식품의약품안전청 공고 제2011-72호

식품의 기준 및 규격 일부개정고시(안)

행정예고

2011. 5. 12.

식품의약품안전청

식품의약품안전청 공고 제2011-72호

「식품의 기준 및 규격」(식품의약품안전청고시 제2011-17호, 2011. 4. 1.)을 일부 개정함에 있어 국민에게 미리 알려 의견을 수렴하고자 그 취지, 개정 이유 및 주요 내용을 「행정절차법」 제46조에 따라 다음과 같이 공고합니다.

2011년 5월 12일

식품의약품안전청장

식품의 기준 및 규격 일부개정고시(안) 행정예고

1. 개정 이유

원유, 우유류, 식용유지류, 잼 및 젤리 중 중금속 기준은 신설, 개별 농산물의 중금속 기준은 농산물의 종류별로 확대하고 면류, 시리얼류 중 곰팡이독소에 대한 안전기준을 마련하며, 아마를 “식품에 제한적으로 사용할 수 있는 원료”의 목록에 추가하여 식품 안전관리를 강화하고자 함.

또한 식품의 방사능 기준 중 영유아식품의 기준을 신설하고 유 및 유가공품의 기준을 개정하여 방사능 오염에 대한 안전관리를 강화하고자 함

아울러 식중독균 기준을 정량화하여 선진외국의 기준과 조화를 이루고, 「식품등 중 기준규격미설정 물질의 시험방법」중 잔류농약시험법을 「식품의 기준 및 규격」으로 통합하고 「식품등 중 기준규격미설정 물질의 시험방법」은 폐지하고자 함.

2. 주요 내용

가. 식품일반에 대한 공통기준 및 규격 중 클로스트리디움 퍼프린젠스 기준 개정[안 제 2, 5, 4)]

(1) 국제적인 추세에 부합하고 인체 위해성 및 식중독 발생균량 등을 고려한 현실적인 안전관리 기준 필요

(2) 식품일반에 대한 공통기준 및 규격 중 클로스트디움 퍼프린젠스의 규격 정량화

나. 식품 중 중금속 기준 신설 [안 제 2, 5, 5), (3), (5), 제 5, 1, 5), (12), 제 5, 4, 5), (3), 제 5, 14, 5)]

(1) 곡류, 서류, 콩류, 과실류, 엽채류, 엽경채류, 근채류, 과채류에 대하여 중금속(납, 카드뮴) 기준 신설

(2) 축산물에 해당하는 유가공품 중 원유 및 우유류에 대하여 납 기준 신설

(3) 캔디류 중 젤리, 잼류에 대한 납 기준 신설

(4) 식용유지류에 대한 납, 비소 기준 신설

다. 방사능 기준 신설 및 개정〔안 제 2, 5, 7)〕

(1) 영아용 조제식, 성장기용 조제식, 영·유아용 곡류조제식, 기타 영·유아식, 영․유아용 특수조제식품에 대한 요오드 기준 신설

(2) 유 및 유가공품의 요오드 기준 개정

라. 식품 중 곰팡이독소 기준 신설 [안 제 5, 1, 8), (6), (7)]

면류 중 데옥시니발레놀, 시리얼류 중 제랄레논 기준 신설

마. 혼합음료의 정의 개정〔안 제 5, 18-6, 4), (1)〕

먹는 물 뿐만 아니라 동․식물성 원료를 주원료로 하여 혼합음료를 제조할 수 있도록 개정

바. 일반시험법 개정

(1) 잔류농약 시험법 신설〔안 제 10, 4.1.3.29 및 4.1.4.140～4.1.4.146〕

(가) 이소카보포스 등 11종 농약에 대한 시험법 신설

(나) 「식품등 중 기준규격미설정 물질의 시험방법」에 고시되었던 시험법 통합하고 「식품등 중 기준규격미설정 물질의 시험방법」을 폐지

(2) 유전자재조합식품 시험법의 개정[안 제 10, 8.1.5 및 8.1.11]

(가) 유전자재조합식품 표시제도의 과학적 사후관리를 위해 신규 승인된 유전자재조합식품의 시험법 확대 필요

(나) 유전자재조합 콩 2건(DP356043-5 및 DP305423-1), 유전자재조합 옥수수 2건(MIR162 및 DP098140-6), 유전자재조합 면화 1건(GHB614)에 대한 시험법 추가 신설

(다) 과학적인 분석업무 적용범위 확대

사. 아마를 제한적 사용 원료로 재분류[안 [별표 1], [별표 2]]

아마를 [별표 1] “식품에 사용할 수 있는 원료”의 목록에서 삭제하고, [별표 2] “식품에 제한적으로 사용할 수 있는 원료”의 목록에 추가

3. 의견제출

「식품의 기준 및 규격」 일부개정고시(안)에 대하여 의견이 있는  단체 또는 개인은 2011년 6월 3일까지 다음 사항을 기재한 의견서를 식품의약품안전청장(우편번호 : 363-700, 주소 : 충북 청원군 강외면 오송생명2로 오송보건의료행정타운 식품의약품안전청, 참조 : 식품기준과, 전화 043-719-2416, 2418, 팩스 043-719-2400)에게 제출하여 주시기 바랍니다.

가. 예고사항에 대한 항목별 의견(찬·반 여부와 그 이유)

나. 성명(단체의 경우 단체명과 그 대표자의 성명), 전화번호 및 주소

다. 기타 참고사항

식품의약품안전청 고시 제2011-  호

「식품위생법」 제7조제1항에 따른 「식품의 기준 및 규격」(식품의약품안전청 고시 제2011-17호, 2011. 4. 1.)을 다음과 같이 개정 고시합니다.

2011년 5월   일

식품의약품안전청장

식품의 기준 및 규격 일부개정고시(안) 행정예고

식품의 기준 및 규격 일부를 다음과 같이 개정한다.

제 2, 5, 4)를 다음과 같이 한다.

4) 식중독균

식육(제조, 가공용원료는 제외한다), 살균 또는 멸균처리하였거나 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품에서는 특성에 따라 살모넬라(Salmonella spp.), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 리스테리아 모노사이토제네스(Listeria monocytogenes), 대장균 O157:H7(Escherichia coli O157:H7), 캠필로박터 제주니(Campylobacter jejuni), 여시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 등 식중독균이 검출되어서는 아니되며, 또한 식육 및 식육제품에 있어서는 결핵균, 탄저균, 브루셀라균이 검출되어서는 아니 된다. 다만, ‘제 5. 식품별 기준 및 규격’에서 식중독균에 대한 규격이 정하여진 식품에는 해당식품의 규격을 적용하며, 그 외의 가공식품 중 바실러스 세레우스(Bacillus cereus) 와 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens)는 다음과 같이 적용한다.

(1) 바실러스 세레우스

① 장류(메주 제외) 및 소스류, 복합조미식품, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품 : g 당 10,000 이하(멸균제품은 음성이어야 한다)

② ① 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : g 당 1,000 이하(멸균제품은 음성이어야 한다).

(2) 클로스트리디움 퍼프린젠스

① 장류(메주 제외), 고춧가루 또는 실고추, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품, 복합조미식품, 향신료가공품, 식초, 카레분 및 카레(액상제품 제외) : g 당 100 이하(멸균제품은 음성이어야 한다)

② ① 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : 음성

제 2, 5, 5) 중 (3) 및 (5)를 다음과 같이 한다.

(3) 농산물 중 중금속 기준

대상식품	납(mg/kg)	카드뮴(mg/kg)
곡류 (현미 제외)	0.2 이하	0.1 이하(밀, 쌀은 0.2 이하)
서류	0.1 이하	0.1 이하
콩류	0.2 이하	0.1 이하(대두는 0.2 이하)
과실류	0.1 이하(사과, 귤, 장과류는 0.2 이하)	-
엽채류(결구 엽채류 포함)	0.3 이하	0.2 이하
엽경채류	0.1 이하	0.05 이하
근채류	0.1 이하	0.1 이하(양파는 0.05 이하)
과채류	0.1 이하(고추, 호박은 0.2 이하)	0.05 이하(고추, 호박은 0.1 이하)
참깨	0.3 이하	0.2 이하

(5) 축산물 중 중금속 허용기준

대상식품	납(mg/kg)	카드뮴(mg/kg)
가금류고기	0.1 이하	-
돼지간	0.5 이하	0.5 이하
돼지고기	0.1 이하	0.05 이하
돼지신장	0.5 이하	1.0 이하
소간	0.5 이하	0.5 이하
소고기	0.1 이하	0.05 이하
소신장	0.5 이하	1.0 이하
원유 및 우유류	0.02 이하	-

제 2, 5, 7)을 다음과 같이 한다.

핵 종	대 상 식 품	기 준(Bq/Kg, L)
131I	영아용 조제식, 성장기용 조제식, 영·유아용 곡류조제식, 기타 영·유아식, 영․유아용특수조제식품	100
	유 및 유가공품	100
	기타 식품★	300
134Cs + 137Cs	모든 식품	370

★ 기타식품은 영아용 조제식, 성장기용 조제식, 영·유아용 곡류조제식, 기타 영·유아식, 영․유아용특수조제식품, 유 및 유가공품을 제외한 모든 식품을 말한다.

제 2, 5, 8) 중 (6) 과 (7)을 다음과 같이 한다.

(6) 데옥시니발레놀(Deoxynivalenol)

대 상 식 품	기준 (mg/kg)
곡류 및 그 단순가공품 (옥수수 및 그 단순가공품 제외)	1 이하
옥수수 및 그 단순가공품	2 이하
시리얼류	0.5 이하
면류	0.75 이하

(7) 제랄레논(Zearalenone)

대 상 식 품	기준 (μg/kg)
곡류 및 그 단순가공품	200 이하
과자	50 이하
시리얼류	50 이하

제 2, 5, 12) “기타 유해물질 기준”을 “발기부전치료제 등과 유사한 물질 기준”으로 하고, 제2, 5, 12)의 (4)부터 (6)까지를 13)부터 15)까지로 한다.

제 2, 5 중 13)부터 16)까지를 16)부터 19)까지로 한다.

제 5, 1, 5) 중 (12)를 다음과 같이 신설한다.

(12) 납 (mg/kg) : 1.0 이하(젤리에 한한다)

제 5, 4, 5) 중 (3)을 다음과 같이 신설한다.

(3) 납 (mg/kg) : 1.0 이하

제 5, 14 중 5)를 다음과 같이 한다.

유형 항목	콩기름	옥수수기름	채종유	미강유
(1) 산가	0.6 이하	0.6 이하	0.6 이하	0.6 이하
(2) 요오드가	123~142	103~130	95~127	92~115
(3) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(4) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	참기름	추출참깨유	들기름	추출들깨유
(1) 산가	4.0 이하	0.6 이하	5.0 이하	0.6 이하
(2) 요오드가	103~118	103~118	192~209	192~209
(3)산화방지제 (g/kg)	—	—	다음에서 정하는 것 이외의 산화방지제가 검출되어서는 아니 된다.
			부틸히드록 시아니졸 디부틸히드 록시톨루엔 터셔리부틸 히드로퀴논	0.2 이하(병용할 때에는 부틸히드록시아니졸, 디부틸히드록시톨루엔 및 터셔리부틸히드로퀴논으로서의 사용량의 합계가 0.2 이하)
			몰식자산 프로필	0.1 이하
(4) 리놀렌산(%)*	0.5 이하	—	—	—
(5) 에루스산(%)	검출되어서는 아니 된다.	—	—	—
(6) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(7) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

* 팔미트산(C16:0), 스테아르산(C18:0), 올레산(C18:1), 리놀레산(C18:2), 리놀렌산(C18:3), 아라키딘산(C20:0) 중 리놀렌산 함량

유형 항목	홍화유	고올레산 홍화유	해바라기유	고올레산 해바라기유
(1) 산가	0.6 이하	0.6 이하	0.6 이하	0.6 이하
(2) 요오드가	140~150	80~100	120~142	75~88
(3) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(4) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유 형 항 목	목화씨기름	목화씨샐러드유	목화씨스테아린유
(1) 산가	0.6 이하	0.6 이하	0.6 이하
(2) 요오드가	102~120	105~123	83~105
(3) 냉각시험	—	5시간 30분 맑고 투명하여야 한다.	—
(4) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(5) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	땅콩기름	정제땅콩기름
(1) 산가	2.0 이하	0.6 이하
(2) 요오드가	84~103	84~103
(3) 산화방지제 (g/kg)	다음에서 정하는 것 이외의 산화방지제는 검출되어서는 아니 된다.
	부틸히드록시아니졸 디부틸히드록시톨루엔 터셔리부틸히드로퀴논	0.2 이하(병용할 때에는 부틸히드록시아니졸, 디부틸히드록시톨루엔 및 터셔리부틸히드로퀴논으로서의 사용량의 합계가 0.2 이하)
	몰식자산 프로필	0.1 이하
(4) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하
(5) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	압착올리브유	정제올리브유	혼합올리브유
(1) 산가	2.0 이하	0.6 이하	2.0 이하
(2) 요오드가	75~94	75~94	75~94
(3) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(4) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	팜유	팜올레인유	팜스테아린유	팜핵유
(1) 산가	0.6 이하	0.6 이하	0.6 이하	0.6 이하
(2) 과산화물가	—	5.0 이하	3.0 이하	—
(3) 요오드가	44~60	—	—	14~22
(4) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(5) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	야자유	혼합식용유	가공유지
(1) 산가	0.6 이하	0.6 이하	0.6 이하
(2) 과산화물가	—	—	3.0 이하
(3) 요오드가	7~11	—	—
(4) 산화방지제 (g/kg)	—	다음에서 정하는 것 이외의 산화방지제가 검출되어서는 아니 된다.
		부틸히드록시아졸 디부틸히드록시톨루엔 터셔리부틸히드로퀴논	0.2 이하(병용할 때는 부틸히드록시아니졸, 디부틸히드록시톨루엔 및 터셔리히드로퀴논으로서의 사용량의 합계가 0.2 이하)
		몰식자산 프로필	0.1 이하
(5) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(6) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	쇼트닝	마가린		저지방마가린 (지방스프레드)
(1) 조지방 (%)	—	80.0 이상		10.0 이상~80.0 미만
(2) 산가	0.8 이하(다만, 일반 시중에 유통 판매할 목적이 아닌 업소용으로서 레시틴, 글리세린지방산에스테르 등 유화제를 사용한 경우는 제외한다)	1.0 이하(다만, 유지방 또는 레시틴, 글리세린지방산에스테르 등을 사용한 경우는 제외한다)		1.0 이하(다만, 유지방 또는 레시틴, 글리세린지방산에스테르 등을 사용한 경우는 제외한다)
(3) 타르색소	—	검출되어서는 아니 된다.		검출되어서는 아니 된다.
(4) 산화방지제 (g/kg)	다음에서 정하는 것 이외의 산화방지제가 검출되어서는 아니 된다.
	부틸히드록시아니졸 디부틸히드록시톨루엔 터셔리부틸히드로퀴논		0.2 이하(병용할 때에는 부틸히드록시아니졸, 디부틸히드록시톨루엔 및 터셔리부틸히드로퀴논으로서 사용량의 합계가 0.2 이하)
	몰식자산 프로필		0.1 이하
	—	E.D.T.A 칼슘이나트륨 0.075 이하 (E.D.T.A이나트륨으로서)
(5) 보존료 (g/kg)	—	다음에서 정하는 것 이외의 보존료가 검출되어서는 아니 된다.
		데히드로초산 데히드로초산나트륨		0.5 이하(데히드로 초산으로서)
		안식향산, 안식향산 나트륨, 안식향산칼륨, 안식향산칼슘		1.0 이하(안식향산으로서)
		소르빈산 소르빈산칼륨 소르빈산칼슘		1.0 이하[소르빈산으로서, 단 저지방 마가린(지방스프레드)은 2.0 이하]
		상기(안식향산류 및 소르빈산류)의 보존료를 병용 사용시		1.0 이하[안식향산 및 소르빈산의 합으로서, 단 저지방 마가린(지방스프레드)은 안식향산 및 소르빈산의 합으로서 2.0 이하이며 그중 안식향산은 1.0 이하]
(6) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하		0.1 이하
(7) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하		0.1 이하

유형 항목	압착고추씨기름	고추씨기름	향미유
(1) 산가	3.0 이하	0.6 이하	3.0 이하
(2) 요오드가	120~139	120~139	—
(3) 타르색소	—	—	검출되어서는 아니 된다.
(4) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(5) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	기타 식용유지
(1) 산가	0.6 이하 (압착유는 4.0 이하)
(2) 산화방지제 (g/kg)	다음에서 정하는 것 이외의 산화방지제가 검출되어서는 아니 된다.
	부틸히드록시아니졸 디부틸히드록시톨루엔 터셔리부틸히드로퀴논	0.2 이하(병용할 때에는 부틸히드록시아니졸, 디부틸히드록시톨루엔 및 터셔리부틸히드로퀴논으로서의 사용량의 합계가 0.2 이하)
	몰식자산 프로필	0.1 이하
(3) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하
(4) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하

제 5, 18-6, 4), (1) 중 “먹는 물에 식품 또는 식품첨가물을 가한 것을 말한다.”를 “먹는 물 또는 동․식물성 원료에 식품 또는 식품첨가물을 가하여 음용할 수 있도록 가공한 것을 말한다.”로 한다.

제 10, 4.1.3.29를 다음과 같이 신설한다.

4.1.3.29 아트라진(Atrazine), 부피리메이트(Bupirimate), 클로로벤주론 (Chlorobenzuron) 및 클로로톨루론(Chlorotoluron)

1) 시험법 적용범위

곡류, 콩류, 채소류, 과실류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체를 아세토니트릴 또는 아세톤으로 추출한 다음, 기체크로마토그래프 분석대상 농약은 후로리실 카트리지로 정제하여 기체크로마토그래프로 측정하고 액체크로마토그래프 분석대상 농약은 아미노-프로필 카트리지로 정제하여 액체크로마토그래프로 측정한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프 : 질소․인 검출기(NPD)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프․질량분석기 (GC/MS)를 사용한다.

다) 액체크로마토그래프 : 자외부흡광검출기(Ultraviolet Detector)를 사용한다.

라) 액체크로마토그래프․질량분석기 (LC/MS)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 후로리실(Florisil) 및 아미노-프로필(Amino-propyl) 카트리지：후로리실(500 mg) 및 아미노-프로필(1 g) 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지

라) 표준원액 : 각 농약의 표준품을 유기용매(기체크로마토그래프 분석 용은 아세톤, 액체크로마토그래프 분석용은 아세토니트릴에 녹인다)에 녹여 500 mg/L가 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 사용하여 적당한 농도로 혼합, 희석하여 사용한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

가) 추출

(1) 아세토니트릴 추출법

검체[곡류 및 콩류는 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 μm를 통과하도록 분쇄한 50 g. 채소류 및 과실류는 약 1 kg을 분쇄기에 넣고 분쇄한 50 g]를 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고(단, 곡류 및 콩류의 경우 물 30 mL를 넣어 2시간 정치) 아세토니트릴 100 mL를 넣은 후 균질기로 2～3분간 균질화한다. 이를 여과지가 깔려있는 부흐너깔때기로 감압여과한다. 여과액을 염화나트륨 10～15 g이 들어있는 150 mL의 분리병에 담고 마개를 막은 후 1분간 세게 흔들어 섞는다. 이를 약 1시간 정치하여 아세토니트릴층과 물층을 분리시킨다. 상등액(아세토니트릴층) 20 mL를 취하고 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 용매를 날려버린다. ★ 잔류물을 기체크로마토그래프 분석 대상 농약의 경우 20% 아세톤 함유 헥산 4 mL에 녹이고, 액체크로마토그래프 분석 대상 농약은 1% 메탄올 함유 디클로로메탄 4 mL에 녹인다.

(2) 아세톤 추출법

검체[곡류 및 콩류는 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 μm를 통과하도록 분쇄한 50 g. 채소류 및 과실류는 약 1 kg을 분쇄기에 넣고 분쇄한 50 g]를 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고(단, 곡류 및 콩류의 경우 물 30 mL를 넣어 2시간 정치) 아세톤 100 mL를 넣은 후 균질기로 2～3분간 균질화한다. 이를 여과지가 깔려있는 부흐너깔때기로 감압여과한다. 여과액을 1 L 분액깔때기로 옮기고 포화염화나트륨 용액 50 mL, 물 100 mL 및 디클로로메탄 50 mL를 가하고 진탕한 후 층이 완전히 분리될 때까지 정치하고 디클로로메탄층을 취한다. 다시 디클로로메탄 50 mL로 상기의 과정을 되풀이 하여 여액을 합하고 무수황산나트륨에 통과시켜 탈수한다. 탈수한 용액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 용매를 날려버린다. ★ 잔류물을 기체크로마토그래프 분석 대상 농약의 경우 20% 아세톤 함유 헥산 4 mL에 녹이고, 액체크로마토그래프 분석 대상 농약은 1% 메탄올 함유 디클로로메탄 4 mL에 녹인다.

※ 추출은 상기 (1) 또는 (2) 중 선택하여 사용함.

주. 곡류, 콩류 등 지방성 검체의 경우 ★까지 시험하고 잔류물에 미리 아세토니트릴(또는 메탄올)로 포화시킨 헥산 30 mL를 건고물에 가하여 녹인 후 250 mL 용량의 분액깔때기에 옮기고 미리 헥산으로 포화시킨 아세토니트릴(또는 메탄올) 30 mL씩으로 2회 분배 추출하여 지방을 제거한다. 2회 추출된 아세토니트릴(또는 메탄올) 층을 합친 후 40℃에서 감압 농축하고 잔사를 20% 아세톤 함유 헥산 4 mL(기체크로마토그래프 분석 대상 농약) 및 1% 메탄올 함유 디클로로메탄 4 mL(액체크로마토그래프 분석 대상 농약)에 완전히 녹인다.

나) 정제

(1) 기체크로마토그래프 분석 대상농약

미리 후로리실 카트리지에 헥산 5 mL를 초당 2～3 방울 정도의 속도로 유출하여 버린다. 이 카트리지에 20% 아세톤 함유 헥산 5 mL를 위와 같은 방법으로 유출하여 버린다. 이어서 가) 추출 항의 20% 아세톤 함유 헥산에 녹인 액을 카트리지 상단에 넣고 초당 1～2방울 정도의 속도로 용출시켜 시험관에 받는다. 다시 카트리지가 용매에 젖어 있는 상태에서 20% 아세톤 함유 헥산 5 mL를 용출하여 동일 시험관에 모은다. 용출액은 40℃ 이하의 항온수조 중에서 질소 또는 공기를 낮은 유속으로 통과시키면서 용매를 날려 보낸 후 20% 아세톤 함유 헥산에 녹여서 일정량으로 하여 시험용액으로 한다.

주. 정제과정 중에는 모든 카트리지의 충전제가 마르지 않도록 주의한다.

(2) 액체크로마토그래프 측정 대상농약

미리 아미노-프로필 카트리지에 디클로로메탄 5 mL를 초당 2～3 방울 정도의 속도로 유출하여 버린다. 이 카트리지에 가) 추출 항의 1% 메탄올 함유 디클로로메탄에 녹인 액을 카트리지 상단에 넣고 초당 1～2 방울 정도의 속도로 용출시켜 시험관에 받는다. 다시 카트리지가 용매에 젖어 있는 상태에서 1% 메탄올 함유 디클로로메탄 7 mL로 용출하여 동일 시험관에 합친다. 용출액은 40℃ 이하의 항온수조 중에서 질소 또는 공기를 낮은 유속으로 통과시키면서 용매를 날려 보낸 후 아세토니트릴에 녹여 일정량으로 한 후 맴브레인 필터(PTFE 0.45 μm)로 여과하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프(NPD)의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5 (30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm)

(2) 캐리어가스 및 유량 : 질소, 1.0 mL/min

(3) 오븐온도 : 80℃에서 검체를 주입하고 2분간 유지한 후 7℃/분의 비율로 250℃까지 온도를 상승시킨 후 5℃/분의 비율로 280℃까지 온도를 상승시켜 15분간 유지한다.

(4) 주입부 : Splitless mode, 260℃

(5) 검출기온도 : 300℃

(6) 주입량 : 1 μL

나) 액체크로마토그래프(UVD)의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (20/80, v/v)에서 아세토니트릴/물 혼합액 (80/20, v/v)으로 20분간 농도균배한 후 10분 이상 흘려보낸다.

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 검체주입량 : 10 μL

(6) 검출기파장 : UV 254 nm

다) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

라) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

아트라진 (19.2분) 1 ng.

그림 2. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

부피리메이트 (27.9분) 1 ng.

그림 3. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

클로로벤주론 (28.2분)  10 ng.

그림 4. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

클로로톨루론 (17.1분) 20 ng.

마) 정량한계

아트라진 : 0.05 mg/kg

부피리메이트 : 0.05 mg/kg

클로로벤주론 : 0.03 mg/kg

클로로톨루론 : 0.05 mg/kg

7) 정량시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이법 또는 피크 면적법에 따라 정량한다.

8) 확인시험

기체 또는 액체크로마토그래프․질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로 각 농약의 성분을 확인할 수 있다.

가) 기체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5MS 캐필러리 칼럼 (30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm) 또는 이와 동등한것

(2) 캐리어가스 및 유량 : 헬륨, 1.0 mL/min

(3) 칼럼온도 : 80℃에서 검체를 주입하고 2분간 유지한 후 7℃/분의 비율로 250℃까지 온도를 상승시킨 후 5℃/분의 비율로 280℃까지 온도를 상승시켜 15분간 유지한다.

(4) 주입부 : Splitless mode, 260℃

(5) Interface 온도 : 280℃

(6) 분자량 범위 : 100 ～ 400

(7) 주입량 : 1 μL

표 1. 기체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 Fragment ions

화합물	머무름 시간 (분)	분자량	Fragment monitored (m/z)
아트라진	19.3	215	173, 200, 215
부피리메이트	24.8	316	273, 208

나) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (100 mm × 2.0 mm, 3 μm)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 :

(가) 클로로벤주론 : 아세토니트릴/물 혼합액 (50/50, v/v), Isocratic

(나) 클로로톨루론 : 아세토니트릴/물 혼합액 (30/70, v/v), Isocratic

(4) 이동상 유량 : 0.2 mL/min

(5) 검체주입량 : 5 μL

(6) 이온화 :

(가) 클로로벤주론 : ESI negative-ion mode

(나) 클로로톨루론 : ESI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 100 ～ 500

(8) Capillary temperature : 350℃

(9) Cone voltage :

(가) 클로로벤주론 : -94 V

(나) 클로로톨루론 : 98 V

표 2. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

화합물	머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
클로로벤주론	8.9	308	307
클로로톨루론	9.9	212	213

제 10, 4.1.4.140 부터 제10, 4.1.4.146 까지를 각각 다음과 같이 신설한다.

4.1.4.140 이소카보포스 (Isocarbofos)

1) 시험법 적용범위

곡류, 과실 및 채소류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과 한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 디클로로메탄으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축한 후 헥산/아세토니트릴 분배를 거쳐 비극성 불순물을 제거하고 후로리실 칼럼크로마토그래피(용출용매 : 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (4/96, v/v)으로 추가 정제하여 기체크로마토그래프로 측정한다.

3) 장치

기체크로마토그래프/불꽃광도검출기(FPD)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 후로리실 (Florisil) : 잔류농약분석용 (60～100 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

라) 표준원액 : 이소카보포스를 아세톤에 녹여 1000 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 아세톤에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(곡류는 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 ㎛를 통과하도록 분쇄한 후 그 20 g을 달아 습윤화하고 과실류 또는 채소류는 약 1 kg을 잘 썰거나 갈은 후 그 20 g을 단다)를 균질기 용기에 달아 넣고 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화 한다. 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL와 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 정치한다. 디클로로메탄 층을 무수황산나트륨 20 g에 통과시켜 탈수한 후 다시 수용액층에 디클로로메탄 50 mL를 가하고 분배과정을 되풀이 하여 추출된 용액을 합한다. 합친 용액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 날려버리고 아세톤/헥산 혼합액 (6/94, v/v) 4 mL로 녹인다.

주. 곡류 등의 지방성 시료의 경우 위의 용매를 날려버린 잔류물에 미리 아세토니트릴로 포화시킨 헥산 30 mL를 건고물에 가하여 녹인 후 250 mL 용량의 분액깔대기에 옮기고 미리 헥산으로 포화시킨 아세토니트릴 30 mL씩으로 2회 분배 추출하여 지방을 제거한다. 2회 추출된 아세토니트릴 층을 합친 후 40℃에서 감압농축하고 잔사를 디클로로메탄 10 mL로 녹인다.

나) 정제

안지름 1.5 cm, 길이 40 cm의 유리칼럼관에 후로리실 10 g, 무수황산나트륨 약 2 g을 충전한 후 헥산 50 mL 를 가하여 상단에 소량의 헥산이 남을 정도로 유출시킨다. 여기에 위의 디클로로메탄 에 녹인 용액 10 mL(또는 아세톤/헥산혼합액(4 mL)에 녹인용액)을 가한 후 약 3 mL/min의 유속으로 흘려보낸다. 충진제 표면이 노출되기 직전 디클로로메탄 50 mL를 가하여 유출시켜 버리고, 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (4/96, v/v) 100 mL로 용출시켜 받는다. 이 용출액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하고 건고물을 아세톤 4 mL를 가하여 잘 녹인 후 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 가스크로마토그래프의 측정조건

(1) 컬럼 : DB-5 (30 m × 0.53 mm, 0.5 ㎛) 또는 이와 동등한 것

(2) 캐리어가스 및 유량 : 헬륨 15.0 mL/min

(3) 칼럼온도 : 180℃

(4) 주입구온도 : 250℃

(5) 검출기온도 : 250℃

(6) 시료주입량 : 2 μL(직접주입법)

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

이소카보포스 (5.6분) 2 ng.

라) 정량한계

0.02 mg/kg

마) 기체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : HP-5MS (30 m × 0.25 mm, 0.25 ㎛) 또는 이와 동등한 것

(2) 캐리어가스 및 유량 : 헬륨, 1.0 mL/min

(3) 칼럼온도 : 200℃

(4) 주입구온도 : 250℃

(5) 주입부 : Split mode 5:1

(6) Interface 온도 : 280℃

(7) 분자량 범위 : 100～400

(6) 시료주입량 : 1 μL

표 1. 기체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
6.0	289	121, 136, 230, 289

6) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

7) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

4.1.4.141 포메사펜(Fomesafen)

1) 시험법 적용범위

곡류, 과실 및 채소류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 디클로로메탄으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축하고 후로리실 칼럼크로마토그래피(용출용매 : 디클로로메탄/메탄올 혼합액 (15/85, v/v)으로 정제하여 액체크로마토그프로 측정한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/자외부흡광검출기(UV Detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 후로리실 (Florisil) : 잔류농약분석용 (60～100 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

라) 표준원액 : 포메사펜을 메탄올에 녹여 500 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 메탄올에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(곡류 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 ㎛를 통과하도록 분쇄한 후 25 g을 단다)를 균질기 용기에 달아 물 20 mL를 넣고 습윤화 한다. 여기에 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한 다음 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL와 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 섞은 후 정치하여 디클로로메탄 층을 취하고, 다시 디클로로메탄 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 섞은 후 정치한 다음 디클로로메탄 층을 취하여 위의 디클로로메탄과 합한다. 디클로로메탄액을 무수황산나트륨 15 g에 통과시켜 탈수하고 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하여 용매를 모두 날려버린다. 건고물에 아세토니트릴 포화 헥산 40 mL를 가하여 녹인 후 250 mL 용량의 분액깔대기에 옮긴다. 헥산 포화 아세토니트릴을 40 mL를 분액깔대기에 가하여 2분간 심하게 흔들어 섞은 후 정치한다. 분리된 아세토니트릴층을 125 mL 용량의 농축플라스크에 옮기고, 분액깔때기에 남은 헥산 용액에 다시 헥산 포화 아세토니트릴 40 mL를 가하여 위의 과정을 되풀이한다. 합친 아세토나이트릴 여액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하여 날려버리고 메탄올/디클로로메탄 혼합액 (5/95, v/v) 10 mL로 녹인다.

나) 정제

안지름 1.5 cm, 길이 40 cm의 유리칼럼관에 130℃에서 하룻밤 가열하여 탈수시킨 후로리실 10 g을 충진하고, 그 위에 무수황산나트륨 약 2 g을 충진한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 상단에 소량의 디클로로메탄이 남을 정도로 유출시킨다. 여기에 위의 메탄올/디클로로메탄 혼합액 (5/95, v/v)에 녹인 검체용액 10 mL를 가한 후 약 3 mL/min의 유속으로 흘려보낸다. 충진제 표면이 노출되기 직전 메탄올/디클로로메탄 혼합액 (5/95, v/v) 100 mL를 가하여 유출시켜 버리고, 메탄올/디클로로메탄 혼합액 (15/85, v/v) 100 mL로 용출시켜 받는다. 이 용출액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하고 건고물에 아세토니트릴 5 mL를 가하여 잘 녹이고 인산으로 pH를 3.2로 조절한 증류수 5 mL를 가하여 혼합한 후 시험용액으로 사용한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)및 이와 동등한 것

(2) 칼럼온도 : 35℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물(인산용액으로 pH를 3.2로 조절) 혼합액 (55/45, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 20 μL

(6) 검출기파장 : 290 nm

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

포메사펜 (8.5분) 20 ng.

라) 정량한계

0.04 mg/kg

마) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (100 mm × 2.0 mm, 3 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 35℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물(인산용액으로 pH를 3.2로 조절) 혼합액 (55/45, v/v)

(4) 이동상 유량 : 0.2 mL/min

(5) 시료주입량 : 5 μL

(6) 이온화 : ESI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 100 ～ 500

(8) Capillary temperature : 330℃

(9) Cone voltage : 80 V

표 1. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
6.0	439	440

7) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

8) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크 높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

4.1.4.142 디펜조쿼트(Difenzoquat)

1) 시험법 적용범위

곡류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 디펜조쿼트를 2 N 염산 용액과 아세토니트릴로 추출한 후 헥산 및 디클로로메탄/아세톤 혼합액(50/50, v/v)으로 액-액 추출하여 액체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 액체크로마토그래프-자외부흡광검출기(HPLC-UVD, High Performance Liquid Chromatograph-Ultraviolet Detector)를 사용한다.

나) 액체크로마토그래프-질량분석기(HPLC-MS, High Performance Liquid Chromatograph-Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 물 : 3차 증류수

다) 표준원액 : 디펜조쿼트 표준품을 아세토니트릴에 녹여 500 μg/mL가 되게 한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 아세토니트릴로 희석하여 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg/mL가 되도록 하여 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다.

마) 2% 인산수소이나트륨(disodium hydrogen phosphate) 용액 : 인산수소이나트륨 2 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

바) 0.01 M 1-헥산술폰산나트륨염수화물(1-hexanesulfonic acid, sodium salt hydrate) 용액 : 1-헥산술폰산나트륨염수화물 1.88 g을 물 990 mL에 녹여 0.1 M 인산을 첨가하여 pH 3으로 맞춘 다음 물을 첨가하여 1,000 mL가 되게 한다.

사) 0.005 M 암모늄아세테이트(ammonium acetate) 용액 : 암모늄아세테이트 0.39 g을 물에 녹여 1,000 mL가 되게 한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 25 g을 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고, 2 N 염산 용액 40 mL를 넣은 후 아세토니트릴 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한다. 부흐너깔때기로 흡인여과하고 잔류물을 아세토니트릴 40 mL로 씻어 상기 여액과 합하여 약 40 mL가 남을 정도까지 감압농축한 후 2% 인산수소이나트륨 용액 40 mL을 넣고 1 N 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH 6으로 맞춘다. 이를 분액깔때기에 옮겨 헥산 50 mL을 넣고 심하게 흔들어 30분간 정치하여 물층을 별도의 분액깔때기로 옮기고, 분액깔때기에 다시 헥산 50 mL을 넣고 심하게 흔들어 30분간 정치한다. 별도의 분액깔때기에 상기 물층과 디클로로메탄/아세톤 혼합액(50/50, v/v) 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 30분간 정치한다. 디클로로메탄/아세톤 혼합액층(50/50, v/v)을 무수황산나트륨 15 g에 통과시켜 탈수한 후 감압농축플라스크에 취한다. 물층에 다시 디클로로메탄/아세톤 혼합액(50/50, v/v) 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 30분간 정치한 후 디클로로메탄/아세톤(50/50, v/v) 혼합액층을 탈수하여 앞의 감압농축플라스크에 합한다. 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축하고 잔류물을 아세토니트릴 3 mL을 가하여 녹인 다음 0.01 M 1-헥산술폰산나트륨염수화물 용액 7 mL로 용해하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18(250 mm ×  4.6 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 : 0.01 M 1-헥산술폰산나트륨염수화물 혼합액/아세토니트릴(65/35, v/v)

(3) 이동상 유량 : 1 mL/min

(4) 칼럼 온도 : 40℃

(5) 검출파장 : 256 nm

(6) 주입량 : 20 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg/mL를 액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

디펜조쿼트

↓

0

4

8

12

16

20

머무름 시간(분)

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

디펜조쿼트(10.9분)

라) 정량한계

0.05 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 디펜조쿼트를 확인한다.

가) 액체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 : C18(100 mm ×  2.0 mm, 3 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 : 0.005 M 암모늄아세테이트/아세토니트릴(80/20, v/v)

(3) 이동상 유량 : 0.5 mL/min

(4) 칼럼 온도 : 40℃

(5) 캐필러리 온도 : 350℃

(6) 이온화 : ESI positive-ion mode

(7) 콘 볼테이지 : 142 V

(8) 주입량 : 5 μL

(9) 분자량 범위 : 100∼300 m/z

표 1. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
9.8	249	249

4.1.4.143 아시플루오르펜(Acifluorfen) 시험법

1) 시험법 적용범위

두류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 아시플루오르펜을 아세토니트릴로 추출하고 다시 디클로로메탄으로 액-액 추출하여 14% 삼불화붕소 메탄올 용액으로 메틸화한 후 후로리실 칼럼으로 정제하여 기체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프-전자포획검출기(GC-ECD, Gas Chromatograph -Electron Capture Detector)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프-질량분석기(GC-MS, Gas Chromatograph -Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 물 : 3차 증류수

다) 표준원액 : 아시플루오르펜 표준품을 아세톤에 녹여 500 μg/mL가 되게 한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 아세톤으로 희석하여 10 μg/mL가 되게 한 후 이 용액 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.0 mL를 마개 달린 시험관에 취하여 질소로 농축한다. 이 잔사를 □5) 시험용액의 조제 나) 메틸화□과정에 따라 실험하여 최종농도가 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.0 μg/mL가 되도록 하여 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다.

마) 0.2 M 염화암모늄(ammonium chloride) 용액 : 염화암모늄 1.07 g을 물 90 mL에 녹인 후 인산을 첨가하여 pH 2로 맞춘 다음 물을 첨가하여 100 mL가 되게 한다.

바) 2% 인산수소이나트륨(disodium hydrogen phosphate) 용액 : 인산수소이나트륨 2 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

사) 메틸화 용액 : 14% 삼불화붕소(boron trifluoride) 메탄올 용액을 사용한다.

아) 5% 황산나트륨(sodium sulfate) 용액 : 황산나트륨 5 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

자) 후로리실(Florisil) : 칼럼크로마토그래피용 후로리실(60∼100 mesh) 5 g을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식혀 사용한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 25 g을 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고, 0.2 M 염화암모늄 용액 20 mL를 넣은 후 10분간 정치한다. 아세토니트릴 100 mL를 넣은 후 3분간 균질화한다. 이를 부흐너깔때기로 흡인여과하고, 아세토니트릴 40 mL로 잔사 및 용기를 씻어 내려 상기 여액과 합한다. 이 액을 500 mL 용량의 감압농축플라스크에 옮기고 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축한 후 잔류물에 2% 인산수소이나트륨 용액 40 mL와 헥산 50 mL를 가하여 녹인 후 분액깔때기로 옮긴다. 분액깔때기를 흔들어 섞은 후 30분간 정치한 다음 물층을 취하여 2 N 염산 용액을 첨가하여 pH 2로 맞춘다. 물층에 디클로로메탄 50 mL를 첨가하여 심하게 흔들어 30분간 정치하여 디클로로메탄층을 감압농축플라스크에 취한다. 물층에 다시 디클로로메탄 50 mL를 넣고 심하게 흔들어 30분간 정치하여 디클로로메탄층을 상기 감압농축플라스크에 합한 후 40℃ 이하의 수욕상에서 약 2 mL가 남도록 감압농축한다. 잔류물을 마개 달린 시험관에 옮긴 후 아세톤 10 mL로 농축플라스크를 세척하여 합한 다음 40℃ 이하의 수욕상에서 완전히 질소로 농축한다.

나) 메틸화

위의 마개 달린 시험관에 메탄올 1 mL를 넣어 잔류물을 녹인 후 14% 삼불화붕소 메탄올 용액 1 mL를 첨가한 다음 마개를 닫고 80℃의 수욕상에서 20분간 반응시킨다. 여기에 5% 황산나트륨 용액 10 mL를 첨가하여 반응을 끝내고 분액깔때기로 옮긴 후 벤젠/헥산 혼합액(40/60, v/v) 10 mL를 넣고 심하게 흔들어 30분간 정치하여 상층인 벤젠/헥산 혼합액(40/60, v/v)층을 취한다.

다) 정제

안지름 11 mm, 길이 400 mm의 유리칼럼에 후로리실 5 g과 무수황산나트륨 2 g을 차례로 충전한 후 헥산 25 mL를 넣고 무수황산나트륨 상단에 소량의 헥산이 남을 정도까지 유출시킨다. 이 칼럼에 상기 벤젠/헥산 혼합액(40/60, v/v) 10 mL를 넣고 유출시킨다. 무수황산나트륨 상단이 노출되기 직전에 에틸아세테이트/헥산 혼합액(10/90, v/v) 50 mL로 용출시켜 감압농축플라스크에 받는다. 이 용출액을 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축한 후 잔류물을 벤젠/헥산 혼합액(40/60, v/v) 10 mL로 용해하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5(30 m ×  0.25 mm, 0.5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : N2, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 260℃

(4) 오븐 온도 : 210℃

(5) 검출기 온도 : 280℃

(6) 주입모드 : split mode(10:1)

(7) 주입량 : 1 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.0 μg/mL를 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램:

아시플루오르펜 메틸 에스터(12.6분)

라) 정량한계

0.02 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

기체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 아시플루오르펜을 확인한다.

가) 기체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 :	DB-5ms(30 m ×  0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 250℃

(4) 오븐 온도 : 150℃에서 시험용액을 주입한 후 3분간 유지하고  15℃/min의 비율로 210℃까지 온도를 상승시켜 10분간 유지한다.

(5) 인터페이스 온도 : 280℃

(6) 이온원 온도 : 230℃

(7) 사중극자 온도 : 150℃

(8) 주입모드 : splitless mode

(9) 주입량 : 1 μL

(10) 분자량 범위 : 100∼400 m/z

표 1. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
13.9	375	375, 223, 344

(주. 분자량은 아시플루오르펜이 메틸화 된 아시플루오르펜 메틸 에스터의 분자량임)

4.1.4.144 티오설탑(Thiosultap) 시험법

1) 시험법 적용범위

곡류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 티오설탑을 2% 시스테인 용액, 3% 염화니켈 용액 및 암모니아수를 사용하여 네레이스톡신으로 전환시켜 헥산 및 에틸아세테이트로 액-액 추출하여 기체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프-불꽃광도검출기(GC-FPD, Gas Chromatograph -Flame Photometric Detector, 황용 간섭필터, 파장 394 nm)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프-질량분석기(GC-MS, Gas Chromatograph -Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 물 : 3차 증류수

다) 표준원액 : 옥살산수소 네레이스톡신(nereistoxin hydrogen oxalate) 표준품을 메탄올에 녹여 네레이스톡신(nereistoxin)으로서 500 μg/mL가 되게 한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 메탄올로 희석하여 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg/mL가 되게 한 후 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다. 단, 환산계수 2.1[티오설탑의 분자량(309)/네레이스톡신 분자량(149)]을 곱하여 티오설탑(thiosultap)으로 환산한다.

마) 2% 시스테인(cysteine) 용액 : 무수염산시스테인  (L-cysteine-HCl, anhydrous) 20 g을 0.02 N 염산 용액 950 mL에 녹인 후 10 N 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH 4로 맞춘 다음 0.02 N 염산용액을 첨가하여 1,000 mL가 되게 한다.

바) 3% 염화니켈(nickel chloride) 용액 : 염화니켈 3 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 25 g을 정밀히 달아 250 mL 폴리프로필렌 원심분리기용 튜브에 넣고 2% 시스테인 용액 150 mL를 넣은 후 30분간 진탕 추출한다. 이를 9900 G, 4℃에서 10분간 원심분리한 후 상등액 120 mL를 별도의 250 mL 폴리프로필렌 원심분리기용 튜브에 취한다. 여기에 3% 염화니켈 용액과 진한 암모니아수를 각각 4 mL씩 첨가한 다음 5분간 진탕한 후 70℃ 수욕상에서 1시간 동안 진탕 반응시킨다. 반응이 끝난 추출액을 냉각시킨 다음 10 N 황산 용액을 첨가하면서 pH 5로 맞춘 후 헥산 50 mL를 가하여 진탕한다. 이를 9900 G, 4℃에서 10분간 원심분리한 후 상등액을 버린 다음 10 N 수산화나트륨 용액을 첨가하면서 pH 9로 맞춘다. 여기에 염화나트륨 12 g과 에틸아세테이트 100 mL를 가한 후 진탕하고, 다시 7600 G, 4℃에서 10분간 원심분리한 다음 상등액(에틸아세테이트 층) 80 mL를 감압농축플라스크에 취하여 40℃ 수욕상에서 감압농축한 후 잔류물을 메탄올 2 mL로 용해하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5(30 m ×  0.53 mm, 0.5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 15 mL/min

(3) 주입부 온도 : 250℃

(4) 오븐 온도 : 100℃

(5) 검출기 온도 : 250℃

(6) 주입모드 : splitless mode

(7) 주입량 : 2 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg/mL를 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

머무름 시간(분)

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

네레이스톡신(4.9분)

라) 정량한계

0.05 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

기체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 네레이스톡신을 확인한다.

가) 기체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5ms(30 m ×  0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 250℃

(4) 오븐 온도 : 70℃에서 시험용액을 주입한 후 2분간 유지하고 10℃/min의 비율로 150℃까지 온도를 상승시켜 5분간 유지한다.

(5) 인터페이스 온도 : 280℃

(6) 이온원 온도 : 230℃

(7) 사중극자 온도 : 150℃

(8) 주입모드 : splitless mode

(9) 주입량 : 2 μL

(10) 분자량 범위 : 50∼200 m/z

표 1. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
8.9	149	149, 70, 103

(주. 분자량은 티오설탑이 전환 된 네레이스톡신의 분자량임)

4.1.4.145 이소펜포스-메틸(Isofenphos-methyl)

1) 시험법 적용범위

곡류, 두류, 채소류 및 과실류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 이소펜포스-메틸을 아세토니트릴로 추출한 후 후로리실 카트리지로 정제하여 기체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프-질소 ․ 인 검출기(GC-NPD, Gas Chromatograph -Nitrogen Phosphorous Detector)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프-질량분석기(GC-MS, Gas Chromatograph -Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 물 : 3차 증류수

다) 표준원액 : 이소펜포스-메틸 표준품을 아세톤에 녹여 500 μg/mL가 되게 한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v)으로 희석하여 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 1.0, 2.0 μg/mL가 되도록 하여 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다.

마) 후로리실(Florisil) 카트리지 : 후로리실 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지(500 mg, 6 cc)를 사용한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 25 g을 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고, 물 20 mL를 넣은 후 혼합하여 2시간 정치한다. 다시 아세토니트릴 100 mL를 넣은 후 3분간 균질화한 다음 이를 부흐너깔때기로 흡인여과하고, 아세토니트릴 40 mL로 잔사 및 용기를 씻어 내려 상기 여액과 합한다. 여액을 염화나트륨 15 g이 들어있는 분액깔때기에 옮긴 후 분액깔때기를 심하게 흔들어 1시간 정치한 다음 아세토니트릴층을 감압농축플라스크에 취하여 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축한다. 잔류물을 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v) 4 mL를 가하여 용해한다.

나) 정제

후로리실 카트리지에 헥산 5 mL를 넣고 고정상 상단에 소량의 헥산이 남을 정도까지 유출시킨다. 이 카트리지에 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v) 5 mL를 넣고 유출시킨다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 ‘가) 추출’로부터 얻은 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v) 4 mL를 컬럼에 가하여 15 mL 시험관에 받는다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v) 5 mL를 용출시켜 상기 시험관에 합한다. 이 용출액을 40℃ 이하 수욕상에서 일정량이 남도록 감압농축한 후 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v)을 가하여 최종 부피가 5 mL가 되도록 하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-17(30 m × 0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : N2, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 260℃

(4) 오븐 온도 : 80℃에서 시험용액을 주입한 후 2분간 유지하고 10℃/min의 비율로 270℃까지 승온하여 15분간 유지한다.

(5) 검출기 온도 : 280℃

(6) 주입모드 : splitless mode

(7) 주입량 : 1 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 1.0, 2.0 μg/mL를 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

머무름 시간(분)

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

이소펜포스-메틸(20.0분)

라) 정량한계

0.02 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

기체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 이소펜포스-메틸을 확인한다.

가) 기체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5ms(30 m × 0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 250℃

(4) 오븐 온도 : 80℃에서 시험용액을 주입한 후 2분간 유지하고 10℃/min의 비율로 270℃까지 승온하여 15분간 유지한다.

(5) 인터페이스 온도 : 280℃

(6) 이온원 온도 : 230℃

(7) 사중극자 온도 : 150℃

(8) 주입모드 : splitless mode

(9) 주입량 : 1 μL

(10) 분자량 범위 : 100∼350 m/z

표 1. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
16.8	331	199, 121, 241

4.1.4.146 클로로피크린(Chloropicrin)

1) 시험법 적용범위

곡류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 클로로피크린을 에틸아세테이트로 추출하여 기체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프-전자포획검출기(GC-ECD, Gas Chromatograph -Electron Capture Detector)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프-질량분석기(GC-MS, Gas Chromatograph -Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 표준원액 : 클로로피크린 표준품을 아세톤에 녹여 500 μg/mL가 되게 한다.

다) 표준용액 : 표준원액을 에틸아세테이트로 희석하여 0.005, 0.01, 0.02, 0.05, 0.1, 0.5 μg/mL가 되도록 하여 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 5 g을 정밀히 달아 무수황산나트륨 2 g이 들어있는 20 mL 헤드스페이스 바이알에 넣는다. 에틸아세테이트 10 mL를 첨가한 후 헤드스페이스 바이알용 마개로 밀봉한다. 바이알을 10분간 심하게 흔들어 5분간 정치한 다음 주사기로 상층액 약 3 mL를 취한다. 이 추출액을 멤브레인 필터로 여과하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5(30 m × 0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : N2, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 200℃

(4) 오븐 온도 : 40℃에서 시험용액을 주입한 후 10분간 유지하고 20℃/min의 비율로 200℃까지 승온하여 2분간 유지한다.

(5) 검출기 온도 : 280℃

(6) 주입모드 : split mode(10:1)

(7) 주입량 : 1 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.005, 0.01, 0.02, 0.05, 0.1, 0.5 μg/mL를 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

클로로피크린

↓

머무름 시간(분)

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

클로로피크린(7.4분)

라) 정량한계

0.01 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

기체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 클로로피크린을 확인한다.

가) 기체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5ms(30 m × 0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 200℃

(4) 오븐 온도 : 40℃에서 시험용액을 주입한 후 10분간 유지하고 20℃/min의 비율로 200℃까지 승온하여 2분간 유지한다.

(5) 인터페이스 온도 : 280℃

(6) 이온원 온도 : 230℃

(7) 사중극자 온도 : 150℃

(8) 주입모드 : splitless mode

(9) 주입량 : 1 μL

(10) 분자량 범위 : 50∼200 m/z

표 1. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
4.5	164	117, 121, 82

제 10, 8.1.5 중 표 1 및 표 2를 각각 다음과 같이 한다.

표 1. 유전자재조합 콩의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	콩 (118 bp)	Le1n02-5' Le1n02-3' Le1-Taq	5'-GCC CTC TAC TCC ACC CCC A-3' 5'-GCC CAT CTG CAA GCC TTT TT-3' 5'-FAM-AGC TTC GCC GCT TCC TTC AAC TTC AC-TAMRA-3'
스크 리닝	CaMV p35S (101 bp) tNOS (151 bp)	P35S 1-5' P35S 1-3' P35S-Taq NOS ter 2-5' NOS ter 2-3' NOS-Taq	5'-ATT GAT GTG ATA TCT CCA CTG ACG T-3' 5'-CCT CTC CAA ATG AAA TGA ACT TCC T-3' 5'-FAM-CCC ACT ATC CTT CGC AAG ACC CTT CCT-TAMRA-3' 5'-GTC TTG CGA TGA TTA TCA TAT AAT TTC TG-3' 5'-CGC TAT ATT TTG TTT TCT ATC GCG T-3' 5'-FAM-AGA TGG GTT TTT ATG ATT AGA GTC CCG CAA-TAMRA-3'

구조 유전자	RRS (121 bp) MON89788 (139 bp) A2704-12 (64 bp) DP356043-5 (145 bp) DP305423-1 (149 bp)	RRS 01-5' RRS 01-3' RRS-Taq MON89788-5' MON89788-3' MON89788-Taq KVM175-5' SMO001-3' A2704-12-Taq DP356043-5-5' DP356043-5-3' DP305 f7-5' DP305 r7-3'	5'-CCT TTA GGA TTT CAG CAT CAG TGG-3' 5'-GAC TTG TCG CCG GGA ATG-3' 5'-FAM-CGC AAC CGC CCG CAA ATC C-TAMRA -3' 5'-TCC CGC TCT AGC GCT TCA AT-3' 5'-TCG AGC AGG ACC TGC AGA A-3' 5'-FAM-CTG AAG GCG GGA AAC GAC AAT CTG-TAMRA-3' 5'-GCA AAA AAG CGG TTA GCT CCT-3' 5'-ATT CAG GCT GCG CAA CTG TT-3' 5'-FAM-CGG TCC TCC GAT CGC CCT TCC-TAMRA-3' 5'-CTT TTG CCC GAG GTC GTT AG-3' 5'-GCC CTT TGG TCT TCT GAG ACT G-3' 5'-CCC GTG TTC TCT TTT TGG CTA-3' 5'-TGA ATT TCT AAC CTG GCT GCT ATA GTT-3'

표 2. 유전자재조합 옥수수의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	옥수수 (151 bp) 옥수수 (114 bp)	SSllb 1-5' SSllb 1-3' SSllb-Taq SSllb 3-5' SSllb 3-3' SSllb-Taq	5'-CTC CCA ATC CTT TGA CAT CTG C-3' 5'-TCG ATT TCT CTC TTG GTG ACA GG-3' 5'-FAM-AGC AAA GTC AGA GCG CTG CAA TGC A -TAMRA-3' 5'-CCA ATC CTT TGA CAT CTG CTC C-3' 5'-GAT CAG CTT TGG GTC CGG A-3' 5'-FAM-AGC AAA GTC AGA GCG CTG CAA TGC A -TAMRA-3'
스크 리닝	CaMV p35S (101 bp) tNOS (151 bp)	P35S 1-5' P35S 1-3' P35S-Taq NOS ter 2-5' NOS ter 2-3' NOS-Taq	5'-ATT GAT GTG ATA TCT CCA CTG ACG T-3' 5'-CCT CTC CAA ATG AAA TGA ACT TCC T-3' 5'-FAM-CCC ACT ATC CTT CGC AAG ACC CTT CCT-TAMRA-3' 5'-GTC TTG CGA TGA TTA TCA TAT AAT TTC TG-3' 5'-CGC TAT ATT TTG TTT TCT ATC GCG T-3' 5'-FAM-AGA TGG GTT TTT ATG ATT AGA GTC CCG CAA-TAMRA-3'
구조 유전자	Bt176 (100 bp) Bt11 (127 bp) GA21 (133 bp) T25 (149 bp) MON810 (113 bp) NK603 (143 bp) TC1507 (103 bp) MON863 (152 bp) DAS59122-7 (141 bp) MON88017 (100 bp) MIR604 (142 bp) MON89034 (112 bp) MIR162 (149 bp) DP098140-6 (147 bp)	Bt176 2-5' Bt176 2-3' Bt176-Taq Bt11 3-5' Bt11 3-3' Bt11-Taq GA21 3-5' GA21 3-3' GA21-Taq T25 1-5' T25 1-3' T25-Taq M810 2-5' M810 2-3' M810-Taq NK603 01-5' NK603 01-3' TC1507 01-5' TC1507 01-3' tahsp17-5‘ MON 3-3‘ DAS 5-5‘ Pubi-3‘ MON88017-G-5' MON88017-G-3‘ MIR604-CJB264-5' MIR604es-LB-R-3' MON89034-5' MON89034-3' MON89034-Taq FE02402-5' FE01004-3' DP098140-6-5' DP098140-6-3'	5'-TGT TCA CCA GCA GCA ACC AG-3' 5'-ACT CCA CTT TGT GCA GAA CAG ATC T-3' 5'-FAM-CCG ACG TGA CCG ACT ACC ACA TCG A-TAMRA-3' 5'-AAA AGA CCA CAA CAA GCC GC-3' 5'-CAA TGC GTT CTC CAC CAA GTA CT-3' 5'-FAM-CGA CCA TGG ACA ACA ACC CAA ACA TCA-TAMRA-3' 5'-GAA GCC TCG GCA ACG TCA-3' 5'-ATC CGG TTG GAA AGC GAC TT-3' 5'-FAM-AAG GAT CCG GTG CAT GGC CG -TAMRA-3' 5'-GCC AGT TAG GCC AGT TAC CCA-3' 5'-TGA GCG AAA CCC TAT AAG AAC CCT-3' 5'-FAM-TGC AGG CAT GCC CGC TGA AAT C- TAMRA-3' 5'-GAT GCC TTC TCC CTA GTG TTG A-3' 5'-GGA TGC ACT CGT TGA TGT TTG-3' 5'-FAM-AGA TAC CAA GCG GCC ATG GAC AAC AA-TAMRA-3' 5'-TAT CTT GCT CGA TGC CTT CTC C-3' 5'-ACA CCA TTG CAG ATT CTG CTA ACT-3' 5'-GCT TCA ACA GGG CTG AGT TTG-3' 5'-CCC CAC ACA GTT TGG GAT CTA-3' 5'-GTG TTT TTT GGA TCC CCG G-3' 5'-CCA TCA TGG TTG GTT GGA CTT-3' 5'-GCA CCT GTG ATT GGC TCA TAA A-3' 5'-CTC CCT TAA TTC TCC GCT CAT G-3' 5'-GCT AGC TTG ATG GGG ATC AGA TTG-3' 5'-GAT TGG TTT GTT TTC GGC AGT ATG-3' 5'-TCG CGC GCG GTG TCA TCT ATG-3' 5'-CGC GAC ACA CCT CGT TAG TTA A-3' 5'-CTC CAT ATT GAC CAT CAT ACT C-3' 5'-GGG TTG AAA TGA AAT TTC CAA TAC-3' 5'-FAM-ATC CCC GGA AAT TAT GTT-MGBNFQ-3' 5'-GTG GAC TGA AAG GAG ACT TTG TTT ATC-3' 5'-GAT TGT CGT TTC CCG CCT TCA GTT-3' 5'-TCT CTT TGC TTG GTC TTT CTC TAT CGA-3' 5'-CCA AAC GTA AAA CGG CTT GTC C-3'

제 10, 8.1.5 중 4)를 다음과 같이 한다.

4) 시험조작(PCR)

각 추출 DNA에 대한 PCR은 2회의 확인시험으로 나누어 아래의 방법으로 실시하며, 1차 확인시험에서는 내재유전자와 전사개시인자(promoter 35S) 및/또는 전사종결인자(NOS terminator)에 대한 프라이머로 PCR을 실시한다. 그 결과 2 반복 추출 DNA 중 내재성 유전자 특이 PCR 산물이 확인된 DNA에서의 35S 프로모터와 NOS 터미네이터의 검출 결과에 따라 다음의 유전자재조합 이벤트에 대한 2차 확인시험을 실시한다.

① 35S 프로모터와 NOS 터미네이터 특이 PCR 산물이 모두 확인된 경우: RRS, MON89788, A2704-12, DP356043-5, DP305423-1,  Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, GA21, MON88017, MIR604, MON89034, MIR162, DP098140-6

② 35S 프로모터 특이 PCR 산물만 확인된 경우: MON89788, A2704-12, DP356043-5, DP305423-1, Bt176, T25, MON810, TC1507, DAS59122-7, DP098140-6

③ NOS 터미네이터 특이 PCR 산물만 확인된 경우: MON89788, DP356043-5, DP305423-1, GA21, MIR604, MIR162, DP098140-6

④ 35S 프로모터와 NOS 터미네이터 특이 PCR 산물이 모두 확인되지 않은 경우: MON89788, DP356043-5, DP305423-1, DP098140-6

제 10, 8.1.5, 6) 중 다)를 다음과 같이 한다.

다) 유전자재조합 이벤트 중 35S 프로모터를 사용하는 것으로는 RRS, Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, MON88017, A2704-12, MON89034가 있으며, NOS 터미네이터를 사용하는 것으로는 RRS, Bt11, GA21, NK603, MON863, MON88017, MIR604, MON89034, MIR162가 있다.

제 10, 8.1.11, 2) 중 나)를 다음과 같이 한다.

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 9의 프라이머와 프로브를 사용하면서 PCR 반응액의 총량을 25 μL로 할 경우 조성은 표 10, 11, 12, 13, 14와 같다. 다만, PCR 반응액 조성은 프라이머와 프로브 또는 Real-Time PCR 기기에 따라 다를 수 있으므로 시약이나 기기의 사용 매뉴얼을 참고하여 적용한다. 각 PCR 반응 시에는 음성대조군으로서 주형 DNA 대신 멸균증류수를 사용한 것(NTC, no template control)을, 양성대조군으로 비유전자재조합(non-GMO) DNA를 함유한 것(동일 작물로서 0%(w/w) 표준시료에서 추출한 DNA 등)과 검출하고자 하는 재조합 DNA를 함유한 것(동일 작물로서 분석 대상 GMO를 포함하는 표준시료에서 추출한 DNA 등)을 시료와 함께 PCR 시험을 한다. PCR에서 생길 수 있는 오차를 감소시키기 위해 하나의 DNA 시료액에 대하여 3 반복 시험(3 웰 분량의 PCR 반응액을 잉여분을 고려하여 한번에 조제하여 동일 플레이트에서 시험)을 실시하여 측정한다.

제 10, 8.1.11 중 표 9 및 표 14를 각각 다음과 같이 하고, “표 14”부터 “표 16”까지를 “표 15”부터 “표 17”까지로 한다.

표 9. 유전자재조합 면화의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	면화 (76 bp)	acp1 primer1-5' acp1 primer2-3' acp1 probe-Taq	5'-ATT GTG ATG GGA CTT GAG GAA GA-3' 5'-CTT GAA CAG TTG TGA TGG ATT GTG-3' 5'-FAM-ATT GTC CTC TTC CAC CGT GAT TCC GAA -TAMRA-3'
구조유전자	531* (72 bp)	531 primer1-5' 531 primer2-3' 531 probe-Taq	5'-TCC CAT TCG AGT TTC TCA CGT-3' 5'-AAC CAA TGC CAC CCC ACT GA-3' 5'-FAM-TTG TCC CTC CAC TTC TTC TC-TAMRA-3'
	1445 (87 bp)	1445 primer1-5' 1445 primer2-3' 1445 probe-Taq	5'-GGA GTA AGA CGA TTC AGA TCA AAC AC-3' 5'-ATC GAC CTG CAG CCC AAG CT-3' 5'-FAM-ATC AGA TTG TCG TTT CCC GCC TTC AGT TT -TAMRA-3'
	15985 (82 bp)	15985 primer1-5' 15985 primer2-3' 15985 probe-Taq	5'-GTT ACT AGA TCG GGG ATA TCC-3' 5'-AAG GTT GCT AAA TGG ATG GGA-3' 5'-FAM-CCG CTC TAG AAC TAG TGG ATC TGC ACT GAA-TAMRA-3'
	Mon88913 (94 bp)	Mon88913 primer1-5' Mon88913 primer2-3' Mon88913 probe-Taq	5'-GGC TTT GGC TAC CTT AAG AGA GTC-3' 5'-CAA ATT ACC CAT TAA GTA GCC AAA TTA C-3' 5'-FAM-AAC TAT CAG TGT TTG ACT ACA T- MGBNFQ**-3'
	LLCotton25 (79 bp)	KVM156 1-5' KVM155 2-3' TM018 probe-Taq	5'-CAA GGA ACT ATT CAA CTG AG-3' 5'-CAG ATT TTT GTG GGA TTG GAA TTC-3' 5'-FAM-CTT AAC AGT ACT CGG CCG TCG ACC GC -TAMRA-3'
	281/3006 (111 bp)	281 f1-5' 281 r2-3' 281s2 probe-Taq	5'-CTC ATT GCT GAT CCA TGT AGA TTT C-3' 5'-GGA CAA TGC TGG GCT TTG TG-3' 5'-FAM-TTG GGT TAA TAA AGT CAG ATT AGA GGG AGA CAA -TAMRA-3'
	GHB614 (120 bp)	SHA007-5‘ SHA007-3' TM072-Taq	5'-CAA ATA CAC TTG GAA CGA CTT CGT-3' 5'-GCA GGC ATG CAA GCT TTT AAA-3' 5'-FAM-CTC CAT GGC GAT CGC TAC GTT CTA GAA TT-TAMRA-3'

* 면화 531 검출용 PCR 검사 결과 양성인 경우 별도로 15985 PCR 검사 결과를 확인하여 15985 양성인 경우 “15985 검출”로 판정하고 15985 음성인 경우 “531 검출”로 판정한다.

** MGBNFQ : Minor groove binding non-fluorescent quencher

표 14. 면화의 내재성 유전자와 면화 GHB614 검사용 PCR 반응액 조성

성 분	최종 농도(well)	1회 분량(μL)
Universal Master Mix (2 X)	1 X	12.5
프라이머(각 10 μM)	각 400 nM	각 1
Probe (10 μM)	200 nM	0.5
주형 DNA(50 ng/μL)	100 ng	2
멸균증류수	반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가	8
전체량		25

제 10, 8.1.12 중 “표 17”부터 “표 21”까지를 “표 18”부터 “표 22”까지로 한다.

제 10, 8.1.13 중 “표 22”부터 “표 29”까지를 “표 23”부터 “표 30”까지로 한다.

별표 1, 1. 중 180을 삭제하고, 181부터 298까지를 180부터 297까지로 한다.

별표 2, 1. 중 29부터 56까지를 30부터 57까지로 하고, 29를 다음과 같이 한다.

	품목명	이명 또는 영명	학명	사용부위	사용조건
29	아마	-	Linum usitatissimum	열처리한 씨	일일섭취량이 16g을 초과하지 않아야 하며, 제품별 12% 미만, 1회 섭취량은 4g을 초과하지 않도록 사용해야 한다.

부  칙(2011.  .  )

제1조(시행일) 이 고시는 고시한 날부터 시행한다. 다만, 제 2. 5. 5)의 개정규정은 2012년 1월 1일부터 시행한다.

제2조(다른 고시의 폐지) 이 고시 시행과 함께 식품의약품안전청장이 고시한 「식품등 중 기준규격미설정 물질의 시험방법」은 폐지한다.

제3조(재검토기한) 「훈령ㆍ예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정」(대통령훈령 제248호)에 따라 이 고시 발령 후의 법령이나 현실여건의 변화 등을 검토하여 이 고시를 폐지하거나 개정 등의 조치를 하여야 하는 기한은 2014년  월   일까지로 한다.

제4조(경과조치) 이 고시 시행 당시 검사가 접수되어 진행 중인 사항에 대하여는 종전의 규정을 적용한다.

신․ 구조문 대비표

현  행

개  정 안

제 1. (생략)

제 2. (생략)

1. ∼ 4. (생략)

5. 식품일반의 기준 및 규격

1) ～ 3 (생략)

4) 식중독균

식육(제조, 가공용원료는 제외한다), 살균 또는 멸균처리하였거나 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품에서는 특성에 따라 살모넬라(Salmonella spp.), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens), 리스테리아 모노사이토제네스(Listeria monocytogenes), 대장균 O157:H7(Escherichia coli O157:H7), 캠필로박터 제주니(Campylobacter jejuni), 여시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 등 식중독균이 검출되어서는 아니되며, 또한 식육 및 식육제품에 있어서는 결핵균, 탄저균, 브루셀라균이 검출되어서는 아니 된다. 다만, ‘제 5. 식품별 기준 및 규격’에서 식중독균에 대한 규격이 정하여진 식품에는 해당식품의 규격을 적용하며, 그 외의 가공식품 중 바실러스 세레우스(Bacillus cereus)는 다음과 같이 적용한다.

(1) 장류(메주 제외) 및 소스류, 복합조미식품, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품 : g 당 10,000 이하(단 멸균제품은 음성이어야 한다)

(2) 위 (1) 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : g 당 1,000 이하(단 멸균제품은 음성이어야 한다).

5) 중금속 기준

(1) ～ (2) (생략)

(3) 농산물 중 중금속 기준

번호	대상식품	납(mg/kg)	카드뮴(mg/kg)
1	감	0.1 이하	-
2	감자	0.1 이하	0.1 이하
3	고구마	0.1 이하	0.1 이하
4	고추	0.2 이하	0.1 이하
5	당근	0.1 이하	0.1 이하
6	대두	0.2 이하	0.1 이하
7	마늘	0.1 이하	0.1 이하
8	망고	0.1 이하	-
9	무	0.1 이하	0.1 이하
10	밀	0.2 이하	0.2 이하
11	바나나	0.1 이하	-
12	배추	0.3 이하	0.2 이하
13	부추	0.1 이하	0.05 이하
14	시금치	0.3 이하	0.2 이하
15	쌀(현미 제외)	0.2 이하	0.2 이하
16	양파	0.1 이하	0.05 이하
17	오렌지	0.1 이하	-
18	오이	0.1 이하	0.05 이하
19	옥수수	0.2 이하	0.1 이하
20	참깨	0.3 이하	0.2 이하
21	키위	0.1 이하	-
22	파	0.1 이하	0.05 이하
23	팥	0.2 이하	0.1 이하
24	포도	0.2 이하	-

(4) (생략)

(5) 축산물 중 중금속 허용기준

대상식품	납(mg/kg)	카드뮴(mg/kg)
가금류고기	(생략)
돼지간	(생략)
돼지고기	(생략)
돼지신장	(생략)
소간	(생략)
소고기	(생략)
소신장	(생략)
<신설>

(6) (생략)

6) (생략)

7) 방사능 기준

핵 종	대 상 식 품	기 준 (Bq/Kg, L)
131I	<신설>	<신설>
	유 및 유가공품	150
	기타 식품	300
134Cs + 137Cs	(생략)	(생략)

< 신설>

8) 곰팡이독소 기준

(1) ～ (5) (생략)

(6) 데옥시니발레놀(Deoxynivalenol)

대 상 식 품	기준 (mg/kg)
곡류 및 그 단순가공품 (옥수수 및 그 단순가공품 제외)	(생략)
옥수수 및 그 단순가공품	(생략)
시리얼류	(생략)
<신설>

(7) 제랄레논(Zearalenone)

대 상 식 품	기준 (μg/kg)
곡류 및 그 단순가공품	(생략)
과자	(생략)
<신설>

9) ～ 11) (생략)

12) 기타 유해물질 기준

(1) ～(3) (생략)

(4) 벤조피렌

(5)3-MCPD(3-Monochloropropane-1,2-diol)

기준

(6) 멜라민(Melamine) 기준

13) ～ 16) (생략)

6. (생략)

제 3. ～ 제 4. (생략)

제 5. 식품별 기준 및 규격

1. 과자류

1) ～ 4) (생략)

5) 규격

(1) ~ (11) (생략)

<신설>

6) (생략)

2. ~ 3. (생략)

4. 잼류

1) ～ 4) (생략)

5) 규격

(1) ~ (2) (생략)

<신설>

6) (생략)

5. ~ 13. (생략)

14. 식용유지류

1) ～ 4) (생략)

5) 규격

유형 항목	콩기름	옥수수기름	채종유	미강유
(1) 산가	(생략)
(2) 요오드가	(생략)
<신설>
<신설>

유형 항목	참기름	추출 참깨유	들기름	추출들깨유
(1) 산가	(생략)
(2) 요오드가	(생략)
(3)산화방지제 (g/kg)	(생략)
(4) 리놀렌산(%)*	(생략)
(5) 에루스산(%)	(생략)
<신설>
<신설>

* (생략)

유형 항목	홍화유	고올레산 홍화유	해바라기유	고올레산 해바라 기유
(1) 산가	(생략)
(2) 요오드가	(생략)
<신설>
<신설>

유 형 항 목	목화씨기름	목화씨샐러드유	목화씨스테아린유
(1) 산가	(생략)
(2) 요오드가	(생략)
(3) 냉각시험	(생략)
<신설>
<신설>

유형 항목	땅콩기름	정제땅콩기름
(1) 산가	(생략)
(2) 요오드가	(생략)
(3) 산화방지제(g/kg)	(생략)
<신설>
<신설>

유형 항목	압착올리브유	정제올리브유	혼합올리브유
(1) 산가	(생략)
(2) 요오드가	(생략)
<신설>
<신설>

유형 항목	팜유	팜올레인유	팜스테아린유	팜핵유
(1) 산가	(생략)
(2) 과산화물가	(생략)
(3) 요오드가	(생략)
<신설>
<신설>

유형 항목	야자유	혼합식용유	가공유지
(1) 산가	(생략)
(2) 과산화물가	(생략)
(3) 요오드가	(생략)
(4) 산화방지제 (g/kg)	(생략)
<신설>
<신설>

유형 항목	쇼트닝	마가린	저지방마가린 (지방스프레드)
(1) 조지방 (%)	(생략)
(2) 산가	(생략)
(3) 타르색소	(생략)
(4) 산화방지제 (g/kg)	(생략)
(5) 보존료 (g/kg)	(생략)
<신설>
<신설>

유형 항목	압착고추씨기름	고추씨 기름	향미유
(1) 산가	(생략)
(2) 요오드가	(생략)
(3) 타르색소	(생략)
<신설>
<신설>

유형 항목	기타 식용유지
(1) 산가	(생략)
(2) 산화방지제 (g/kg)	(생략)
<신설>
<신설>

15. ～ 17. (생략)

18. 음료류

18-1 ～ 18-5 (생략)

18-6 기타음료

1) ～ 3) (생략)

4) 식품유형

(1) 혼합음료

먹는 물에 식품 또는 식품첨가물을 가한 것을 말한다.

(2) ～ (3) (생략)

5) ～ 6) (생략)

19.～ 29.(생략)

제 6. ～ 제 9.(생략)

제 10. 일반시험법

1.～ 3. (생략)

4. 식품 중 잔류농약 분석법

4.1 식품일반

4.1.1.1～ 4.1.3.28 (생략)

< 신설 >

4.1.4 단성분분석법

4.1.4.1 ～ 4.1.4.139 (생략)

< 신설 >

<신설>

<신설>

<신설>

<신설>

<신설>

<신설>

5.～7. (생략)

8. 식품표시 관련 시험법

8.1 유전자재조합식품의 시험법

8.1.1 ∼ 8.1.4 (생략)

8.1.5 정성시험

1) ∼ 3) (생략)

표 1. 유전자재조합 콩의 PCR검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	(생략)	(생략)	(생략)
스크 리닝	(생략)	(생략)	(생략)
구조 유전자	(생략) <신설> <신설>	(생략) <신설> <신설>	(생략) <신설> <신설>

표 2. 유전자재조합 옥수수의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	품 종 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성유전자	(생략)	(생략)	(생략)
스크리닝	(생략)	(생략)	(생략)
구조유전자	(생략) <신설> <신설>	(생략) <신설> <신설>	(생략) <신설> <신설>

표 3. ～표 4. (생략)

4) 시험조작(PCR)

(생략)

① 35S 프로모터와 NOS 터미네이터 특이 PCR 산물이 모두 확인된 경우: RRS, Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, GA21, MON88017, MIR604, MON89034

② 35S 프로모터 특이 PCR 산물만 확인된 경우: Bt176, T25, MON810, TC1507, DAS59122-7, A2704-12

③ NOS 터미네이터 특이 PCR 산물만 확인된 경우: GA21, MIR604

④ 35S 프로모터와 NOS 터미네이터 특이 PCR 산물이 모두 확인되지 않은 경우: MON89788

가) ∼ 다) (생략)

5) (생략)

6) 분석 결과의 판정 및 처리

가) ∼ 나) (생략)

다) 유전자재조합 이벤트 중 35S 프로모터를 사용하는 것으로는 RRS, Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, MON88017, A2704-12, MON89034가 있으며, NOS 터미네이터를 사용하는 것으로는 RRS, Bt11, GA21, NK603, MON863, MON88017, MIR604, MON89034가 있다.

라) (생략)

8.1.6 ∼ 8.1.10 (생략)

8.1.11 유전자재조합 면화

1) (생략)

2) 시약 및 시액

가) (생략)

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 9의 프라이머와 프로브를 사용하면서 PCR 반응액의 총량을 25 μL로 할 경우 조성은 표 10, 11, 12, 13과 같다.

(생략)

표 9. 유전자재조합 면화의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와  프로브

목적	품 종 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	(생략)	(생략)	(생략)
구조유전자	(생략)	(생략)	(생략)
	(생략)	(생략)	(생략)
	(생략)	(생략)	(생략)
	(생략)	(생략)	(생략)
	(생략)	(생략)	(생략)
	(생략) <신설>	(생략) <신설>	(생략) <신설>

* (생략)

** (생략)

표 10. ∼ 표 13. (생략)

<신설>

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석

(생략)

96 웰 플레이트 방식의 PCR 반응 조건은 표 14, 15와 같으며, PCR 반응 종료 후 실험결과를 해석한다.

(생략)

표 14. (생략)

표 15. (생략)

4) 분석결과의 판정

(생략)

반복시험에서도 동일한 결과인 경우 ‘검사불능’으로 판정한다(표 16).

표 16. (생략)

8.1.12 유전자재조합 카놀라

1) (생략)

2) 시약 및 시액

가) 프라이머와 프로브

유전자재조합 카놀라 검출에 사용되는 프라이머와 프로브는 표 17과 같으며, 이와 동등한 결과를 얻을 수 있는 프라이머와 프로브를 사용할 수도 있다.

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 17의 프라이머와 프로브를 사용하면서 PCR 반응액의 총량을 25 μL로 할 경우 PCR 반응액 조성은 표 18, 19, 20과 같다.

(생략)

표 17. (생략)

표 18. (생략)

표 19. (생략)

표 20. (생략)

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)

카놀라 PCR 반응 조건은 표 21과 같으며, 그 외 사항은 8.1.11 유전자재조합 면화 3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)에 따른다.

표 21. (생략)

4) (생략)

8.1.13 유전자재조합 사탕무, 알팔파

(생략)

1) (생략)

2) 시약 및 시액

가) (생략)

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 22의 프라이머와 프로브를 사용하면서 PCR 반응액의 총량을 25 μL로 할 경우 PCR 반응액 조성은 표 23, 24, 25, 26, 27과 같다.

(생략)

표 22. (생략)

표 23. (생략)

표 24. (생략)

표 25. (생략)

표 26. (생략)

표 27. (생략)

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)

사탕무의 PCR 반응조건은 표 28과 같고 알팔파의 PCR 반응조건은 표 29와 같으며, 그 외 사항은 8.1.11 유전자재조합 면화 3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)에 따른다.

표 28. (생략)

표 29. (생략)

4) (생략)

8.2 ∼ 8.3 (생략)

9. 일반시험법 (생략)

제 11. ∼ 제 12. (생략)

[별표 1]

“식품에 사용할 수 있는 원료”의 목록

1. 식물성

	품목명	이명 또는 영명	학명	사용부위
1～179	(생략)
180	아마	-	Linum usitatissimum	씨(시안배당체 제거)
181 ~298	(생략)

[별표 2]

“식품에 제한적으로 사용할 수 있는 원료”의 목록

1. 식물성

	품목명	이명 또는 영명	학명	사용부위	사용조건
1 ∼28	(생략)
<신설>
29 ∼56	(생략)

[별표 3]～〔별표 7〕(생략)

제 1. (현행과 같음)

제 2. (현행과 같음)

1. ∼ 4. (현행과 같음)

5. 식품일반의 기준 및 규격

1) ～ 3) (현행과 같음)

4) 식중독균

---------------------------- ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus),--------------- ------------------------------------------------------------ ------------------------------ ------------------------------ ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ ------------------------------ ------------------------------ ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ ---- 바실러스 세레우스(Bacillus cereus) 와 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens)-------.

(1) 바실러스 세레우스

① 장류(메주 제외) 및 소스류, 복합조미식품, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품 : g 당 10,000 이하(멸균제품은 음성이어야 한다)

② ① 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : g 당 1,000 이하(멸균제품은 음성이어야 한다).

(2) 클로스트리디움 퍼프린젠스

① 장류(메주 제외), 고춧가루 또는 실고추, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품, 복합조미식품, 향신료가공품, 식초, 카레분 및 카레(액상제품 제외) : g 당 100 이하(멸균제품은 음성이어야 한다)

② ① 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : 음성

5) 중금속 기준

(1) ～ (2) (현행과 같음)

(3) 농산물 중 중금속 기준

대상식품	납(mg/kg)	카드뮴(mg/kg)
곡류 (현미 제외)	0.2 이하	0.1 이하(밀, 쌀은 0.2 이하)
서류	0.1 이하	0.1 이하
콩류	0.2 이하	0.1 이하(대두는 0.2 이하)
과실류	0.1 이하(사과, 귤, 장과류는 0.2 이하)	-
엽채류(결구 엽채류 포함)	0.3 이하	0.2 이하
엽경채류	0.1 이하	0.05 이하
근채류	0.1 이하	0.1 이하(양파는 0.05 이하)
과채류	0.1 이하(고추, 호박은 0.2 이하)	0.05 이하(고추, 호박은 0.1 이하)
참깨	0.3 이하	0.2 이하

(4) (현행과 같음)

(5) 축산물 중 중금속 허용기준

대상식품	납(mg/kg)	카드뮴(mg/kg)
가금류고기	(현행과 같음)
돼지간	(현행과 같음)
돼지고기	(현행과 같음)
돼지신장	(현행과 같음)
소간	(현행과 같음)
소고기	(현행과 같음)
소신장	(현행과 같음)
원유 및 우유류	0.02 이하	-

(6) (현행과 같음)

6) (현행과 같음)

7) 방사능기준

핵 종	대 상 식 품	기 준 (Bq/Kg, L)
131I	영아용 조제식, 성장기용 조제식, 영·유아용 곡류조제식, 기타 영·유아식, 영․유아용특수조제식품	100
	유 및 유가공품	100
	기타 식품★	300
134Cs + 137Cs	(현행과 같음)	(현행과 같음)

★ 기타식품은 영아용 조제식, 성장기용 조제식, 영·유아용 곡류조제식, 기타 영·유아식, 영․유아용특수조제식품, 유 및 유가공품을 제외한 모든 식품을 말한다.

8) 곰팡이독소 기준

(1) ～ (5) (현행과 같음)

(6) 데옥시니발레놀(Deoxynivalenol)

대 상 식 품	기준 (mg/kg)
곡류 및 그 단순가공품 (옥수수 및 그 단순가공품 제외)	(현행과 같음)
옥수수 및 그 단순가공품	(현행과 같음)
시리얼류	(현행과 같음)
면류	0.75 이하

(7) 제랄레논(Zearalenone)

대 상 식 품	기준 (μg/kg)
곡류 및 그 단순가공품	(현행과 같음)
과자	(현행과 같음)
시리얼류	50 이하

9) ～ 11) (현행과 같음)

12) 발기부전치료제 등과 유사한 물질 기준

(1) ～(3) (현행과 같음)

13) 벤조피렌

14) 3-MCPD(3-Monochloropropane-1,2-diol)

기준

15) 멜라민(Melamine) 기준

16) ～ 19) (현행 13)부터 16)까지와 같음)

6. (현행과 같음)

제 3. ～ 제 4. (현행과 같음)

제 5. 식품별 기준 및 규격

1. 과자류

1) ～ 4) (현행과 같음)

5) 규격

(1) ~ (11) (현행과 같음)

(12) 납 (mg/kg) : 1.0 이하(젤리에 한한다)

6) (현행과 같음)

2. ~ 3. (현행과 같음)

4. 잼류

1) ～ 4) (현행과 같음)

5) 규격

(1) ~ (2) (현행과 같음)

(3) 납 (mg/kg) : 1.0 이하

6) (현행과 같음)

5. ~ 13. (현행과 같음)

14. 식용유지류

1) ～ 4) (현행과 같음)

5) 규격

유형 항목	콩기름	옥수수기름	채종유	미강유
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 요오드가	(현행과 같음)
(3) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(4) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	참기름	추출 참깨유	들기름	추출들깨유
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 요오드가	(현행과 같음)
(3)산화방지제 (g/kg)	(현행과 같음)
(4) 리놀렌산(%)*	(현행과 같음)
(5) 에루스산(%)	(현행과 같음)
(6) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(7) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

* (현행과 같음)

유형 항목	홍화유	고올레산 홍화유	해바라기유	고올레산 해바라기유
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 요오드가	(현행과 같음)
(3) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(4) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유 형 항 목	목화씨기름	목화씨샐러드유	목화씨스테아린유
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 요오드가	(현행과 같음)
(3) 냉각시험	(현행과 같음)
(4) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(5) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	땅콩기름	정제땅콩기름
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 요오드가	(현행과 같음)
(3) 산화방지제(g/kg)	(현행과 같음)
(4) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하
(5) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	압착올리브유	정제올리브유	혼합올리브유
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 요오드가	(현행과 같음)
(3) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(4) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	팜유	팜올레인유	팜스테아린유	팜핵유
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 과산화물가	(현행과 같음)
(3) 요오드가	(현행과 같음)
(4) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(5) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	야자유	혼합식용유	가공유지
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 과산화물가	(현행과 같음)
(3) 요오드가	(현행과 같음)
(4) 산화방지제 (g/kg)	(현행과 같음)
(5) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(6) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	쇼트닝	마가린	저지방마가린 (지방스프레드)
(1) 조지방 (%)	(현행과 같음)
(2) 산가	(현행과 같음)
(3) 타르색소	(현행과 같음)
(4) 산화방지제 (g/kg)	(현행과 같음)
(5) 보존료 (g/kg)	(현행과 같음)
(6) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(7) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	압착고추씨기름	고추씨기름	향미유
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 요오드가	(현행과 같음)
(3) 타르색소	(현행과 같음)
(4) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하
(5) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하	0.1 이하

유형 항목	기타 식용유지
(1) 산가	(현행과 같음)
(2) 산화방지제 (g/kg)	(현행과 같음)
(3) 납(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하
(4) 비소(mg/kg)	0.1 이하	0.1 이하

15.～ 17. (현행과 같음)

18. 음료류

18-1 ～ 18-5 (현행과 같음)

18-6 기타음료

1) ～ 3) (현행과 같음)

4) 식품유형

(1) 혼합음료

먹는 물 또는 동․식물성 원료에 식품 또는 식품첨가물을 가하여 음용할 수 있도록 가공한 --------.

(2) ～ (3) (현행과 같음)

5) ～ 6) (현행과 같음)

19.～ 29.(현행과 같음)

제 6. ～ 제 9.(현행과 같음)

제 10. 일반시험법

1.～3  (현행과 같음)

4. 식품 중 잔류농약 분석법

4.1 식품일반

4.1.1.1～ 4.1.3.28 (현행과 같음)

4.1.3.29 아트라진(Atrazine), 부피리메이트(Bupirimate), 클로로벤주론 (Chlorobenzuron) 및 클로로톨루론(Chlorotoluron)

1) 시험법 적용범위

곡류, 콩류, 채소류, 과실류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체를 아세토니트릴 또는 아세톤으로 추출한 다음, 기체크로마토그래프 분석대상 농약은 후로리실 카트리지로 정제하여 기체크로마토그래프로 측정하고 액체크로마토그래프 분석대상 농약은 아미노-프로필 카트리지로 정제하여 액체크로마토그래프로 측정한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프 : 질소․인 검출기(NPD)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프․질량분석기 (GC/MS)를 사용한다.

다) 액체크로마토그래프 : 자외부흡광검출기(Ultraviolet Detector)를 사용한다.

라) 액체크로마토그래프․질량분석기 (LC/MS)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 후로리실(Florisil) 및 아미노-프로필(Amino-propyl) 카트리지：후로리실(500 mg) 및 아미노-프로필(1 g) 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지

라) 표준원액 : 각 농약의 표준품을 유기용매(기체크로마토그래프 분석 용은 아세톤, 액체크로마토그래프 분석용은 아세토니트릴에 녹인다)에 녹여 500 mg/L가 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 사용하여 적당한 농도로 혼합, 희석하여 사용한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

가) 추출

(1) 아세토니트릴 추출법

검체[곡류 및 콩류는 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 μm를 통과하도록 분쇄한 50 g. 채소류 및 과실류는 약 1 kg을 분쇄기에 넣고 분쇄한 50 g]를 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고(단, 곡류 및 콩류의 경우 물 30 mL를 넣어 2시간 정치) 아세토니트릴 100 mL를 넣은 후 균질기로 2～3분간 균질화한다. 이를 여과지가 깔려있는 부흐너깔때기로 감압여과한다. 여과액을 염화나트륨 10～15 g이 들어있는 150 mL의 분리병에 담고 마개를 막은 후 1분간 세게 흔들어 섞는다. 이를 약 1시간 정치하여 아세토니트릴층과 물층을 분리시킨다. 상등액(아세토니트릴층) 20 mL를 취하고 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 용매를 날려버린다. ★ 잔류물을 기체크로마토그래프 분석 대상 농약의 경우 20% 아세톤 함유 헥산 4 mL에 녹이고, 액체크로마토그래프 분석 대상 농약은 1% 메탄올 함유 디클로로메탄 4 mL에 녹인다.

(2) 아세톤 추출법

검체[곡류 및 콩류는 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 μm를 통과하도록 분쇄한 50 g. 채소류 및 과실류는 약 1 kg을 분쇄기에 넣고 분쇄한 50 g]를 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고(단, 곡류 및 콩류의 경우 물 30 mL를 넣어 2시간 정치) 아세톤 100 mL를 넣은 후 균질기로 2～3분간 균질화한다. 이를 여과지가 깔려있는 부흐너깔때기로 감압여과한다. 여과액을 1 L 분액깔때기로 옮기고 포화염화나트륨 용액 50 mL, 물 100 mL 및 디클로로메탄 50 mL를 가하고 진탕한 후 층이 완전히 분리될 때까지 정치하고 디클로로메탄층을 취한다. 다시 디클로로메탄 50 mL로 상기의 과정을 되풀이 하여 여액을 합하고 무수황산나트륨에 통과시켜 탈수한다. 탈수한 용액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 용매를 날려버린다. ★ 잔류물을 기체크로마토그래프 분석 대상 농약의 경우 20% 아세톤 함유 헥산 4 mL에 녹이고, 액체크로마토그래프 분석 대상 농약은 1% 메탄올 함유 디클로로메탄 4 mL에 녹인다.

※ 추출은 상기 (1) 또는 (2) 중 선택하여 사용함.

주. 곡류, 콩류 등 지방성 검체의 경우 ★까지 시험하고 잔류물에 미리 아세토니트릴(또는 메탄올)로 포화시킨 헥산 30 mL를 건고물에 가하여 녹인 후 250 mL 용량의 분액깔때기에 옮기고 미리 헥산으로 포화시킨 아세토니트릴(또는 메탄올) 30 mL씩으로 2회 분배 추출하여 지방을 제거한다. 2회 추출된 아세토니트릴(또는 메탄올) 층을 합친 후 40℃에서 감압 농축하고 잔사를 20% 아세톤 함유 헥산 4 mL(기체크로마토그래프 분석 대상 농약) 및 1% 메탄올 함유 디클로로메탄 4 mL(액체크로마토그래프 분석 대상 농약)에 완전히 녹인다.

나) 정제

(1) 기체크로마토그래프 분석 대상농약

미리 후로리실 카트리지에 헥산 5 mL를 초당 2～3 방울 정도의 속도로 유출하여 버린다. 이 카트리지에 20% 아세톤 함유 헥산 5 mL를 위와 같은 방법으로 유출하여 버린다. 이어서 가) 추출 항의 20% 아세톤 함유 헥산에 녹인 액을 카트리지 상단에 넣고 초당 1～2방울 정도의 속도로 용출시켜 시험관에 받는다. 다시 카트리지가 용매에 젖어 있는 상태에서 20% 아세톤 함유 헥산 5 mL를 용출하여 동일 시험관에 모은다. 용출액은 40℃ 이하의 항온수조 중에서 질소 또는 공기를 낮은 유속으로 통과시키면서 용매를 날려 보낸 후 20% 아세톤 함유 헥산에 녹여서 일정량으로 하여 시험용액으로 한다.

주. 정제과정 중에는 모든 카트리지의 충전제가 마르지 않도록 주의한다.

(2) 액체크로마토그래프 측정 대상농약

미리 아미노-프로필 카트리지에 디클로로메탄 5 mL를 초당 2～3 방울 정도의 속도로 유출하여 버린다. 이 카트리지에 가) 추출 항의 1% 메탄올 함유 디클로로메탄에 녹인 액을 카트리지 상단에 넣고 초당 1～2 방울 정도의 속도로 용출시켜 시험관에 받는다. 다시 카트리지가 용매에 젖어 있는 상태에서 1% 메탄올 함유 디클로로메탄 7 mL로 용출하여 동일 시험관에 합친다. 용출액은 40℃ 이하의 항온수조 중에서 질소 또는 공기를 낮은 유속으로 통과시키면서 용매를 날려 보낸 후 아세토니트릴에 녹여 일정량으로 한 후 맴브레인 필터(PTFE 0.45 μm)로 여과하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프(NPD)의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5 (30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm)

(2) 캐리어가스 및 유량 : 질소, 1.0 mL/min

(3) 오븐온도 : 80℃에서 검체를 주입하고 2분간 유지한 후 7℃/분의 비율로 250℃까지 온도를 상승시킨 후 5℃/분의 비율로 280℃까지 온도를 상승시켜 15분간 유지한다.

(4) 주입부 : Splitless mode, 260℃

(5) 검출기온도 : 300℃

(6) 주입량 : 1 μL

나) 액체크로마토그래프(UVD)의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물 혼합액 (20/80, v/v)에서 아세토니트릴/물 혼합액 (80/20, v/v)으로 20분간 농도균배한 후 10분 이상 흘려보낸다.

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 검체주입량 : 10 μL

(6) 검출기파장 : UV 254 nm

다) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

라) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

아트라진 (19.2분) 1 ng.

그림 2. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 : 부피리메이트 (27.9분) 1 ng.

그림 3. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :    클로로벤주론 (28.2분)  10 ng.

그림 4. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 : 클로로톨루론 (17.1분) 20 ng.

마) 정량한계

아트라진 : 0.05 mg/kg

부피리메이트 : 0.05 mg/kg

클로로벤주론 : 0.03 mg/kg

클로로톨루론 : 0.05 mg/kg

7) 정량시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이법 또는 피크 면적법에 따라 정량한다.

8) 확인시험

기체 또는 액체크로마토그래프․질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로 각 농약의 성분을 확인할 수 있다.

가) 기체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5MS 캐필러리 칼럼 (30 m × 0.25 mm ID, 0.25 μm) 또는 이와 동등한것

(2) 캐리어가스 및 유량 : 헬륨, 1.0 mL/min

(3) 칼럼온도 : 80℃에서 검체를 주입하고 2분간 유지한 후 7℃/분의 비율로 250℃까지 온도를 상승시킨 후 5℃/분의 비율로 280℃까지 온도를 상승시켜 15분간 유지한다.

(4) 주입부 : Splitless mode, 260℃

(5) Interface 온도 : 280℃

(6) 분자량 범위 : 100 ～ 400

(7) 주입량 : 1 μL

표 1. 기체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 Fragment ions

화합물	머무름 시간 (분)	분자량	Fragment monitored (m/z)
아트라진	19.3	215	173, 200, 215
부피리메이트	24.8	316	273, 208

나) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (100 mm × 2.0 mm, 3 μm)

(2) 칼럼온도 : 40℃

(3) 이동상

(가) 클로로벤주론 : 아세토니트릴/물 혼합액 (50/50, v/v), Isocratic

(나) 클로로톨루론 : 아세토니트릴/물 혼합액 (30/70, v/v), Isocratic

(4) 이동상 유량 : 0.2 mL/min

(5) 검체주입량 : 5 μL

(6) 이온화

(가) 클로로벤주론 : ESI negative-ion mode

(나) 클로로톨루론 : ESI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 100 ～ 500

(8) Capillary temperature : 350℃

(9) Cone voltage

(가) 클로로벤주론 : -94 V

(나) 클로로톨루론 : 98 V

표 2. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

화합물	머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
클로로벤주론	8.9	308	307
클로로톨루론	9.9	212	213

4.1.4 단성분분석법

4.1.4.1 ～ 4.1.4.139 (현행과 같음)

4.1.4.140 이소카보포스 (Isocarbofos)

1) 시험법 적용범위

곡류, 과실 및 채소류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과 한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 디클로로메탄으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축한 후 헥산/아세토니트릴 분배를 거쳐 비극성 불순물을 제거하고 후로리실 칼럼크로마토그래피(용출용매 : 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (4/96, v/v)으로 추가 정제하여 기체크로마토그래프로 측정한다.

3) 장치

기체크로마토그래프/불꽃광도검출기(FPD)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 후로리실 (Florisil) : 잔류농약분석용 (60～100 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

라) 표준원액 : 이소카보포스를 아세톤에 녹여 1000 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 아세톤에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(곡류는 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 ㎛를 통과하도록 분쇄한 후 그 20 g을 달아 습윤화하고 과실류 또는 채소류는 약 1 kg을 잘 썰거나 갈은 후 그 20 g을 단다)를 균질기 용기에 달아 넣고 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화 한다. 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL와 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 정치한다. 디클로로메탄 층을 무수황산나트륨 20 g에 통과시켜 탈수한 후 다시 수용액층에 디클로로메탄 50 mL를 가하고 분배과정을 되풀이 하여 추출된 용액을 합한다. 합친 용액을 40℃이하의 수욕 중에서 감압농축하여 날려버리고 아세톤/헥산 혼합액 (6/94, v/v) 4 mL로 녹인다.

주. 곡류 등의 지방성 시료의 경우 위의 용매를 날려버린 잔류물에 미리 아세토니트릴로 포화시킨 헥산 30 mL를 건고물에 가하여 녹인 후 250 mL 용량의 분액깔대기에 옮기고 미리 헥산으로 포화시킨 아세토니트릴 30 mL씩으로 2회 분배 추출하여 지방을 제거한다. 2회 추출된 아세토니트릴 층을 합친 후 40℃에서 감압농축하고 잔사를 디클로로메탄 10 mL로 녹인다.

나) 정제

안지름 1.5 cm, 길이 40 cm의 유리칼럼관에 후로리실 10 g, 무수황산나트륨 약 2 g을 충전한 후 헥산 50 mL 를 가하여 상단에 소량의 헥산이 남을 정도로 유출시킨다. 여기에 위의 디클로로메탄 에 녹인 용액 10 mL(또는 아세톤/헥산혼합액(4 mL)에 녹인용액)을 가한 후 약 3 mL/min의 유속으로 흘려보낸다. 충진제 표면이 노출되기 직전 디클로로메탄 50 mL를 가하여 유출시켜 버리고, 에틸아세테이트/디클로로메탄 혼합액 (4/96, v/v) 100 mL로 용출시켜 받는다. 이 용출액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하고 건고물을 아세톤 4 mL를 가하여 잘 녹인 후 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 가스크로마토그래프의 측정조건

(1) 컬럼 : DB-5 (30 m × 0.53 mm, 0.5 ㎛) 또는 이와 동등한 것

(2) 캐리어가스 및 유량 : 헬륨 15.0 mL/min

(3) 칼럼온도 : 180℃

(4) 주입구온도 : 250℃

(5) 검출기온도 : 250℃

(6) 시료주입량 : 2 μL(직접주입법)

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :이소카보포스 (5.6분) 2 ng.

라) 정량한계

0.02 mg/kg

마) 기체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : HP-5MS (30 m × 0.25 mm, 0.25 ㎛) 또는 이와 동등한 것

(2) 캐리어가스 및 유량 : 헬륨, 1.0 mL/min

(3) 칼럼온도 : 200℃

(4) 주입구온도 : 250℃

(5) 주입부 : Split mode 5:1

(6) Interface 온도 : 280℃

(7) 분자량 범위 : 100～400

(8) 시료주입량 : 1 μL

표 1. 기체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
6.0	289	121, 136, 230, 289

6) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

7) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

4.1.4.141 포메사펜(Fomesafen)

1) 시험법 적용범위

곡류, 과실 및 채소류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

시료를 아세톤으로 추출한 후 흡인여과한다. 여과액을 분액깔대기에 옮겨 포화식염수와 증류수를 가하고 디클로로메탄으로 분배한다. 유기용매층을 탈수, 감압농축하고 후로리실 칼럼크로마토그래피(용출용매 : 디클로로메탄/메탄올 혼합액 (15/85, v/v)으로 정제하여 액체크로마토그프로 측정한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/자외부흡광검출기(UV Detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 후로리실 (Florisil) : 잔류농약분석용 (60～100 mesh)을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

라) 표준원액 : 포메사펜을 메탄올에 녹여 500 mg/L이 되게 한다.

마) 표준용액 : 표준원액을 각각 메탄올에 녹여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

바) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체(곡류 약 1 kg을 잘 혼합하여 표준체 420 ㎛를 통과하도록 분쇄한 후 25 g을 단다)를 균질기 용기에 달아 물 20 mL를 넣고 습윤화 한다. 여기에 아세톤 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한 다음 여지가 깔려있는 부흐너깔대기로 흡인 여과하고 잔류물은 아세톤 40 mL로 씻어 위의 여액과 합한다. 여액은 분액깔대기에 옮겨 증류수 450 mL와 포화식염수 50 mL를 첨가한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 섞은 후 정치하여 디클로로메탄 층을 취하고, 다시 디클로로메탄 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 섞은 후 정치한 다음 디클로로메탄 층을 취하여 위의 디클로로메탄과 합한다. 디클로로메탄액을 무수황산나트륨 15 g에 통과시켜 탈수하고 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하여 용매를 모두 날려버린다. 건고물에 아세토니트릴 포화 헥산 40 mL를 가하여 녹인 후 250 mL 용량의 분액깔대기에 옮긴다. 헥산 포화 아세토니트릴을 40 mL를 분액깔대기에 가하여 2분간 심하게 흔들어 섞은 후 정치한다. 분리된 아세토니트릴층을 125 mL 용량의 농축플라스크에 옮기고, 분액깔때기에 남은 헥산 용액에 다시 헥산 포화 아세토니트릴 40 mL를 가하여 위의 과정을 되풀이한다. 합친 아세토나이트릴 여액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하여 날려버리고 메탄올/디클로로메탄 혼합액 (5/95, v/v) 10 mL로 녹인다.

나) 정제

안지름 1.5 cm, 길이 40 cm의 유리칼럼관에 130℃에서 하룻밤 가열하여 탈수시킨 후로리실 10 g을 충진하고, 그 위에 무수황산나트륨 약 2 g을 충진한 후 디클로로메탄 50 mL를 가하여 상단에 소량의 디클로로메탄이 남을 정도로 유출시킨다. 여기에 위의 메탄올/디클로로메탄 혼합액 (5/95, v/v)에 녹인 검체용액 10 mL를 가한 후 약 3 mL/min의 유속으로 흘려보낸다. 충진제 표면이 노출되기 직전 메탄올/디클로로메탄 혼합액 (5/95, v/v) 100 mL를 가하여 유출시켜 버리고, 메탄올/디클로로메탄 혼합액 (15/85, v/v) 100 mL로 용출시켜 받는다. 이 용출액을 40℃이하의 수욕상에서 감압농축하고 건고물에 아세토니트릴 5 mL를 가하여 잘 녹이고 인산으로 pH를 3.2로 조절한 증류수 5 mL를 가하여 혼합한 후 시험용액으로 사용한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 ㎛)및 이와 동등한 것

(2) 칼럼온도 : 35℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물(인산용액으로 pH를 3.2로 조절) 혼합액 (55/45, v/v)

(4) 이동상 유량 : 1.0 mL/min

(5) 시료주입량 : 20 μL

(6) 검출기파장 : 290 nm

나) 검량선의 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 :

포메사펜 (8.5분) 20 ng.

라) 정량한계

0.04 mg/kg

마) 액체크로마토그래프․질량분석의 측정조건

(1) 칼럼 : C18 (100 mm × 2.0 mm, 3 ㎛)

(2) 칼럼온도 : 35℃

(3) 이동상 : 아세토니트릴/물(인산용액으로 pH를 3.2로 조절) 혼합액 (55/45, v/v)

(4) 이동상 유량 : 0.2 mL/min

(5) 시료주입량 : 5 μL

(6) 이온화 : ESI positive-ion mode

(7) 분자량 범위 : 100 ～ 500

(8) Capillary temperature : 330℃

(9) Cone voltage : 80 V

표 1. 액체크로마토그래프․질량분석기 분석을 위한 이온

머무름 시간 (분)	분자량	Ion monitored (m/z)
6.0	439	440

7) 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

8) 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크 높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

4.1.4.142 디펜조쿼트(Difenzoquat)

1) 시험법 적용범위

곡류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 디펜조쿼트를 2 N 염산 용액과 아세토니트릴로 추출한 후 헥산 및 디클로로메탄/아세톤 혼합액(50/50, v/v)으로 액-액 추출하여 액체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 액체크로마토그래프-자외부흡광검출기(HPLC-UVD, High Performance Liquid Chromatograph-Ultraviolet Detector)를 사용한다.

나) 액체크로마토그래프-질량분석기(HPLC-MS, High Performance Liquid Chromatograph-Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 물 : 3차 증류수

다) 표준원액 : 디펜조쿼트 표준품을 아세토니트릴에 녹여 500 μg/mL가 되게 한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 아세토니트릴로 희석하여 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg/mL가 되도록 하여 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다.

마) 2% 인산수소이나트륨(disodium hydrogen phosphate) 용액 : 인산수소이나트륨 2 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

바) 0.01 M 1-헥산술폰산나트륨염수화물(1-hexanesulfonic acid, sodium salt hydrate) 용액 : 1-헥산술폰산나트륨염수화물 1.88 g을 물 990 mL에 녹여 0.1 M 인산을 첨가하여 pH 3으로 맞춘 다음 물을 첨가하여 1,000 mL가 되게 한다.

사) 0.005 M 암모늄아세테이트(ammonium acetate) 용액 : 암모늄아세테이트 0.39 g을 물에 녹여 1,000 mL가 되게 한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 25 g을 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고, 2 N 염산 용액 40 mL를 넣은 후 아세토니트릴 100 mL를 첨가하고 2분간 균질화한다. 부흐너깔때기로 흡인여과하고 잔류물을 아세토니트릴 40 mL로 씻어 상기 여액과 합하여 약 40 mL가 남을 정도까지 감압농축한 후 2% 인산수소이나트륨 용액 40 mL을 넣고 1 N 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH 6으로 맞춘다. 이를 분액깔때기에 옮겨 헥산 50 mL을 넣고 심하게 흔들어 30분간 정치하여 물층을 별도의 분액깔때기로 옮기고, 분액깔때기에 다시 헥산 50 mL을 넣고 심하게 흔들어 30분간 정치한다. 별도의 분액깔때기에 상기 물층과 디클로로메탄/아세톤 혼합액(50/50, v/v) 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 30분간 정치한다. 디클로로메탄/아세톤 혼합액층(50/50, v/v)을 무수황산나트륨 15 g에 통과시켜 탈수한 후 감압농축플라스크에 취한다. 물층에 다시 디클로로메탄/아세톤 혼합액(50/50, v/v) 50 mL를 가하여 2분간 심하게 흔들어 30분간 정치한 후 디클로로메탄/아세톤(50/50, v/v) 혼합액층을 탈수하여 앞의 감압농축플라스크에 합한다. 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축하고 잔류물을 아세토니트릴 3 mL을 가하여 녹인 다음 0.01 M 1-헥산술폰산나트륨염수화물 용액 7 mL로 용해하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : C18(250 mm ×  4.6 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 : 0.01 M 1-헥산술폰산나트륨염수화물 혼합액/아세토니트릴(65/35, v/v)

(3) 이동상 유량 : 1 mL/min

(4) 칼럼 온도 : 40℃

(5) 검출파장 : 256 nm

(6) 주입량 : 20 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg/mL를 액체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

디펜조쿼트

↓

0

4

8

12

16

20

머무름 시간(분)

그림 1. 액체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 : 디펜조쿼트(10.9분)

라) 정량한계

0.05 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 디펜조쿼트를 확인한다.

가) 액체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 : C18(100 mm ×  2.0 mm, 3 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 : 0.005 M 암모늄아세테이트/아세토니트릴(80/20, v/v)

(3) 이동상 유량 : 0.5 mL/min

(4) 칼럼 온도 : 40℃

(5) 캐필러리 온도 : 350℃

(6) 이온화 : ESI positive-ion mode

(7) 콘 볼테이지 : 142 V

(8) 주입량 : 5 μL

(9) 분자량 범위 : 100∼300 m/z

표 1. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
9.8	249	249

4.1.4.143 아시플루오르펜(Acifluorfen) 시험법

1) 시험법 적용범위

두류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 아시플루오르펜을 아세토니트릴로 추출하고 다시 디클로로메탄으로 액-액 추출하여 14% 삼불화붕소 메탄올 용액으로 메틸화한 후 후로리실 칼럼으로 정제하여 기체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프-전자포획검출기(GC-ECD, Gas Chromatograph -Electron Capture Detector)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프-질량분석기(GC-MS, Gas Chromatograph -Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 물 : 3차 증류수

다) 표준원액 : 아시플루오르펜 표준품을 아세톤에 녹여 500 μg/mL가 되게 한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 아세톤으로 희석하여 10 μg/mL가 되게 한 후 이 용액 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.0 mL를 마개 달린 시험관에 취하여 질소로 농축한다. 이 잔사를 □5) 시험용액의 조제 나) 메틸화□과정에 따라 실험하여 최종농도가 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.0 μg/mL가 되도록 하여 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다.

마) 0.2 M 염화암모늄(ammonium chloride) 용액 : 염화암모늄 1.07 g을 물 90 mL에 녹인 후 인산을 첨가하여 pH 2로 맞춘 다음 물을 첨가하여 100 mL가 되게 한다.

바) 2 % 인산수소이나트륨(disodium hydrogen phosphate) 용액 : 인산수소이나트륨 2 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

사) 메틸화 용액 : 14% 삼불화붕소(boron trifluoride) 메탄올 용액을 사용한다.

아) 5% 황산나트륨(sodium sulfate) 용액 : 황산나트륨 5 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

자) 후로리실(Florisil) : 칼럼크로마토그래피용 후로리실(60∼100 mesh) 5 g을 130℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식혀 사용한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 25 g을 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고, 0.2 M 염화암모늄 용액 20 mL를 넣은 후 10분간 정치한다. 아세토니트릴 100 mL를 넣은 후 3분간 균질화한다. 이를 부흐너깔때기로 흡인여과하고, 아세토니트릴 40 mL로 잔사 및 용기를 씻어 내려 상기 여액과 합한다. 이 액을 500 mL 용량의 감압농축플라스크에 옮기고 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축한 후 잔류물에 2% 인산수소이나트륨 용액 40 mL와 헥산 50 mL를 가하여 녹인 후 분액깔때기로 옮긴다. 분액깔때기를 흔들어 섞은 후 30분간 정치한 다음 물층을 취하여 2 N 염산 용액을 첨가하여 pH 2로 맞춘다. 물층에 디클로로메탄 50 mL를 첨가하여 심하게 흔들어 30분간 정치하여 디클로로메탄층을 감압농축플라스크에 취한다. 물층에 다시 디클로로메탄 50 mL를 넣고 심하게 흔들어 30분간 정치하여 디클로로메탄층을 상기 감압농축플라스크에 합한 후 40℃ 이하의 수욕상에서 약 2 mL가 남도록 감압농축한다. 잔류물을 마개 달린 시험관에 옮긴 후 아세톤 10 mL로 농축플라스크를 세척하여 합한 다음 40℃ 이하의 수욕상에서 완전히 질소로 농축한다.

나) 메틸화

위의 마개 달린 시험관에 메탄올 1 mL를 넣어 잔류물을 녹인 후 14% 삼불화붕소 메탄올 용액 1 mL를 첨가한 다음 마개를 닫고 80℃의 수욕상에서 20분간 반응시킨다. 여기에 5% 황산나트륨 용액 10 mL를 첨가하여 반응을 끝내고 분액깔때기로 옮긴 후 벤젠/헥산 혼합액(40/60, v/v) 10 mL를 넣고 심하게 흔들어 30분간 정치하여 상층인 벤젠/헥산 혼합액(40/60, v/v)층을 취한다

다) 정제

안지름 11 mm, 길이 400 mm의 유리칼럼에 후로리실 5 g과 무수황산나트륨 2 g을 차례로 충전한 후 헥산 25 mL를 넣고 무수황산나트륨 상단에 소량의 헥산이 남을 정도까지 유출시킨다. 이 칼럼에 상기 벤젠/헥산 혼합액(40/60, v/v) 10 mL를 넣고 유출시킨다. 무수황산나트륨 상단이 노출되기 직전에 에틸아세테이트/헥산 혼합액(10/90, v/v) 50 mL로 용출시켜 감압농축플라스크에 받는다. 이 용출액을 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축한 후 잔류물을 벤젠/헥산 혼합액(40/60, v/v) 10 mL로 용해하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5(30 m ×  0.25 mm, 0.5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : N2, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 260℃

(4) 오븐 온도 : 210℃

(5) 검출기 온도 : 280℃

(6) 주입모드 : split mode(10:1)

(7) 주입량 : 1 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.0 μg/mL를 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램: 아시플루오르펜 메틸 에스터(12.6분)

라) 정량한계

0.02 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

기체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 아시플루오르펜을 확인한다.

가) 기체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 :	DB-5ms(30 m ×  0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 250℃

(4) 오븐 온도 : 150℃에서 시험용액을 주입한 후 3분간 유지하고  15℃/min의 비율로 210℃까지 온도를 상승시켜 10분간 유지한다.

(5) 인터페이스 온도 : 280℃

(6) 이온원 온도 : 230℃

(7) 사중극자 온도 : 150℃

(8) 주입모드 : splitless mode

(9) 주입량 : 1 μL

(10) 분자량 범위 : 100∼400 m/z

표 1. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
13.9	375	375, 223, 344

(주. 분자량은 아시플루오르펜이 메틸화 된 아시플루오르펜 메틸 에스터의 분자량임)

4.1.4.144 티오설탑(Thiosultap) 시험법

1) 시험법 적용범위

곡류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 티오설탑을 2% 시스테인 용액, 3% 염화니켈 용액 및 암모니아수를 사용하여 네레이스톡신으로 전환시켜 헥산 및 에틸아세테이트로 액-액 추출하여 기체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프-불꽃광도검출기(GC-FPD, Gas Chromatograph -Flame Photometric Detector, 황용 간섭필터, 파장 394 nm)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프-질량분석기(GC-MS, Gas Chromatograph -Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 물 : 3차 증류수

다) 표준원액 : 옥살산수소 네레이스톡신(nereistoxin hydrogen oxalate) 표준품을 메탄올에 녹여 네레이스톡신(nereistoxin)으로서 500 μg/mL가 되게 한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 메탄올로 희석하여 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg/mL가 되게 한 후 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다. 단, 환산계수 2.1[티오설탑의 분자량(309)/네레이스톡신 분자량(149)]을 곱하여 티오설탑(thiosultap)으로 환산한다.

마) 2% 시스테인(cysteine) 용액 : 무수염산시스테인  (L-cysteine-HCl, anhydrous) 20 g을 0.02 N 염산 용액 950 mL에 녹인 후 10 N 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH 4로 맞춘 다음 0.02 N 염산용액을 첨가하여 1,000 mL가 되게 한다.

바) 3% 염화니켈(nickel chloride) 용액 : 염화니켈 3 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 25 g을 정밀히 달아 250 mL 폴리프로필렌 원심분리기용 튜브에 넣고 2% 시스테인 용액 150 mL를 넣은 후 30분간 진탕 추출한다. 이를 9900 G, 4℃에서 10분간 원심분리한 후 상등액 120 mL를 별도의 250 mL 폴리프로필렌 원심분리기용 튜브에 취한다. 여기에 3% 염화니켈 용액과 진한 암모니아수를 각각 4 mL씩 첨가한 다음 5분간 진탕한 후 70℃ 수욕상에서 1시간 동안 진탕 반응시킨다. 반응이 끝난 추출액을 냉각시킨 다음 10 N 황산 용액을 첨가하면서 pH 5로 맞춘 후 헥산 50 mL를 가하여 진탕한다. 이를 9900 G, 4℃에서 10분간 원심분리한 후 상등액을 버린 다음 10 N 수산화나트륨 용액을 첨가하면서 pH 9로 맞춘다. 여기에 염화나트륨 12 g과 에틸아세테이트 100 mL를 가한 후 진탕하고, 다시 7600 G, 4℃에서 10분간 원심분리한 다음 상등액(에틸아세테이트 층) 80 mL를 감압농축플라스크에 취하여 40℃ 수욕상에서 감압농축한 후 잔류물을 메탄올 2 mL로 용해하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5(30 m ×  0.53 mm, 0.5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 15 mL/min

(3) 주입부 온도 : 250℃

(4) 오븐 온도 : 100℃

(5) 검출기 온도 : 250℃

(6) 주입모드 : splitless mode

(7) 주입량 : 2 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg/mL를 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

머무름 시간(분)

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 : 네레이스톡신(4.9분)

라) 정량한계

0.05 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

기체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 네레이스톡신을 확인한다.

가) 기체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5ms(30 m ×  0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 250℃

(4) 오븐 온도 : 70℃에서 시험용액을 주입한 후 2분간 유지하고 10℃/min의 비율로 150℃까지 온도를 상승시켜 5분간 유지한다.

(5) 인터페이스 온도 : 280℃

(6) 이온원 온도 : 230℃

(7) 사중극자 온도 : 150℃

(8) 주입모드 : splitless mode

(9) 주입량 : 2 μL

(10) 분자량 범위 : 50∼200 m/z

표 1. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
8.9	149	149, 70, 103

(주. 분자량은 티오설탑이 전환 된 네레이스톡신의 분자량임)

4.1.4.145 이소펜포스-메틸

(Isofenphos-methyl)

1) 시험법 적용범위

곡류, 두류, 채소류 및 과실류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 이소펜포스-메틸을 아세토니트릴로 추출한 후 후로리실 카트리지로 정제하여 기체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프-질소 ․ 인 검출기(GC-NPD, Gas Chromatograph -Nitrogen Phosphorous Detector)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프-질량분석기(GC-MS, Gas Chromatograph -Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 물 : 3차 증류수

다) 표준원액 : 이소펜포스-메틸 표준품을 아세톤에 녹여 500 μg/mL가 되게 한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v)으로 희석하여 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 1.0, 2.0 μg/mL가 되도록 하여 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다.

마) 후로리실(Florisil) 카트리지 : 후로리실 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지(500 mg, 6 cc)를 사용한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 25 g을 정밀히 달아 균질기 용기에 넣고, 물 20 mL를 넣은 후 혼합하여 2시간 정치한다. 다시 아세토니트릴 100 mL를 넣은 후 3분간 균질화한 다음 이를 부흐너깔때기로 흡인여과하고, 아세토니트릴 40 mL로 잔사 및 용기를 씻어 내려 상기 여액과 합한다. 여액을 염화나트륨 15 g이 들어있는 분액깔때기에 옮긴 후 분액깔때기를 심하게 흔들어 1시간 정치한 다음 아세토니트릴층을 감압농축플라스크에 취하여 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축한다. 잔류물을 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v) 4 mL를 가하여 용해한다.

나) 정제

후로리실 카트리지에 헥산 5 mL를 넣고 고정상 상단에 소량의 헥산이 남을 정도까지 유출시킨다. 이 카트리지에 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v) 5 mL를 넣고 유출시킨다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 ‘가) 추출’로부터 얻은 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v) 4 mL를 컬럼에 가하여 15 mL 시험관에 받는다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v) 5 mL를 용출시켜 상기 시험관에 합한다. 이 용출액을 40℃ 이하 수욕상에서 일정량이 남도록 감압농축한 후 아세톤/헥산 혼합액(20/80, v/v)을 가하여 최종 부피가 5 mL가 되도록 하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-17(30 m × 0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : N2, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 260℃

(4) 오븐 온도 : 80℃에서 시험용액을 주입한 후 2분간 유지하고 10℃/min의 비율로 270℃까지 승온하여 15분간 유지한다.

(5) 검출기 온도 : 280℃

(6) 주입모드 : splitless mode

(7) 주입량 : 1 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 1.0, 2.0 μg/mL를 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

머무름 시간(분)

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 : 이소펜포스-메틸(20.0분)

라) 정량한계

0.02 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

기체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 이소펜포스-메틸을 확인한다.

가) 기체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5ms(30 m × 0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 250℃

(4) 오븐 온도 : 80℃에서 시험용액을 주입한 후 2분간 유지하고 10℃/min의 비율로 270℃까지 승온하여 15분간 유지한다.

(5) 인터페이스 온도 : 280℃

(6) 이온원 온도 : 230℃

(7) 사중극자 온도 : 150℃

(8) 주입모드 : splitless mode

(9) 주입량 : 1 μL

(10) 분자량 범위 : 100∼350 m/z

표 1. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
16.8	331	199, 121, 241

4.1.4.146 클로로피크린(Chloropicrin)

1) 시험법 적용범위

곡류 등 식품에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 클로로피크린을 에틸아세테이트로 추출하여 기체크로마토그래프로 분석한다.

3) 장치

가) 기체크로마토그래프-전자포획검출기(GC-ECD, Gas Chromatograph -Electron Capture Detector)를 사용한다.

나) 기체크로마토그래프-질량분석기(GC-MS, Gas Chromatograph -Mass Spectrometer)를 사용한다.

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

나) 표준원액 : 클로로피크린 표준품을 아세톤에 녹여 500 μg/mL가 되게 한다.

다) 표준용액 : 표준원액을 에틸아세테이트로 희석하여 0.005, 0.01, 0.02, 0.05, 0.1, 0.5 μg/mL가 되도록 하여 검량선 작성을 위한 표준용액으로 한다.

5) 시험용액의 조제

가) 추출

검체 1 kg을 잘 혼합하고 분쇄하여 표준체 420 μm를 통과시킨 후 5 g을 정밀히 달아 무수황산나트륨 2 g이 들어있는 20 mL 헤드스페이스 바이알에 넣는다. 에틸아세테이트 10 mL를 첨가한 후 헤드스페이스 바이알용 마개로 밀봉한다. 바이알을 10분간 심하게 흔들어 5분간 정치한 다음 주사기로 상층액 약 3 mL를 취한다. 이 추출액을 멤브레인 필터로 여과하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 기체크로마토그래프의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5(30 m × 0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : N2, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 200℃

(4) 오븐 온도 : 40℃에서 시험용액을 주입한 후 10분간 유지하고 20℃/min의 비율로 200℃까지 승온하여 2분간 유지한다.

(5) 검출기 온도 : 280℃

(6) 주입모드 : split mode(10:1)

(7) 주입량 : 1 μL

나) 검량선 작성

표준용액 0.005, 0.01, 0.02, 0.05, 0.1, 0.5 μg/mL를 기체크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

다) 표준품의 크로마토그램

클로로피크린

↓

머무름 시간(분)

그림 1. 기체크로마토그래프에서 표준품의 크로마토그램 : 클로로피크린(7.4분)

라) 정량한계

0.01 mg/kg

7) 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 피크 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

8) 확인시험

기체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 질량분석 스펙트럼으로써 클로로피크린을 확인한다.

가) 기체크로마토그래프-질량분석기의 측정조건

(1) 칼럼 : DB-5ms(30 m × 0.25 mm, 0.25 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 가스 및 유량 : He, 1 mL/min

(3) 주입부 온도 : 200℃

(4) 오븐 온도 : 40℃에서 시험용액을 주입한 후 10분간 유지하고 20℃/min의 비율로 200℃까지 승온하여 2분간 유지한다.

(5) 인터페이스 온도 : 280℃

(6) 이온원 온도 : 230℃

(7) 사중극자 온도 : 150℃

(8) 주입모드 : splitless mode

(9) 주입량 : 1 μL

(10) 분자량 범위 : 50∼200 m/z

표 1. 기체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

머무름 시간(분)	분자량(MW)	이온(m/z)
4.5	164	117, 121, 82

5.～7. (현행과 같음)

8. 식품표시 관련 시험법

8.1 유전자재조합식품의 시험법

8.1.1 ∼ 8.1.4 (현행과 같음)

8.1.5 정성시험

1) ∼ 3) (현행과 같음)

표 1. 유전자재조합 콩의 PCR검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
스크 리닝	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
구조 유전자	(현행과 같음) DP356043-5 (145 bp) DP305423-1 (149 bp)	(현행과 같음) DP356043-5-5' DP356043-5-3' DP305 f7-5' DP305 r7-3'	(현행과 같음) 5'-CTT TTG CCC GAG GTC GTT AG-3' 5'-GCC CTT TGG TCT TCT GAG ACT G-3' 5'-CCC GTG TTC TCT TTT TGG CTA-3' 5'-TGA ATT TCT AAC CTG GCT GCT ATA GTT-3'

표 2. 유전자재조합 옥수수의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	품 종 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성유전자	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
스크리닝	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
구조유전자	(현행과 같음) MIR162 (149 bp) DP098140-6 (147 bp)	(현행과 같음) FE02402-5' FE01004-3' DP098140-6-5' DP098140-6-3'	(현행과 같음) 5'-GTG GAC TGA AAG GAG ACT TTG TTT ATC-3' 5'-GAT TGT CGT TTC CCG CCT TCA GTT-3' 5'-TCT CTT TGC TTG GTC TTT CTC TAT CGA-3' 5'-CCA AAC GTA AAA CGG CTT GTC C-3'

표 3. ～표 4. (현행과 같음)

4) 시험조작(PCR)

(현행과 같음)

① ---------------------------

----------------------------

---RRS, MON89788, A2704-12, DP356043-5, DP305423-1,  Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, GA21, MON88017, MIR604, MON89034, MIR162, DP098140-6

② --------------------------

------------ MON89788, A2704-12, DP356043-5, DP305423-1, Bt176, T25, MON810, TC1507, DAS59122-7, DP098140-6

③ --------------------------

-------------- MON89788, DP356043-5, DP305423-1, GA21, MIR604, MIR162, DP098140-6

④ -------------------------

--------------------------

--------------- MON89788, DP356043-5, DP305423-1, DP098140-6

가) ∼ 다) (현행과 같음)

5) (현행과 같음)

6) 분석 결과의 판정 및 처리

가) ∼ 나) (현행과 같음)

다) -------------------------

--------------------------

----------------------------

----------------------------

----------------------------

----------------------------

--------------------------

--------------------------

--------------------------

-------MON89034, MIR162---.

라) (현행과 같음)

8.1.6 ∼ 8.1.10 (현행과 같음)

8.1.11 유전자재조합 면화

1) (현행과 같음)

2) 시약 및 시액

가) (현행과 같음)

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

--------------------------

--------------------------

--------------------------

--------------13, 14와-----.

(현행과 같음)

표 9. 유전자재조합 면화의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와  프로브

목적	품 종 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
구조유전자	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음) GHB614 (120 bp)	(현행과 같음) SHA007-5‘ SHA007-3' TM072-Taq	(현행과 같음) 5'-CAA ATA CAC TTG GAA CGA CTT CGT-3' 5'-GCA GGC ATG CAA GCT TTT AAA-3' 5'-FAM-CTC CAT GGC GAT CGC TAC GTT CTA GAA TT-TAMRA-3'

* (현행과 같음)

** (현행과 같음)

표 10. ∼ 표 13. (현행과 같음)

표 14. 면화의 내재성 유전자와 면화 GHB614 검사용 PCR 반응액 조성

성 분	최종 농도(well)	1회 분량(μL)
Universal Master Mix (2 X)	1 X	12.5
프라이머(각 10 μM)	각 400 nM	각 1
Probe (10 μM)	200 nM	0.5
주형 DNA(50 ng/μL)	100 ng	2
멸균증류수	반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가	8
전체량		25

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석

(현행과 같음)

---------------------------  -------- 표 15, 16과--------

--------------------------

------

(현행과 같음)

표 15. (현행 표 14.와 같음)

표 16. (현행 표 15.와 같음)

4) 분석결과의 판정

(현행과 같음)

--------------------------

--------------------------

--(표 17).

표 17. (현행 표 16.과 같음)

8.1.12 유전자재조합 카놀라

1) (현행과 같음)

2) 시약 및 시액

가) 프라이머와 프로브

-------------------------- ----------------------- 표 18--------------------------------------------------------------------------.

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 18---------------------- ------------------------------------------------------------ 표 19, 20, 21------ --.

(현행과 같음)

표 18. (현행 표 17.과 같음)

표 19. (현행 표 18.과 같음)

표 20. (현행 표 19.과 같음)

표 21. (현행 표 20.과 같음)

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)

-------------------  표 22와 ------------------------

--------------------------  -------------------------- ------------------.

표 22. (현행 표 21.과 같음)

4) (현행과 같음)

8.1.13 유전자재조합 사탕무, 알팔파

(현행과 같음)

1) (현행과 같음)

2) 시약 및 시액

가) (현행과 같음)

나) ------------------------

표 23-------------------- -------------------------------------------------- ------------ 표 24, 25, 26, 27, 28 -----.

(현행과 같음)

표 23. (현행 표 22.과 같음)

표 24. (현행 표 23.과 같음)

표 25. (현행 표 24.과 같음)

표 26. (현행 표 25.과 같음)

표 27. (현행 표 26.과 같음)

표 28. (현행 표 27.과 같음)

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)

---------------------- 표 29 -------------------------- 표 30과 ------------------- -------------------------- ------------------------------------------------.

표 29. (현행 표 28.과 같음)

표 30. (현행 표 29.과 같음)

4) (현행과 같음)

8.2 ∼ 8.3 (현행과 같음)

9. 일반시험법 (현행과 같음)

제 11. ∼ 제 12. (현행과 같음)

[별표 1]

“식품에 사용할 수 있는 원료”의 목록

1. 식물성

	품목명	이명 또는 영명	학명	사용부위
1～179	(현행과 같음)
<삭제>
180 ~297	(현행 181~298과 같음)

[별표 2]

“식품에 제한적으로 사용할 수 있는 원료”의 목록

1. 식물성

	품목명	이명 또는 영명	학명	사용부위	사용조건
1 ∼28	(현행과 같음)
29	아마	-	Linum usitatissimum	열처리한 씨	일일섭취량이 16g을 초과하지 않아야 하며, 제품별 12% 미만, 1회 섭취량은 4g을 초과하지 않도록 사용해야 한다.
30 ∼57	(현행 29~56과 같음)

[별표 3]～〔별표 7〕(현행과 같음)