식품의약품안전청 고시 제2011-62호

식품의 기준 및 규격 일부개정고시

2011. 10. 14.

식품의약품안전청

식품의약품안전청 고시 제2011- 62호

식품의 기준 및 규격 일부 개정고시

1. 개정 이유

식품일반에 대한 클로스트리디움 퍼프린젠스 규격을 정량화하고 유전자재조합식품에 대한 시험법을 추가 신설하여 국민에게 안전한 식품을 공급하고자 함

2. 주요 내용

가. 식품일반에 대한 공통기준 및 규격 중 클로스트리디움 퍼프린젠스 기준 개정[제 2, 5, 4)]

1) 국제적인 추세에 부합하고 인체 위해성 및 식중독 발생균량 등을 고려한 현실적인 안전관리 기준 필요

2) 식품일반에 대한 공통기준 및 규격 중 클로스트리디움 퍼프린젠스의 규격 정량화

나. 유전자재조합식품 시험법의 개정[제 10, 8.1]

1) 유전자재조합식품 표시제도의 과학적 사후관리를 위해 신규 승인된 유전자재조합식품의 시험법 확대 필요

2) 유전자재조합 콩 2건(DP356043-5 및 DP305423-1), 유전자재조합 옥수수 2건(MIR162 및 DP098140-6), 유전자재조합 면화 1건(GHB614)에 대한 시험법 추가 신설

3) 과학적인 분석업무 적용범위 확대

3. 기타 참고사항

가. 관계법령 : 「식품위생법」 제7조 제1항

나. 예산조치 : 별도조치 필요 없음

다. 합    의 : 해당사항 없음

라. 기    타 : 행정예고 : ’11.5.12.∼ ’11.6.3.

식품의약품안전청 고시 제2011-62호

「식품위생법」 제7조제1항에 따른 「식품의 기준 및 규격」(식품의약품안전청 고시 제2011-46호, 2011. 8. 31.)을 다음과 같이 개정 고시합니다.

2011년 10월 14일

식품의약품안전청장

식품의 기준 및 규격 일부개정고시

식품의 기준 및 규격 일부를 다음과 같이 개정한다.

제 2, 5, 4)를 다음과 같이 한다.

4) 식중독균

식육(제조, 가공용원료는 제외한다), 살균 또는 멸균처리하였거나 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품에서는 특성에 따라 살모넬라(Salmonella spp.), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 리스테리아 모노사이토제네스(Listeria monocytogenes), 대장균 O157:H7(Escherichia coli O157:H7), 캠필로박터 제주니(Campylobacter jejuni), 여시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 등 식중독균이 검출되어서는 아니되며, 또한 식육 및 식육제품에 있어서는 결핵균, 탄저균, 브루셀라균이 검출되어서는 아니 된다. 다만, ‘제 5. 식품별 기준 및 규격’에서 식중독균에 대한 규격이 정하여진 식품에는 해당식품의 규격을 적용하며, 그 외의 가공식품 중 바실러스 세레우스(Bacillus cereus) 와 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens)는 다음과 같이 적용한다.

(1) 바실러스 세레우스

① 장류(메주 제외) 및 소스류, 복합조미식품, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품 : g 당 10,000 이하(멸균제품은 음성이어야 한다)

② ① 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : g 당 1,000 이하(멸균제품은 음성이어야 한다).

(2) 클로스트리디움 퍼프린젠스

① 장류(메주 제외), 고춧가루 또는 실고추, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품, 복합조미식품, 향신료가공품, 식초, 카레분 및 카레(액상제품 제외) : g 당 100 이하(멸균제품은 음성이어야 한다)

② ① 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : 음성

제 10, 8.1.5 중 표 1 및 표 2를 각각 다음과 같이 한다.

표 1. 유전자재조합 콩의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	콩 (118 bp)	Le1n02-5' Le1n02-3' Le1-Taq	5'-GCC CTC TAC TCC ACC CCC A-3' 5'-GCC CAT CTG CAA GCC TTT TT-3' 5'-FAM-AGC TTC GCC GCT TCC TTC AAC TTC AC-TAMRA-3'
스크 리닝	CaMV p35S (101 bp) tNOS (151 bp)	P35S 1-5' P35S 1-3' P35S-Taq NOS ter 2-5' NOS ter 2-3' NOS-Taq	5'-ATT GAT GTG ATA TCT CCA CTG ACG T-3' 5'-CCT CTC CAA ATG AAA TGA ACT TCC T-3' 5'-FAM-CCC ACT ATC CTT CGC AAG ACC CTT CCT-TAMRA-3' 5'-GTC TTG CGA TGA TTA TCA TAT AAT TTC TG-3' 5'-CGC TAT ATT TTG TTT TCT ATC GCG T-3' 5'-FAM-AGA TGG GTT TTT ATG ATT AGA GTC CCG CAA-TAMRA-3'

구조 유전자	RRS (121 bp) MON89788 (139 bp) A2704-12 (64 bp) DP356043-5 (145 bp) DP305423-1 (149 bp)	RRS 01-5' RRS 01-3' RRS-Taq MON89788-5' MON89788-3' MON89788-Taq KVM175-5' SMO001-3' A2704-12-Taq DP356-f8-5' DP356-r8-3' DP305 f7-5' DP305 r7-3'	5'-CCT TTA GGA TTT CAG CAT CAG TGG-3' 5'-GAC TTG TCG CCG GGA ATG-3' 5'-FAM-CGC AAC CGC CCG CAA ATC C-TAMRA -3' 5'-TCC CGC TCT AGC GCT TCA AT-3' 5'-TCG AGC AGG ACC TGC AGA A-3' 5'-FAM-CTG AAG GCG GGA AAC GAC AAT CTG-TAMRA-3' 5'-GCA AAA AAG CGG TTA GCT CCT-3' 5'-ATT CAG GCT GCG CAA CTG TT-3' 5'-FAM-CGG TCC TCC GAT CGC CCT TCC-TAMRA-3' 5'-CTT TTG CCC GAG GTC GTT AG-3' 5'-GCC CTT TGG TCT TCT GAG ACT G-3' 5'-CCC GTG TTC TCT TTT TGG CTA-3' 5'-TGA ATT TCT AAC CTG GCT GCT ATA GTT-3'

표 2. 유전자재조합 옥수수의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	옥수수 (151 bp) 옥수수 (114 bp)	SSllb 1-5' SSllb 1-3' SSllb-Taq SSllb 3-5' SSllb 3-3' SSllb-Taq	5'-CTC CCA ATC CTT TGA CAT CTG C-3' 5'-TCG ATT TCT CTC TTG GTG ACA GG-3' 5'-FAM-AGC AAA GTC AGA GCG CTG CAA TGC A -TAMRA-3' 5'-CCA ATC CTT TGA CAT CTG CTC C-3' 5'-GAT CAG CTT TGG GTC CGG A-3' 5'-FAM-AGC AAA GTC AGA GCG CTG CAA TGC A -TAMRA-3'
스크 리닝	CaMV p35S (101 bp) tNOS (151 bp)	P35S 1-5' P35S 1-3' P35S-Taq NOS ter 2-5' NOS ter 2-3' NOS-Taq	5'-ATT GAT GTG ATA TCT CCA CTG ACG T-3' 5'-CCT CTC CAA ATG AAA TGA ACT TCC T-3' 5'-FAM-CCC ACT ATC CTT CGC AAG ACC CTT CCT-TAMRA-3' 5'-GTC TTG CGA TGA TTA TCA TAT AAT TTC TG-3' 5'-CGC TAT ATT TTG TTT TCT ATC GCG T-3' 5'-FAM-AGA TGG GTT TTT ATG ATT AGA GTC CCG CAA-TAMRA-3'
구조 유전자	Bt176 (100 bp) Bt11 (127 bp) GA21 (133 bp) T25 (149 bp) MON810 (113 bp) NK603 (143 bp) TC1507 (103 bp) MON863 (152 bp) DAS59122-7 (141 bp) MON88017 (100 bp) MIR604 (142 bp) MON89034 (112 bp) MIR162 (149 bp) DP098140-6 (147 bp)	Bt176 2-5' Bt176 2-3' Bt176-Taq Bt11 3-5' Bt11 3-3' Bt11-Taq GA21 3-5' GA21 3-3' GA21-Taq T25 1-5' T25 1-3' T25-Taq M810 2-5' M810 2-3' M810-Taq NK603 01-5' NK603 01-3' TC1507 01-5' TC1507 01-3' tahsp17-5‘ MON 3-3‘ DAS 5-5‘ Pubi-3‘ MON88017-G-5‘ MON88017-G-3‘ MIR604-CJB264-5‘ MIR604es-LB-R-3' MON89034-5' MON89034-3' MON89034-Taq FE02402-5' FE01004-3' DP098140-6-5' DP098140-6-3'	5'-TGT TCA CCA GCA GCA ACC AG-3' 5'-ACT CCA CTT TGT GCA GAA CAG ATC T-3' 5'-FAM-CCG ACG TGA CCG ACT ACC ACA TCG A-TAMRA-3' 5'-AAA AGA CCA CAA CAA GCC GC-3' 5'-CAA TGC GTT CTC CAC CAA GTA CT-3' 5'-FAM-CGA CCA TGG ACA ACA ACC CAA ACA TCA-TAMRA-3' 5'-GAA GCC TCG GCA ACG TCA-3' 5'-ATC CGG TTG GAA AGC GAC TT-3' 5'-FAM-AAG GAT CCG GTG CAT GGC CG -TAMRA-3' 5'-GCC AGT TAG GCC AGT TAC CCA-3' 5'-TGA GCG AAA CCC TAT AAG AAC CCT-3' 5'-FAM-TGC AGG CAT GCC CGC TGA AAT C- TAMRA-3' 5'-GAT GCC TTC TCC CTA GTG TTG A-3' 5'-GGA TGC ACT CGT TGA TGT TTG-3' 5'-FAM-AGA TAC CAA GCG GCC ATG GAC AAC AA-TAMRA-3' 5'-TAT CTT GCT CGA TGC CTT CTC C-3' 5'-ACA CCA TTG CAG ATT CTG CTA ACT-3' 5'-GCT TCA ACA GGG CTG AGT TTG-3' 5'-CCC CAC ACA GTT TGG GAT CTA-3' 5'-GTG TTT TTT GGA TCC CCG G-3' 5'-CCA TCA TGG TTG GTT GGA CTT-3' 5'-GCA CCT GTG ATT GGC TCA TAA A-3' 5'-CTC CCT TAA TTC TCC GCT CAT G-3' 5'-GCT AGC TTG ATG GGG ATC AGA TTG-3' 5'-GAT TGG TTT GTT TTC GGC AGT ATG-3' 5'-TCG CGC GCG GTG TCA TCT ATG-3' 5'-CGC GAC ACA CCT CGT TAG TTA A-3' 5'-CTC CAT ATT GAC CAT CAT ACT C-3' 5'-GGG TTG AAA TGA AAT TTC CAA TAC-3' 5'-FAM-ATC CCC GGA AAT TAT GTT-MGBNFQ-3' 5'-GTG GAC TGA AAG GAG ACT TTG TTT ATC-3' 5'-GAT TGT CGT TTC CCG CCT TCA GTT-3' 5'-TCT CTT TGC TTG GTC TTT CTC TAT CGA-3' 5'-CCA AAC GTA AAA CGG CTT GTC C-3'

제 10, 8.1.5 중 4)를 다음과 같이 한다.

4) 시험조작(PCR)

각 추출 DNA에 대한 PCR은 2회의 확인시험으로 나누어 아래의 방법으로 실시하며, 1차 확인시험에서는 내재유전자와 전사개시인자(promoter 35S) 및/또는 전사종결인자(NOS terminator)에 대한 프라이머로 PCR을 실시한다. 그 결과 2 반복 추출 DNA 중 내재성 유전자 특이 PCR 산물이 확인된 DNA에서의 35S 프로모터와 NOS 터미네이터의 검출 결과에 따라 다음의 유전자재조합 이벤트에 대한 2차 확인시험을 실시한다.

① 35S 프로모터와 NOS 터미네이터 특이 PCR 산물이 모두 확인된 경우: RRS, MON89788, A2704-12, DP356043-5, DP305423-1,  Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, GA21, MON88017, MIR604, MON89034, MIR162, DP098140-6

② 35S 프로모터 특이 PCR 산물만 확인된 경우: MON89788, A2704-12, DP356043-5, DP305423-1, Bt176, T25, MON810, TC1507, DAS59122-7, DP098140-6

③ NOS 터미네이터 특이 PCR 산물만 확인된 경우: MON89788, DP356043-5, DP305423-1, GA21, MIR604, MIR162, DP098140-6

④ 35S 프로모터와 NOS 터미네이터 특이 PCR 산물이 모두 확인되지 않은 경우: MON89788, DP356043-5, DP305423-1, DP098140-6

제 10, 8.1.5, 6) 중 다)를 다음과 같이 한다.

다) 유전자재조합 이벤트 중 35S 프로모터를 사용하는 것으로는 RRS, Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, MON88017, A2704-12, MON89034가 있으며, NOS 터미네이터를 사용하는 것으로는 RRS, Bt11, GA21, NK603, MON863, MON88017, MIR604, MON89034, MIR162가 있다.

제 10, 8.1.11, 2) 중 나)를 다음과 같이 한다.

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 9의 프라이머와 프로브를 사용하면서 PCR 반응액의 총량을 25 μL로 할 경우 조성은 표 10, 11, 12, 13, 14와 같다. 다만, PCR 반응액 조성은 프라이머와 프로브 또는 Real-Time PCR 기기에 따라 다를 수 있으므로 시약이나 기기의 사용 매뉴얼을 참고하여 적용한다. 각 PCR 반응 시에는 음성대조군으로서 주형 DNA 대신 멸균증류수를 사용한 것(NTC, no template control)을, 양성대조군으로 비유전자재조합(non-GMO) DNA를 함유한 것(동일 작물로서 0%(w/w) 표준시료에서 추출한 DNA 등)과 검출하고자 하는 재조합 DNA를 함유한 것(동일 작물로서 분석 대상 GMO를 포함하는 표준시료에서 추출한 DNA 등)을 시료와 함께 PCR 시험을 한다. PCR에서 생길 수 있는 오차를 감소시키기 위해 하나의 DNA 시료액에 대하여 3 반복 시험(3 웰 분량의 PCR 반응액을 잉여분을 고려하여 한번에 조제하여 동일 플레이트에서 시험)을 실시하여 측정한다.

제 10, 8.1.11 중 표 9 및 표 14를 각각 다음과 같이 하고, “표 14”부터 “표 16”까지를 “표 15”부터 “표 17”까지로 한다.

표 9. 유전자재조합 면화의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	면화 (76 bp)	acp1 primer1-5' acp1 primer2-3' acp1 probe-Taq	5'-ATT GTG ATG GGA CTT GAG GAA GA-3' 5'-CTT GAA CAG TTG TGA TGG ATT GTG-3' 5'-FAM-ATT GTC CTC TTC CAC CGT GAT TCC GAA -TAMRA-3'
구조유전자	531* (72 bp)	531 primer1-5' 531 primer2-3' 531 probe-Taq	5'-TCC CAT TCG AGT TTC TCA CGT-3' 5'-AAC CAA TGC CAC CCC ACT GA-3' 5'-FAM-TTG TCC CTC CAC TTC TTC TC-TAMRA-3'
	1445 (87 bp)	1445 primer1-5' 1445 primer2-3' 1445 probe-Taq	5'-GGA GTA AGA CGA TTC AGA TCA AAC AC-3' 5'-ATC GAC CTG CAG CCC AAG CT-3' 5'-FAM-ATC AGA TTG TCG TTT CCC GCC TTC AGT TT -TAMRA-3'
	15985 (82 bp)	15985 primer1-5' 15985 primer2-3' 15985 probe-Taq	5'-GTT ACT AGA TCG GGG ATA TCC-3' 5'-AAG GTT GCT AAA TGG ATG GGA-3' 5'-FAM-CCG CTC TAG AAC TAG TGG ATC TGC ACT GAA-TAMRA-3'
	Mon88913 (94 bp)	Mon88913 primer1-5' Mon88913 primer2-3' Mon88913 probe-Taq	5'-GGC TTT GGC TAC CTT AAG AGA GTC-3' 5'-CAA ATT ACC CAT TAA GTA GCC AAA TTA C-3' 5'-FAM-AAC TAT CAG TGT TTG ACT ACA T- MGBNFQ**-3'
	LLCotton25 (79 bp)	KVM156 1-5' KVM155 2-3' TM018 probe-Taq	5'-CAA GGA ACT ATT CAA CTG AG-3' 5'-CAG ATT TTT GTG GGA TTG GAA TTC-3' 5'-FAM-CTT AAC AGT ACT CGG CCG TCG ACC GC -TAMRA-3'
	281/3006 (111 bp)	281 f1-5' 281 r2-3' 281s2 probe-Taq	5'-CTC ATT GCT GAT CCA TGT AGA TTT C-3' 5'-GGA CAA TGC TGG GCT TTG TG-3' 5'-FAM-TTG GGT TAA TAA AGT CAG ATT AGA GGG AGA CAA -TAMRA-3'
	GHB614 (120 bp)	SHA007-5‘ SHA008-3' TM072-Taq	5'-CAA ATA CAC TTG GAA CGA CTT CGT-3' 5'-GCA GGC ATG CAA GCT TTT AAA-3' 5'-FAM-CTC CAT GGC GAT CGC TAC GTT CTA GAA TT-TAMRA-3'

* 면화 531 검출용 PCR 검사 결과 양성인 경우 별도로 15985 PCR 검사 결과를 확인하여 15985 양성인 경우 “15985 검출”로 판정하고 15985 음성인 경우 “531 검출”로 판정한다.

** MGBNFQ : Minor groove binding non-fluorescent quencher

표 14. 면화의 내재성 유전자와 면화 GHB614 검사용 PCR 반응액 조성

성 분	최종 농도(well)	1회 분량(μL)
Universal Master Mix (2 X)	1 X	12.5
프라이머(각 10 μM)	각 400 nM	각 1
Probe (10 μM)	200 nM	0.5
주형 DNA(50 ng/μL)	100 ng	2
멸균증류수	반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가	8
전체량		25

제 10, 8.1.12 중 “표 17”부터 “표 21”까지를 “표 18”부터 “표 22”까지로 한다.

제 10, 8.1.13 중 “표 22”부터 “표 29”까지를 “표 23”부터 “표 30”까지로 한다.

부  칙

제1조(시행일) 이 고시는 2011년 10월 17일부터 시행한다.

제2조(클로스트리디움 퍼프린젠스 규격기준에 관한 적용례) 제 2. 5. 4)의 개정 규정은 이 고시 시행 당시 종전의 규정에 따라 제조․가공 또는 수입한 식품(수입하기 위해 선적한 식품 및 유통중인 농산물을 포함한다)에 대하여도 적용한다.

제3조(유전자재조합식품의 시험법에 관한 경과조치) 이 고시 시행 당시 종전의 규정에 따라 제조·가공 또는 수입한 식품(수입하기 위해 선적한 식품 및 유통 중인 농산물을 포함한다)은 해당 식품의 유통기한까지 종전의 규정에 따른다.

제4조(재검토기한) 「훈령·예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정」(대통령 훈령 제248호)에 따라 이 고시 발령 후의 법령이나 현실여건의 변화 등을 검토하여 이 고시를 폐지하거나 개정 등의 조치를 하여야 하는 기한은 2014년 8월 10일까지로 한다.

신․ 구조문 대비표

현  행

개  정 안

제 1. (생  략)

제 2. (생  략)

1. ∼ 4. (생  략)

5. 식품일반의 기준 및 규격

1) ～ 3 (생  략)

4) 식중독균

식육(제조, 가공용원료는 제외한다), 살균 또는 멸균처리하였거나 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품에서는 특성에 따라 살모넬라(Salmonella spp.), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus), 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens), 리스테리아 모노사이토제네스(Listeria monocytogenes), 대장균 O157:H7(Escherichia coli O157:H7), 캠필로박터 제주니(Campylobacter jejuni), 여시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 등 식중독균이 검출되어서는 아니되며, 또한 식육 및 식육제품에 있어서는 결핵균, 탄저균, 브루셀라균이 검출되어서는 아니 된다. 다만, ‘제 5. 식품별 기준 및 규격’에서 식중독균에 대한 규격이 정하여진 식품에는 해당식품의 규격을 적용하며, 그 외의 가공식품 중 바실러스 세레우스(Bacillus cereus)는 다음과 같이 적용한다.

(1) 장류(메주 제외) 및 소스류, 복합조미식품, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품 : g 당 10,000 이하(단 멸균제품은 음성이어야 한다)

(2) 위 (1) 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : g 당 1,000 이하(단 멸균제품은 음성이어야 한다).

5) ∼ 17) (생  략)

6. (생  략)

제3. ∼ 제 9. (생  략)

제 10. 일반시험법

1.～ 7. (생  략)

8. 식품표시 관련 시험법

8.1 유전자재조합식품의 시험법

8.1.1 ∼ 8.1.4 (생  략)

8.1.5 정성시험

1) ∼ 3) (생  략)

표 1. 유전자재조합 콩의 PCR검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	(생 략)	(생 략)	(생 략)
스크 리닝	(생 략)	(생 략)	(생 략)
구조 유전자	(생 략) <신설> <신설>	(생 략) <신설> <신설>	(생 략) <신설> <신설>

표 2. 유전자재조합 옥수수의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	품 종 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성유전자	(생 략)	(생 략)	(생 략)
스크리닝	(생 략)	(생 략)	(생 략)
구조유전자	(생 략) <신설> <신설>	(생 략) <신설> <신설>	(생 략) <신설> <신설>

표 3. ～표 4. (생  략)

4) 시험조작(PCR)

(생  략)

① 35S 프로모터와 NOS 터미네이터 특이 PCR 산물이 모두 확인된 경우: RRS, Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, GA21, MON88017, MIR604, MON89034

② 35S 프로모터 특이 PCR 산물만 확인된 경우: Bt176, T25, MON810, TC1507, DAS59122-7, A2704-12

③ NOS 터미네이터 특이 PCR 산물만 확인된 경우: GA21, MIR604

④ 35S 프로모터와 NOS 터미네이터 특이 PCR 산물이 모두 확인되지 않은 경우: MON89788

가) ∼ 다) (생  략)

5) (생  략)

6) 분석 결과의 판정 및 처리

가) ∼ 나) (생  략)

다) 유전자재조합 이벤트 중 35S 프로모터를 사용하는 것으로는 RRS, Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, MON88017, A2704-12, MON89034가 있으며, NOS 터미네이터를 사용하는 것으로는 RRS, Bt11, GA21, NK603, MON863, MON88017, MIR604, MON89034가 있다.

라) (생  략)

8.1.6 ∼ 8.1.10 (생  략)

8.1.11 유전자재조합 면화

1) (생  략)

2) 시약 및 시액

가) (생  략)

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 9의 프라이머와 프로브를 사용하면서 PCR 반응액의 총량을 25 μL로 할 경우 조성은 표 10, 11, 12, 13과 같다.

(생  략)

표 9. 유전자재조합 면화의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와  프로브

목적	품 종 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	(생 략)	(생 략)	(생 략)
구조유전자	(생 략)	(생 략)	(생 략)
	(생 략)	(생 략)	(생 략)
	(생 략)	(생 략)	(생 략)
	(생 략)	(생 략)	(생 략)
	(생 략)	(생 략)	(생 략)
	(생 략) <신설>	(생 략) <신설>	(생 략) <신설>

* (생  략)

** (생  략)

표 10. ∼ 표 13. (생  략)

<신설>

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석

(생  략)

96 웰 플레이트 방식의 PCR 반응 조건은 표 14, 15와 같으며, PCR 반응 종료 후 실험결과를 해석한다.

(생  략)

표 14. (생  략)

표 15. (생  략)

4) 분석결과의 판정

(생  략)

반복시험에서도 동일한 결과인 경우 ‘검사불능’으로 판정한다(표 16).

표 16. (생  략)

8.1.12 유전자재조합 카놀라

1) (생  략)

2) 시약 및 시액

가) 프라이머와 프로브

유전자재조합 카놀라 검출에 사용되는 프라이머와 프로브는 표 17과 같으며, 이와 동등한 결과를 얻을 수 있는 프라이머와 프로브를 사용할 수도 있다.

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 17의 프라이머와 프로브를 사용하면서 PCR 반응액의 총량을 25 μL로 할 경우 PCR 반응액 조성은 표 18, 19, 20과 같다.

(생  략)

표 17. (생  략)

표 18. (생  략)

표 19. (생  략)

표 20. (생  략)

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)

카놀라 PCR 반응 조건은 표 21과 같으며, 그 외 사항은 8.1.11 유전자재조합 면화 3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)에 따른다.

표 21. (생  략)

4) (생  략)

8.1.13 유전자재조합 사탕무, 알팔파

(생  략)

1) (생  략)

2) 시약 및 시액

가) 프라이머와 프로브

유전자재조합 사탕무와 알팔파 검출에 사용되는 프라이머와 프로브는 표 22와 같으며, 이와 동등한 결과를 얻을 수 있는 프라이머와 프로브를 사용할 수도 있다.

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 22의 프라이머와 프로브를 사용하면서 PCR 반응액의 총량을 25 μL로 할 경우 PCR 반응액 조성은 표 23, 24, 25, 26, 27과 같다.

(생  략)

표 22. (생  략)

표 23. (생  략)

표 24. (생  략)

표 25. (생  략)

표 26. (생  략)

표 27. (생  략)

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)

사탕무의 PCR 반응조건은 표 28과 같고 알팔파의 PCR 반응조건은 표 29와 같으며, 그 외 사항은 8.1.11 유전자재조합 면화 3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)에 따른다.

표 28. (생  략)

표 29. (생  략)

4) (생  략)

8.2 ∼ 8.3 (생  략)

9. 일반시험법 (생  략)

제 11. ∼ 제 12. (생  략)

제 1. (현행과 같음)

제 2. (현행과 같음)

1. ∼ 4. (현행과 같음)

5. 식품일반의 기준 및 규격

1) ～ 3) (현행과 같음)

4) 식중독균

---------------------------- ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------장염비브리오균(Vibrio parahaemolyticus),--------------- ------------------------------------------------------------ ------------------------------ ------------------------------ ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ ------------------------------ ------------------------------ ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ ---- 바실러스 세레우스(Bacillus cereus) 와 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens)-------.

(1) 바실러스 세레우스

① 장류(메주 제외) 및 소스류, 복합조미식품, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품 : g 당 10,000 이하(멸균제품은 음성이어야 한다)

② ① 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : g 당 1,000 이하(멸균제품은 음성이어야 한다).

(2) 클로스트리디움 퍼프린젠스

① 장류(메주 제외), 고춧가루 또는 실고추, 김치류, 젓갈류, 절임식품, 조림식품, 복합조미식품, 향신료가공품, 식초, 카레분 및 카레(액상제품 제외) : g 당 100 이하(멸균제품은 음성이어야 한다)

② ① 이외의 식품 및 개별규격이 정하여지지 아니한 식품 중 더 이상의 가공, 가열조리를 하지 않고 그대로 섭취하는 가공식품 : 음성

5) ∼ 17) (현행과 같음)

6. (현행과 같음)

제3.∼ 제 9. (현행과 같음)

제 10. 일반시험법

1.～7.  (현행과 같음)

8. 식품표시 관련 시험법

8.1 유전자재조합식품의 시험법

8.1.1 ∼ 8.1.4 (현행과 같음)

8.1.5 정성시험

1) ∼ 3) (현행과 같음)

표 1. 유전자재조합 콩의 PCR검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	이벤트 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
스크 리닝	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
구조 유전자	(현행과 같음) DP356043-5 (145 bp) DP305423-1 (149 bp)	(현행과 같음) DP356-f8-5' DP356-r8-3' DP305 f7-5' DP305 r7-3'	(현행과 같음) 5'-CTT TTG CCC GAG GTC GTT AG-3' 5'-GCC CTT TGG TCT TCT GAG ACT G-3' 5'-CCC GTG TTC TCT TTT TGG CTA-3' 5'-TGA ATT TCT AAC CTG GCT GCT ATA GTT-3'

표 2. 유전자재조합 옥수수의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와 프로브

목적	품 종 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성유전자	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
스크리닝	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
구조유전자	(현행과 같음) MIR162 (149 bp) DP098140-6 (147 bp)	(현행과 같음) FE02402-5' FE01004-3' DP098140-6-5' DP098140-6-3'	(현행과 같음) 5'-GTG GAC TGA AAG GAG ACT TTG TTT ATC-3' 5'-GAT TGT CGT TTC CCG CCT TCA GTT-3' 5'-TCT CTT TGC TTG GTC TTT CTC TAT CGA-3' 5'-CCA AAC GTA AAA CGG CTT GTC C-3'

표 3. ～표 4. (현행과 같음)

4) 시험조작(PCR)

(현행과 같음)

① ---------------------------

----------------------------

---RRS, MON89788, A2704-12, DP356043-5, DP305423-1,  Bt11, Bt176, T25, MON810, NK603, TC1507, MON863, DAS59122-7, GA21, MON88017, MIR604, MON89034, MIR162, DP098140-6

② --------------------------

------------ MON89788, A2704-12, DP356043-5, DP305423-1, Bt176, T25, MON810, TC1507, DAS59122-7, DP098140-6

③ --------------------------

-------------- MON89788, DP356043-5, DP305423-1, GA21, MIR604, MIR162, DP098140-6

④ -------------------------

--------------------------

--------------- MON89788, DP356043-5, DP305423-1, DP098140-6

가) ∼ 다) (현행과 같음)

5) (현행과 같음)

6) 분석 결과의 판정 및 처리

가) ∼ 나) (현행과 같음)

다) -------------------------

--------------------------

----------------------------

----------------------------

----------------------------

----------------------------

--------------------------

--------------------------

--------------------------

-------MON89034, MIR162---.

라) (현행과 같음)

8.1.6 ∼ 8.1.10 (현행과 같음)

8.1.11 유전자재조합 면화

1) (현행과 같음)

2) 시약 및 시액

가) (현행과 같음)

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

--------------------------

--------------------------

--------------------------

--------------13, 14와-----.

(현행과 같음)

표 9. 유전자재조합 면화의 PCR 검사에 사용되는 프라이머와  프로브

목적	품 종 (증폭산물크기)	프라이머/ 프로브	염기서열
내재성 유전자	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
구조유전자	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음)	(현행과 같음)	(현행과 같음)
	(현행과 같음) GHB614 (120 bp)	(현행과 같음) SHA007-5‘ SHA008-3' TM072-Taq	(현행과 같음) 5'-CAA ATA CAC TTG GAA CGA CTT CGT-3' 5'-GCA GGC ATG CAA GCT TTT AAA-3' 5'-FAM-CTC CAT GGC GAT CGC TAC GTT CTA GAA TT-TAMRA-3'

* (현행과 같음)

** (현행과 같음)

표 10. ∼ 표 13. (현행과 같음)

표 14. 면화의 내재성 유전자와 면화 GHB614 검사용 PCR 반응액 조성

성 분	최종 농도(well)	1회 분량(μL)
Universal Master Mix (2 X)	1 X	12.5
프라이머(각 10 μM)	각 400 nM	각 1
Probe (10 μM)	200 nM	0.5
주형 DNA(50 ng/μL)	100 ng	2
멸균증류수	반응 총액이 25 μL가 되도록 첨가	8
전체량		25

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석

(현행과 같음)

---------------------------  -------- 표 15, 16과--------

--------------------------

------

(현행과 같음)

표 15. (현행 표 14.와 같음)

표 16. (현행 표 15.와 같음)

4) 분석결과의 판정

(현행과 같음)

--------------------------

--------------------------

--(표 17).

표 17. (현행 표 16.과 같음)

8.1.12 유전자재조합 카놀라

1) (현행과 같음)

2) 시약 및 시액

가) 프라이머와 프로브

-------------------------- ----------------------- 표 18--------------------------------------------------------------------------.

나) 실시간 PCR용 반응액의 조제

표 18---------------------- ------------------------------------------------------------ 표 19, 20, 21------ --.

(현행과 같음)

표 18. (현행 표 17.과 같음)

표 19. (현행 표 18.과 같음)

표 20. (현행 표 19.과 같음)

표 21. (현행 표 20.과 같음)

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)

-------------------  표 22와 ------------------------

--------------------------  -------------------------- ------------------.

표 22. (현행 표 21.과 같음)

4) (현행과 같음)

8.1.13 유전자재조합 사탕무, 알팔파

(현행과 같음)

1) (현행과 같음)

2) 시약 및 시액

가) 프라이머와 프로브

-------------------------

-------------------------

---- 표 23과 -------------

-------------------------

-------------------------

--

나) ------------------------

표 23-------------------- -------------------------------------------------- ------------ 표 24, 25, 26, 27, 28 -----.

(현행과 같음)

표 23. (현행 표 22.과 같음)

표 24. (현행 표 23.과 같음)

표 25. (현행 표 24.과 같음)

표 26. (현행 표 25.과 같음)

표 27. (현행 표 26.과 같음)

표 28. (현행 표 27.과 같음)

3) 시험 조작(Real-Time PCR 장치에 의한 정성분석)

---------------------- 표 29 -------------------------- 표 30과 ------------------- -------------------------- ------------------------------------------------.

표 29. (현행 표 28.과 같음)

표 30. (현행 표 29.과 같음)

4) (현행과 같음)

8.2 ∼ 8.3 (현행과 같음)

9. 일반시험법 (현행과 같음)

제 11. ∼ 제 12. (현행과 같음)