돼지고기 : 2.0 pg TEQ/g fat 이하

③닭고기 : 3.0 pg TEQ/g fat 이하

제3. 6. 12)통․병조림의 규격중 “(4)납(mg/kg) : 0.3이하(다만, 수산통․병조림은 2.0이하)”를 삭제하고 (5)내지 (6)을 (4)내지 (5)로 한다.

제5. 2. 2-2. 1). (2)에 ②를 다음과 같이 신설한다.

②대장균군 : 1,000이하/100 mL

제7. 6. 1). (3)건식회화법중 “450～550°에서 회화한다.”를 “450～500℃에서 회화한다.”로 한다

제7. 6. 5). (2)에 ③을 다음과 같이 신설한다.

③건식회화법

시료 일정량 (측정하는 기기에 따라 달라짐)을 도가니, 백금접시에 취해 제7. 일반시험법 6.유해성금속시험법 (3) 건식회화법에 따른다.

제7. 7. 1) (5)를 다음과 같이 신설한다.

(5) 금속성이물(쇳가루) 시험법

① 검체(분말제품 500g, 액상제품 1kg)에 증류수 5～6 L와 혼합 후 봉자석(10,000 가우스 자력)으로 10분간 저어 쇳가루를 모은 후 건조하여 무게를 측정한다.

② 모은 쇳가루를 자력제거장치로 자력을 제거하고 표준망체(1.4x1.4 mm)에 통과하지 않고 남아 있는 쇳가루의 크기를 측정한다.

③ 검출된 쇳가루가 식품과 붙어있거나 물리적으로 결합된 경우 300℃에서 1시간 회화로에서 가열하여 회화시킨 후 자석으로 쇳가루를 모아 무게를 측정하고 ②에 따라 크기를 측정한다.

제 7. 26을 다음과 같이 신설한다.

26. 식육 중 다이옥신류 시험법

1) 장치

분해능이 10,000 이상인 고분해능 가스크로마토그래프/고분해능 질량분석기 (High Resolution Gas Chromatograph/High Resolution Mass Spectrometer, HRGC/HRMS)를 사용한다.

2) 시약 및 시액, 기구

시약 및 시액은 다이옥신류 분석에 영향을 미치는 방해성분을 함유하지 않아야 한다.

(1) 용매: 잔류농약 분석용 또는 이와 동등한 것.

(2) 무수황산나트륨: PCB 시험용 또는 이와 동등한 것.

(3) 정량용표준물질: 다이옥신류의 정성 및 정량에 사용하는 정량용           표준물질은 표 1과 같이 2,3,7,8-치환이성체와, 13C12체(labeled)             및 37Cl4체(labeled) (또는 이와 동등한 효과를 갖는 것)를 사용한다.

(4) 동위원소표준물질: 시료의 추출과정 전에 첨가하는 13C12체로 된   다이옥신류로 표 1과 같은 화합물(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것)을 사용한다.

(5) 실린지 첨가용 내부표준물질: 가스크로마토그래프/질량분석기에   주입하기 전에 첨가하는 실린지첨가용 내부표준물질은           13C12-1,2,3,4-TCDD(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것) 및        13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것)를 사  용한다.

(6) 검량선 작성용 표준물질: 정량용 표준물질을 검출한계부분의 저농          도의 것과 예상 검출농도보다 높은 고농도의 것을 적어도 하나           이상 포함시켜 5단계 이상의 농도 범위로 조제한 것(또는 이와 동          등한 효과를 갖는 것). 단, 검량선 작성용 표준용액들은                   HRGC/HRMS의 동적범위(dynamic range)를 만족해야 하며 검량          선 작성용 표준용액에는 정량용 표준물질의 13C12체 및 37C12체가          일정농도로 함유되어 있어야 한다.

(7) 대용표준물질: 분석공정상의 회수율을 측정하기 위해 적당한 농도          의 다이옥신류(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것)를 사용한다. (표          1).

(8) 점검용 표준물질: 검량선 작성용 표준물질 중 중간농도의 표준물          질을 선택하여 점검용 표준물질로 한다.

(9) 실리카겔 칼럼: 안지름 11mm, 길이 177mm의 정제용 칼럼(중성실         리카겔 1.5g, 염기성실리카겔 2g, 산성실리카겔 4g의 순서로 충전         한 것) 또는 이와 동등한 것.

(10) 알루미나 칼럼: 안지름 11㎜, 길이 177㎜의 정제용 칼럼(염기성알          루미나 12.5g을 충전한 것)또는 이와 동등한 것.

(11) 카본 칼럼: 안지름 11㎜, 길이 10㎜의 정제용 칼럼(8% 카본               /celite545-AW 0.275g을 충전한 것) 또는 이와 동등한 것.

(12) 기타: 다이옥신류 분석에 적합한 것

3) 시험용액의 조제

(1) 추출

검체 약 15～20g을 취하여 막자사발에 넣고 적당량의 무수황산           나트륨을 가하여 수분을 제거한 다음 속실렛용 원통형 여지로            옮긴다.  공시료 및 시료에는 동위원소 표준물질을 첨가하고 회           수율 측정용 시료에는 동위원소 표준물질 및 대용표준물질을 첨           가하여 비등석을 넣은 추출용매(디클로르메탄:헥산=3:1) 300 ㎖를           넣어 18시간 이상 속실렛 추출한다.

(2) 지방 항량 측정

속실렛 추출액을 40℃ 이하의 수욕상에서 감압하여 날려보낸 후           질소농축기를 이용하여 1.5psi로 20분간 농축하며 항량이 될 때           까지 반복하여 지방 항량을 측정한다.

[eqn: 조지방(%) = {항량(g) -(플라스크 + 비등석))(g)} over {시료양(g) }]

(3) 지방 제거

분액여두에 유리솜으로 넣고 유리깔때기를 이용하여 무수황산나           트륨 20 g을 넣고 지방 1 g 당 산성실리카겔 10 g을 넣어준다.           지방항량이 끝난 시료에 헥산 3 ㎖를 넣고 충분히 용해한 다음           분액여두에 시료가 묻지 않도록 산성실리카겔 표면에 넓게 뿌려           서 넣어준다.  이러한 조작을 두 번 더 반복한 다음 20분간 반응           시킨다.  헥산 130～150 ㎖로 용리한다음 약 3 ㎖가 남도록 40℃           이하의 수욕상에서 감압하여 날려보낸다. 남은 농축액을 시험관           에 모은 후 감압용기를 헥산 3 ㎖씩 2회 반복 용해하여 이전의           시험관에 합쳐서 추출액으로 한다.

(2) 정제

실리카겔 칼럼에 위의 추출액을 가하여 헥산으로 용출시키고 그          용 출액을 알루미나 칼럼에 가한 후 2% 디클로로메탄 함유 헥산          으로 방해물질을 제거한 다음 50% 디클로로메탄 함유 헥산으로          다시 용출시킨다.  이 알루미나칼럼에 용출액을 카본칼럼에 가하          고 50% 에칠초산 함유 벤젠 및 헥산의 순으로 방해물질을 정제한          다음 톨루엔으로 역유출하여 농축한다.  농축액에 실린지 첨가용          내부표준물질을 첨가한 후 시험용액으로 한다.

※주의 : 칼럼크로마토그래피에서 사용하는 충진제나 용매의 종류                  및 양은 표준물질 등으로 분획실험을 하여 정한 것으로                  한다.

4) 시험조작

(1) 가스크로마토그래피의 측정조건

① 칼럼 : 안지름 0.32㎜, 길이 60m의 규산유리 캐필러리 칼럼관에           가스크로마토그래프용 5%페닐-메칠실리콘(DB-5)을 교차 결합시           킨 것 또는 이와 동등한 것으로 분석하고자 하는 전 이성체의            분리가 양호하며 그 분리 효율을 입증할 수 있는 것이어야 한다.

② 오븐온도 : 이성체 각각의 분리가 양호하며, 크로마토그램 상에           서 그 용출순서를 판명할 수 있도록 온도조건을 설정한다. 단,            2,3,7,8-TCDD 및 2,3,7,8-TCDF와 가장 근접한 피크의 계곡은             25% 미만이어야 한다.

③ 캐리어가스 및 유량 : 헬륨을 적절하게 조절한다.

④ 주입부 : 270℃ 또는 이성체 각각의 분리가 양호한 온도

⑤ 연결부 : 290℃ 또는 이성체 각각의 검출이 양호한 온도

⑥ 이온원 : 260℃ 또는 이성체 각각의 검출이 양호한 온도

(2) 고분해능 질량분석기의 측정조건

① 튜닝 표준물질 : PFTBA 또는 이와 동등한 것

② 분해능 : 10,000 이상 (10% 계곡 기준)

③ 이온화방식 : 전자충격이온화 방식 (EI)

④ 질량설정 : 측정하고자 하는 각 동족체마다 M+, (M+2)+ 및                (M+4)+ 중 2개의 이온을 선택한다.

⑤ 질량 검정 : 가스크로마토그래프/질량분석기는 시료분석조건과             동일한 조건에서 분해능 10,000 이상으로 조절(tuning)한 다음,            4 염화물에서 8 염화물의 선택이온들을 적당한 그룹으로 나누            어 튜닝 표준물질에 대한 질량 검정을 하여야 한다.

⑥ 주기적 점검 : 분석을 지속적으로 수행하는 경우 매 12시간 마다           정량용 표준물질 중 중간농도의 표준물질을 선택하여 기기 성능            을 점검하여야 하며 회수율은 80%～120%에 있어야 한다.

⑦ 검출한계 : 염화물 각각의 검출한계는 표 2에 나타난 값 이하이           어야 한다.

(3) 정성시험

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에         서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 하며, 측정한 선         택이온 2개의 이온세기 비율은 표 3에 나타난 이론값에 대하여           ±15% 이내에 있어야 한다. 단, 모든 신호 대 잡음(S/N)비는 2.5보         다 커야 하며, 정량용 13C12 및 37C12의 경우는 10보다 커야 한다.

4) 정량시험

정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 검출된 각각        의 다이옥신류에 대해 이에 대응하는 정량용 13C12체 및 37C12체 표        준물질로 상대검량선법으로 정량한다. 또한 동위원소 표준물질 37C4        체-2,3,7,8-TCDD와 13C12-2,3,7,8 등 15종의 내부표준물질에 대한 농        도를 절대검량선법으로 구하여 회수율을 계산하며 회수율은 50% 이        상 120%이하이어야 한다. 대용 표준물질의 회수율도 70% 이상           130%이하이어야 한다.

① 검량선 작성

검량선 작성용 표준물질을 (3)정성시험과 같은 방법으로 가스크로마        토그래피/질량분석기에 주입하여 각 선택이온에 대한 크로마토그램        을 작성하여 각 표준물질의 피크 면적과 이에 대응하는 13C12체의         피크 면적으로부터 다음 식에 의해 상대감응(RR)을 구한다. 상대감        응은 5개 농도 이상의 검량선 작성용 표준물질을 사용하며 편차범        위는 ±20% 이내이어야 한다.

[eqn: RR = {(A sub 1n + A sub 2n ) (C sub l )} over {(A sub 1l + A sub 2l ) (C sub n ) }]

A1n, A2n : 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 다이옥신류의 1                         차 및 2차 선택 이온의 피크 면적

A1l, A2l : 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 13C12체 화합물                        의 1차 및 2차 선택 이온의 피크 면적

Cn : 검량선 작성용 표준물질의 농도

Cl : 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 13C12체 표준물질의                     농도

② 반응계수(RF)

반응계수(RF)는 검량선 작성용 표준물질을 분석하여 얻은 크로            마토그램으로부터 내부표준물질방법에 따라 다음의 식에 의해            구한다. 5개 농도의 검량선 작성용 표준물질을 사용한 반응계수            의 편차범위는 ±35% 이내이어야 한다.

[eqn: RF= {(A sub 1s ＋ A sub 2s )(C sub is )} over {(A sub 1is ＋ A sub 2is )(C sub s )}]

A1s, A2s : 검량선 작성용 표준물질의 1차 및 2차 선택이온의 피                     크 면적

A1is, A2is : 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 내부표준물질의 1                     차 및 2차 선택이온의 피크 면적

Cs; 검량선 작성용 표준물질의 농도

Cis; 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 내부표준물질의 농도

③ 시료 중 다이옥신 농도(C)의 계산

시료 중 다이옥신 농도(C)는 다음 식에 의해 구한다.

[eqn: C(ng/g) = {(A sub 1n + A sub 2n ) (C sub l )} over {(A sub 1l + A sub 2l ) (RR)} times {V sub ex over W sub s}]

A1n, A2n : 시료에 함유된 대상물질의 1차 및 2차 선택이온의                        피크 면적

A1l, A2l : A1n 와 A2n에 대응하는 시료에 첨가된 13C12체 화합                       물의 1차 및 2차 선택 이온의 피크 면적

RR : 상대감응

Cl : 시료에 첨가된 13C12체 표준물질의 양(ng/㎖)

Vex : 추출용량(㎖)

Ws : 시료량 (g)

④ 동위원소 표준물질의 검출 농도 및 회수율

시료에 첨가된 동위원소 표준물질의 검출농도(Cl) 및 회수율은 다          음 식에 의해 구한다.

[eqn: C sub l (ng/g)= { (A sub 1s ＋ A sub 2s )(C sub is )} over {(A sub 1is ＋ A sub 2is )RF }]

A1s, A2s; 동위원소 표준물질(13C12체 표준물질)의 1차 및 2차 선                    택이온의 피크 면적

A1is, A2is; 실린지 첨가용 내부 표준물질의 1차 및 2차 선택이온                    의 피크 면적

Cis; 실린지 첨가용 내부 표준물질의 농도

RF: 반응계수

[eqn: 회수율(%)= {검출농도} over {첨가농도}×100]

⑤ 독성등가환산농도(TEQ)

시료에 함유된 이성체에 대한 2,3,7,8-TCDD 독성등가환산농도            (TEQ: Toxicity Equivalents)는 시료 중 다이옥신 농도에 표 4의           독성등가계수(TEF: Toxicity Equivalent Factor)를 곱하여 구한           다.

표 1. 대상물질

Congeners		m/z
		M+	(M+2)+	(M+4)+
P C D D	2,3,7,8-TCDD	319.8965	321.8936	323.8906
	1,2,3,7,8-PeCDD	353.8576	355.8546	355.8517
	1,2,3,4,7,8-HxCDD	387.8186	388.8127	393.8097
	1,2,3,6,7,8-HxCDD	387.8186	388.8127	393.8097
	1,2,3,7,8,9-HxCDD	387.8186	388.8127	393.8097
	1,2,3,4,6,7,8-HpCDD	421.7796	423.7767	425.7737
	OCDD	455.7407	457.7377	459.7348
P C D F	2,3,7,8-TCDF	303.9016	305.8987	307.8957
	1,2,3,7,8-PeCDF	337.8627	339.8597	341.8567
	2,3,4,7,8-PeCDF	337.8627	339.8597	341.8567
	1,2,3,4,7,8-HxCDF	371.8237	373.8207	375.8178
	1,2,3,6,7,8-HxCDF	371.8237	373.8207	375.8178
	1,2,3,7,8,9-HxCDF	371.8237	373.8207	375.8178
	2,3,4,6,7,8-HxCDF	371.8237	373.8207	375.8178
	1,2,3,4,6,7,8-HpCDF	405.7847	407.7818	409.7788
	1,2,3,4,7,8,9-HpCDF	405.7847	407.7818	409.7788
	OCDF	439.7457	441.7428	443.7398

주: 약어의 펼친 이름은 다음과 같음.

PCDD = poly chlorinated dibenzo dioxin	PCDF = poly chlorinated dibenzo furan

TCDD  = tetra chloro dibenzo dioxin	TCDF = tetra chloro dibenzo furan

PeCDD = penta chloro dibenzo dioxin	PeCDF = penta chloro dibenzo furan

HxCDD = hexa chloro dibenzo dioxin	HxCDF = hexa chloro dibenzo furan

HpCDD = hepta chloro dibenzo dioxin	HpCDF = hepta chloro dibenzo furan

OCDD = octa chloro dibenzo dioxin	OCDF = octa chloro dibenzo furan

표 2. 검출한계

4～5 염화물	6～7 염화물	8 염화물
0.01 pg/g	0.02 pg/g	0.05 pg/g

표 3. 염소원자수에 의한 동족체 피크의 자연존재비

	자연존재비
	M	M+2	M+4	M+6	M+8	M+10	M+12	M+14
4	76.5	100	48.7	10.5	0.9
5	61.5	100	65.0	21.1	3.5	0.2
6	51.2	100	81.2	35.2	8.5	1.1	0.06
7	43.2	100	97.5	52.8	17.1	3.3	0.36	0.02
8	33.8	87.9	100.0	65.0	26.4	6.8	1.1	0.10

표 4. 독성등가계수 (Toxicity Equivalent Factors; WHO-TEFs)

다이옥신류	WHO-TEFs
2,3,7,8-TCDD 2,3,7,8-TCDF 1,2,3,7,8-PeCDD 1,2,3,7,8-PeCDF 2,3,4,7,8-PeCDF 1,2,3,4,7,8-HxCDD 1,2,3,6,7,8-HxCDD 1,2,3,7,8,9-HxCDD 1,2,3,4,7,8-HxCDF 1,2,3,6,7,8-HxCDF 1,2,3,7,8,9-HxCDF 2,3,4,6,7,8-HxCDF 1,2,3,4,6,7,8-HpCDD 1,2,3,4,6,7,8-HpCDF 1,2,3,4,7,8,9-HpCDF OCDD OCDF	1.0 0.1 1.0 0.05 0.5 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.01 0.01 0.01 0.0001 0.0001

부 칙

①(시행일) 이 고시는 고시한 날부터 시행한다.

②(경과조치) 이 고시 시행 전에 접수되어 검사가 진행 중인 사항에 대해서는 종전의 규정에 의한다.

신․ 구조문 대비표

현   행

개   정 (안)

제 3. 식품일반에 대한 공통기준 및 규격

1. 용어의 풀이

1)~29) (생  략)

30)식품원재료 분류

④ 심해성어류 : 쏨뱅이류, -----청상아리, 기름치, 곱상어------(이하생략)

2. 원료 등의 구비요건

1) 식품원료

(1) ~ (6) (생  략)

(7) (생  략)

① ~ ②(생  략)

③ 식품의 원료로 사용할 수 없는 원료

<신  설>

3. 제조․가공기준

1) (생  략)

2) 개별기준

(1)～(24)  (생  략)

(25)간장, 된장, 고추장, 춘장

①～⑥ (생  략)

<신  설>

(26)～(27)  (생  략)

(28)고춧가루 또는 실고추

①～③  (생  략)

④고춧가루 제조공정에는 금속성 이물제거장치 설치를 권장한다.

(29)향신료가공품

①  (생  략)

<신  설>

6. 기준 및 규격의 적용

1) 식품 일반의 규격

(1) ~ (6) (생  략)

(7)이물

식품은 원료의 처리과정 ---------- 우려가 없는 정도는 제외한다.

<신  설>

(8) ~ (9) (생  략)

<신  설>

<신  설>

2)～11)  (생  략)

12)통․병조림의 규격

(1)～(3)  (생  략)

(4)납(mg/kg) : 0.3이하(다만, 수산통․병조림은 2.0이하)

(5)～(6)  (생  략)

7.～8.  (생  략)

제4. (생  략)

제 5. 식품접객업소의 조리판매식품 등에 대한 미생물 권장규격

1.  (생  략)

2. 규격

2-1. (생  략)

2-2.접객용 음용수(식품접객업소 등에서 손님에게 제공되는 음용수), 수족관물, 조리용구 등

1)규격

(1)  (생  략)

(2)수족관물

①  (생  략)

<신  설>

(3)～(4)  (생  략)

2)  (생  략)

제7. 일반시험법

1 ~ 5 (생  략)

6. 유해성금속 시험법

1)시험용액의 조제

(3)건식회화법

검체(건조물로서 5～20g에 상당하는 양)를 도가니 -----탄화시킨 다음 450～550°에서 회화한다.(이하 생략)

2)～4)  (생  략)

5)농산물 중 중금속 시험법

(1) (생  략)

(2)시험용액의 조제

①～②  (생  략)

<신  설>

(3)  (생  략)

<신  설>

8 ~ 25 (생  략)

<신  설>

제 3. 식품일반에 대한 공통기준 및 규격

1. 용어의 풀이

1)~29) (현행과 같음)

30)식품원재료 분류

④ 심해성어류 : 쏨뱅이류, -----청상아리,  곱상어------(이하생략)

2. 원료 등의 구비요건

1) 식품원료

(1) ~ (6) (현행과 같음)

(7) (현행과 같음)

① ~ ②(현행과 같음)

③ 식품의 원료로 사용할 수 없는 원료

품목명 (이명 또는 영명)	학 명	사용부위
기름치 (Oilfish 또는 Escolar)	Ruvettus pretiosus, Lepidocybium flavobrunneum	전체

3. 제조․가공기준

1) (현행과 같음)

2) 개별기준

(1)～(24)  (현행과 같음)

(25)간장, 된장, 고추장, 춘장

①～⑥ (현행과 같음)

⑦고추장 제조시 홍국 또는 홍국함유제품을 사용하여서는 아니된다.

(26)～(27)  (현행과 같음)

(28)고춧가루 또는 실고추

①～③  (현행과 같음)

④고춧가루 제조공정에는 금속성 이물제거장치를 설치하여야 한다.

(29)향신료가공품

①  (현행과 같음)

② 향신료조제품 제조시 홍국 또는 홍국함유제품을 사용하여서는 아니된다.

6. 기준 및 규격의 적용

1) 식품 일반의 규격

(1) ~ (6) (현행과 같음)

(7)이물

①식품은 원료의 처리과정 ---------- 우려가 없는 정도는 제외한다.

②금속성 이물로서 쇳가루는 제7. 7. 1). (5)금속성이물시험법에 따라 시험하였을 때 식품중 10.0 mg/kg 이상 검출되어서는 아니되며 크기가 2.0 mm 이상인 금속성 이물은 검출되어서는 아니 된다.

(8) ~ (9) (현행과 같음)

(10) 6개월 미만의 영․유아가 섭취할 수 있도록 제조․판매하는 식품에서는 엔테로박터 사카자키(Enterobacter sakazaki)와 대장균군, 타르색소가 검출되어서는 아니 되며 세균수는 g당 20,000 이하(액상제품은 100이하)이어야 한다.

(11)식육 중 다이옥신 허용기준

①소고기 : 4.0 pg TEQ/g fat 이하

②돼지고기 : 2.0 pg TEQ/g fat 이하

③닭고기 : 3.0 pg TEQ/g fat 이하

2)～11)  (현행과 같음)

12)통․병조림의 규격

(1)～(3)  (현행과 같음)

<삭  제>

(4)～(5)  (현행과 같음)

7.～8.  (현행과 같음)

제4. (현행과 같음)

제 5. 식품접객업소의 조리판매식품 등에 대한 미생물 권장규격

1.  (현행과 같음)

2. 규격

2-1. (현행과 같음)

2-2.접객용 음용수(식품접객업소 등에서 손님에게 제공되는 음용수), 수족관물, 조리용구 등

1)규격

(1)  (현행과 같음)

(2)수족관물

①  (생  략)

②대장균군 : 1,000이하/100 mL

(3)～(4)  (생  략)

2)  (생  략)

제7. 일반시험법

1 ~ 5 (현행과 같음)

6. 유해성금속 시험법

1)시험용액의 조제

(3)건식회화법

검체(건조물로서 5～20g에 상당하는 양)를 도가니-----탄화시킨 다음 450～500℃에서 회화한다.(이하 생략)

2)～4)  (현행과 같음)

5)농산물 중 중금속 시험법

(1) (현행과 같음)

(2)시험용액의 조제

①～②  (생  략)

③건식회화법

시료 일정량 (측정하는 기기에 따라 달라짐)을 도가니, 백금접시에 취해 제7. 일반시험법 6.유해성금속시험법 (3) 건식회화법에 따른다.

(3)  (현행과 같음)

7. 일반시험법

1)일반시험

(5) 금속성이물(쇳가루) 시험법

① 검체(분말제품 500g, 액상제품 1kg)에 증류수 5～6 L와 혼합 후 봉자석(10,000 가우스 자력)으로 10분간 저어 쇳가루를 모은 후 건조하여 무게를 측정한다.

② 모은 쇳가루를 자력제거장치로 자력을 제거하고 표준망체(1.4x1.4 mm)에 통과하지 않고 남아 있는 쇳가루의 크기를 측정한다.

③ 검출된 쇳가루가 식품과 붙어있거나 물리적으로 결합된 경우 300℃에서 1시간 회화로에서 가열하여 회화시킨 후 자석으로 쇳가루를 모아 무게를 측정하고 ②에 따라 크기를 측정한다.

8 ~ 25 (현행과 같음)

26. 식육 중 다이옥신류 시험법

1) 장치

분해능이 10,000 이상인 고분해능 가스크로마토그래프/고분해능 질량분석기 (High Resolution Gas Chromatograph/High Resolution Mass Spectrometer, HRGC/HRMS)를 사용한다.

2) 시약 및 시액, 기구

시약 및 시액은 다이옥신류 분석에 영향을 미치는 방해성분을 함유하지 않아야 한다.

(1) 용매: 잔류농약 분석용 또는 이와 동등한 것.

(2) 무수황산나트륨: PCB 시험용 또는 이와 동등한 것.

(3) 정량용표준물질: 다이옥신류의 정성 및 정량에 사용하는 정량용 표준물질은 표 1과 같이 2,3,7,8-치환이성체와, 13C12체(labeled) 및 37Cl4체(labeled) (또는 이와 동등한 효과를 갖는 것)를 사용한다.

(4) 동위원소표준물질: 시료의 추출과정 전에 첨가하는 13C12체로 된 다이옥신류로 표 1과 같은 화합물(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것)을 사용한다.

(5) 실린지 첨가용 내부표준물질: 가스크로마토그래프/질량분석기에 주입하기 전에 첨가하는 실린지첨가용 내부표준물질은 13C12-1,2,3,4-TCDD(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것) 및 13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것)를 사용한다.

(6) 검량선 작성용 표준물질: 정량용 표준물질을 검출한계부분의 저농도의 것과 예상 검출농도보다 높은 고농도의 것을 적어도 하나 이상 포함시켜 5단계 이상의 농도 범위로 조제한 것(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것). 단, 검량선 작성용 표준용액들은 HRGC/HRMS의 동적범위(dynamic range)를 만족해야 하며 검량선 작성용 표준용액에는 정량용 표준물질의 13C12체 및 37C12체가 일정농도로 함유되어 있어야 한다.

(7) 대용표준물질: 분석공정상의 회수율을 측정하기 위해 적당한 농도의 다이옥신류(또는 이와 동등한 효과를 갖는 것)를 사용한다. (표 1).

(8) 점검용 표준물질: 검량선 작성용 표준물질 중 중간농도의 표준물질을 선택하여 점검용 표준물질로 한다.

(9) 실리카겔 칼럼: 안지름 11mm, 길이 177mm의 정제용 칼럼(중성실리카겔 1.5g, 염기성실리카겔 2g, 산성실리카겔 4g의 순서로 충전한 것) 또는 이와 동등한 것.

(10) 알루미나 칼럼: 안지름 11㎜, 길이 177㎜의 정제용 칼럼(염기성알루미나 12.5g을 충전한 것)또는 이와 동등한 것.

(11) 카본 칼럼: 안지름 11㎜, 길이 10㎜의 정제용 칼럼(8% 카본/celite545-AW 0.275g을 충전한 것) 또는 이와 동등한 것.

(12) 기타: 다이옥신류 분석에 적합한 것

3) 시험용액의 조제

(1) 추출

검체 약 15～20g을 취하여 막자사발에 넣고 적당량의 무수황산나트륨을 가하여 수분을 제거한 다음 속실렛용 원통형여지로 옮긴다.  공시료 및 시료에는 동위원소 표준물질을 첨가하고 회수율 측정용 시료에는 동위원소 표준물질 및 대용표준물질을 첨가하여 비등석을 넣은 추출용매(디클로르메타:헥산=3:1) 300 ㎖를 넣어 18시간 이상 속실렛 추출한다.

(2) 지방항량 측정

속실렛 추출액을 40℃ 이하의 수욕상에서 감압하여 날려보낸 후 질소농축기를 이용하여 1.5psi로 20분간 농축하며 항량이 될 때까지 반복하여 지방항량을 측정한다.

[eqn: 조지방(%) = {항량(g) -(플라스크 + 비등석))(g)} over {시료양(g) }]

(3) 지방 제거

분액여두에 유리솜으로 넣고 유리깔때기를 이용하여 무수황산나트륨 20 g을 넣고 지방 1 g 당 산성실리카겔 10 g을 넣어준다.  지방항량이 끝난 시료에 헥산 3 ㎖를 넣고 충분히 용해한 다음 분액여두에 시료가 묻지 않도록 산성실리카겔 표면에 넓게 뿌려서 넣어준다.  이러한 조작을 두 번 더 반복한 다음 20분간 반응시킨다.  헥산 130～150 ㎖로 용리한다음 약 3 ㎖가 남도록 40℃ 이하의 수욕상에서 감압하여 날려보낸다. 남은 농축액을 시험관에 모은 후 감압용기를 헥산 3 ㎖씩 2회 반복 용해하여 이전의 시험관에 합쳐서 추출액으로 한다.

(2) 정제

실리카겔 칼럼에 위의 추출액을 가하여 헥산으로 용출시키고 그 용출액을 알루미나 칼럼에 가한 후 2% 디클로로메탄 함유 헥산으로 방해물질을 제거한 다음 50% 디클로로메탄 함유 헥산으로 다시 용출시킨다. 이 알루미나칼럼에 용출액을 카본칼럼에 가하고 50% 에칠초산 함유 벤젠 및 헥산의 순으로 방해물질을 정제한 다음 톨루엔으로 역유출하여 농축한다. 농축액에 실린지 첨가용 내부표준물질을 첨가한 후 시험용액으로 한다.

※주의 : 칼럼크로마토그래피에서 사용하는 충진제나 용매의 종류 및 양은 표준물질 등으로 분획실험을 하여 정한 것으로 한다.

4) 시험조작

(1) 가스크로마토그래피의 측정조건

① 칼럼 : 안지름 0.32㎜, 길이 60m의 규산유리 캐필러리 칼럼관에 가스크로마토그래프용 5%페닐-메칠실리콘(DB-5)을 교차 결합시킨 것 또는 이와 동등한 것으로 분석하고자 하는 전 이성체의 분리가 양호하며 그 분리 효율을 입증할 수 있는 것이어야 한다.

② 오븐온도 : 이성체 각각의 분리가 양호하며, 크로마토그램 상에서 그 용출순서를 판명할 수 있도록 온도조건을 설정한다. 단, 2,3,7,8-TCDD 및 2,3,7,8-TCDF와 가장 근접한 피크의 계곡은 25% 미만이어야 한다.

③ 캐리어가스 및 유량 : 헬륨을 적절하게 조절한다.

④ 주입부 : 270℃ 또는 이성체 각각의 분리가 양호한 온도

⑤ 연결부 : 290℃ 또는 이성체 각각의 검출이 양호한 온도

⑥ 이온원 : 260℃ 또는 이성체 각각의 검출이 양호한 온도

(2) 고분해능 질량분석기의 측정조건

① 튜닝 표준물질 : PFTBA 또는 이와 동등한 것

② 분해능 : 10,000 이상 (10% 계곡 기준)

③ 이온화방식 : 전자충격이온화 방식 (EI)

④ 질량설정 : 측정하고자 하는 각 동족체마다 M+, (M+2)+ 및 (M+4)+ 중 2개의 이온을 선택한다.

⑤ 질량 검정 : 가스크로마토그래프/질량분석기는 시료분석조건과 동일한 조건에서 분해능 10,000 이상으로 조절(tuning)한 다음, 4 염화물에서 8 염화물의 선택이온들을 적당한 그룹으로 나누어 튜닝 표준물질에 대한 질량 검정을 하여야 한다.

⑥ 주기적 점검 : 분석을 지속적으로 수행하는 경우 매 12시간 마다 정량용 표준물질 중 중간농도의 표준물질을 선택하여 기기 성능을 점검하여야 하며 회수율은 80%～120%에 있어야 한다.

⑦ 검출한계 : 염화물 각각의 검출한계는 표 2에 나타난 값 이하이어야 한다.

(3) 정성시험

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 하며, 측정한 선택이온 2개의 이온세기 비율은 표 3에 나타난 이론값에 대하여 ±15% 이내에 있어야 한다. 단, 모든 신호 대 잡음(S/N)비는 2.5보다 커야 하며, 정량용 13C12 및 37C12의 경우는 10보다 커야 한다.

4) 정량시험

정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 검출된 각각의 다이옥신류에 대해 이에 대응하는 정량용 13C12체 및 37C12체 표준물질로 상대검량선법으로 정량한다. 또한 동위원소 표준물질 37C4체-2,3,7,8-TCDD와 13C12-2,3,7,8 등 15종의 내부표준물질에 대한 농도를 절대검량선법으로 구하여 회수율을 계산하며 회수율은 50% 이상 120%이하이어야 한다. 대용 표준물질의 회수율도 70% 이상 130%이하이어야 한다.

① 검량선 작성

검량선 작성용 표준물질을 (3)정성시험과 같은 방법으로 가스크로마토그래피/질량분석기에 주입하여 각 선택이온에 대한 크로마토그램을 작성하여 각 표준물질의 피크 면적과 이에 대응하는 13C12체의 피크 면적으로부터 다음 식에 의해 상대감응(RR)을 구한다. 상대감응은 5개 농도 이상의 검량선 작성용 표준물질을 사용하며 편차범위는 ±20% 이내이어야 한다.

[eqn: RR = {(A sub 1n + A sub 2n ) (C sub l )} over {(A sub 1l + A sub 2l ) (C sub n ) }]

A1n, A2n : 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 다이옥신류  의 1차 및 2차 선택 이온의 피크 면적

A1l, A2l : 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 13C12체 화합물의 1차 및 2차 선택 이온의 피크 면적

Cn : 검량선 작성용 표준물질의 농도

Cl : 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 13C12체 표준물질의 농도

② 반응계수(RF)

반응계수(RF)는 검량선 작성용 표준물질을 분석하여 얻은 크로마토그램으로부터 내부표준물질방법에 따라 다음의 식에 의해 구한다. 5개 농도의 검량선 작성용 표준물질을 사용한 반응계수의 편차범위는 ±35% 이내이어야 한다.

[eqn: RF= {(A sub 1s ＋ A sub 2s )(C sub is )} over {(A sub 1is ＋ A sub 2is )(C sub s )}]

A1s, A2s : 검량선 작성용 표준물질의 1차 및 2차 선택이온의 피크 면적

A1is, A2is : 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 내부표준물질의 1차 및 2차 선택이온의 피크 면적

Cs; 검량선 작성용 표준물질의 농도

Cis; 검량선 작성용 표준물질에 첨가된 내부표준물질의 농도

③ 시료 중 다이옥신 농도(C)의 계산

시료 중 다이옥신 농도(C)는 다음 식에 의해 구한다.

[eqn: C(ng/g) = {(A sub 1n + A sub 2n ) (C sub l )} over {(A sub 1l + A sub 2l ) (RR)} times {V sub ex over W sub s}]

A1n, A2n : 시료에 함유된 대상물질의 1차 및 2차 선택이온의 피크 면적

A1l, A2l : A1n 와 A2n에 대응하는 시료에 첨가된 13C12체 화합물의 1차 및 2차 선택 이온의 피크 면적

RR : 상대감응

Cl : 시료에 첨가된 13C12체 표준물질의 양(ng/㎖)

Vex : 추출용량(㎖)

Ws : 시료량 (g)

④ 동위원소 표준물질의 검출 농도 및 회수율

시료에 첨가된 동위원소 표준물질의 검출농도(Cl) 및 회수율은 다음 식에 의해 구한다.

[eqn: C sub l (ng/g)= { (A sub 1s ＋ A sub 2s )(C sub is )} over {(A sub 1is ＋ A sub 2is )RF }]

A1s, A2s; 동위원소 표준물질(13C12체 표준물질)의 1차 및 2차 선택이온의 피크 면적

A1is, A2is; 실린지 첨가용 내부 표준물질의 1차 및 2차 선택이온의 피크 면적

Cis; 실린지 첨가용 내부 표준물질의 농도

RF: 반응계수

[eqn: 회수율(%)= {검출농도} over {첨가농도}×100]

⑤ 독성등가환산농도(TEQ)

시료에 함유된 이성체에 대한 2,3,7,8-TCDD 독성등가환산농도(TEQ: Toxicity Equivalents)는 시료 중 다이옥신 농도에 표 4의 독성등가계수(TEF: Toxicity Equivalent Factor)를 곱하여 구한다.

표 1. 대상물질

Congeners		m/z
		M+	(M+2)+	(M+4)+
P C D D	2,3,7,8-TCDD	319.8965	321.8936	323.8906
	1,2,3,7,8-PeCDD	353.8576	355.8546	355.8517
	1,2,3,4,7,8-HxCDD	387.8186	388.8127	393.8097
	1,2,3,6,7,8-HxCDD	387.8186	388.8127	393.8097
	1,2,3,7,8,9-HxCDD	387.8186	388.8127	393.8097
	1,2,3,4,6,7,8-HpCDD	421.7796	423.7767	425.7737
	OCDD	455.7407	457.7377	459.7348
P C D F	2,3,7,8-TCDF	303.9016	305.8987	307.8957
	1,2,3,7,8-PeCDF	337.8627	339.8597	341.8567
	2,3,4,7,8-PeCDF	337.8627	339.8597	341.8567
	1,2,3,4,7,8-HxCDF	371.8237	373.8207	375.8178
	1,2,3,6,7,8-HxCDF	371.8237	373.8207	375.8178
	1,2,3,7,8,9-HxCDF	371.8237	373.8207	375.8178
	2,3,4,6,7,8-HxCDF	371.8237	373.8207	375.8178
	1,2,3,4,6,7,8-HpCDF	405.7847	407.7818	409.7788
	1,2,3,4,7,8,9-HpCDF	405.7847	407.7818	409.7788
	OCDF	439.7457	441.7428	443.7398

주: 약어의 펼친 이름은 다음과 같음.

PCDD = poly chlorinated dibenzo dioxin	P

CDF = poly chlorinated dibenzo furan

TCDD  = tetra chloro dibenzo dioxin

TCDF = tetra chloro dibenzo furan

PeCDD = penta chloro dibenzo dioxin

PeCDF = penta chloro dibenzo furan

HxCDD = hexa chloro dibenzo dioxin

HxCDF = hexa chloro dibenzo furan

HpCDD = hepta chloro dibenzo dioxin

HpCDF = hepta chloro dibenzo furan

OCDD = octa chloro dibenzo dioxin

OCDF = octa chloro dibenzo furan

표 2. 검출한계

4～5 염화물	6～7 염화물	8 염화물
0.01 pg/g	0.02 pg/g	0.05 pg/g

표 3. 염소원자수에 의한 동족체 피크의 자연존재비

	자연존재비
	M	M+2	M+4	M+6	M+8	M+10	M+12	M+14
4	76.5	100	48.7	10.5	0.9
5	61.5	100	65.0	21.1	3.5	0.2
6	51.2	100	81.2	35.2	8.5	1.1	0.06
7	43.2	100	97.5	52.8	17.1	3.3	0.36	0.02
8	33.8	87.9	100.0	65.0	26.4	6.8	1.1	0.10

표 4. 독성등가계수 (Toxicity Equivalent Factors; WHO-TEFs)

다이옥신류	WHO-TEFs
2,3,7,8-TCDD 2,3,7,8-TCDF 1,2,3,7,8-PeCDD 1,2,3,7,8-PeCDF 2,3,4,7,8-PeCDF 1,2,3,4,7,8-HxCDD 1,2,3,6,7,8-HxCDD 1,2,3,7,8,9-HxCDD 1,2,3,4,7,8-HxCDF 1,2,3,6,7,8-HxCDF 1,2,3,7,8,9-HxCDF 2,3,4,6,7,8-HxCDF 1,2,3,4,6,7,8-HpCDD 1,2,3,4,6,7,8-HpCDF 1,2,3,4,7,8,9-HpCDF OCDD OCDF	1.0 0.1 1.0 0.05 0.5 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.01 0.01 0.01 0.0001 0.0001